IFN-γ、IL-17、IL-10与HSP70的表达在PI-IBS中的作用研究

发布时间：2020-01-17 10:53

【摘要】：目的通过建立PI-IBS动物模型,并对该模型进行症状评估,同时检测肠组织中IFN-γ、IL-17、IL-10和HSP70的表达及外周血中IFN-γ、IL-17、IL-10的表达情况,初步探讨IFN-γ、IL-17、IL-10与HSP70的表达在PI-IBS发病机制中的作用。方法40只雌性C57BL\6小鼠随机分为PI-IBS组和对照组,每组各20只。PI-IBS组小鼠用0.2ml含350条旋毛虫幼虫的生理盐水进行灌胃,对照组小鼠则用等体积的生理盐水进行灌胃。分别于感染后第2、4、8周,取末端回肠和近端结肠进行组织病理学评分检测。并于旋毛虫感染后第8周检测小鼠腹壁撤退反射(AWR)评分以评估小鼠内脏敏感性的变化情况,检测肠道传输时间(ITT)和粪便含水百分数评估小鼠肠道动力的改变;采用ELISA测定不同肠段组织(十二指肠、空肠、回肠、结肠)以及外周血中IFN-γ、IL-17和IL-10水平的改变;分别用免疫组化、RT-PCR和Western Blot方法检测HSP70在末端回肠和近端结肠组织中的表达变化情况。结果在感染旋毛虫后第8周,PI-IBS小鼠肠粘膜组织急性炎症完全恢复至正常状态;在结直肠扩张容积分别为0.35和0.5ml时,PI-IBS组小鼠肠道腹壁撤退反射(AWR)评分均显著高于对照组(P0.01);PI-IBS小鼠肠道传输时间缩短、每2h粪便含水百分数增高,较正常对照组具有显著性差异(P0.01);ELISA结果显示:与对照组相比,PI-IBS组小鼠的IFN-γ和IL-17水平在十二指肠、回肠和外周血中表达升高(P0.05);而IL-10水平在空肠、回肠、结肠以及外周血中的表达显著降低(P0.05);免疫组化结果显示PI-IBS组小鼠回肠和结肠粘膜组织中HSP70阳性信号均明显高于对照组小鼠,RT-PCR和Western Blot结果均显示PI-IBS组小鼠回肠和结肠粘膜中HSP70水平显著升高(P0.05)。结论感染后肠易激综合征小鼠各肠段中不同细胞因子的表达水平存在差异,外周血与部分肠段组织中细胞因子的表达变化呈同步化改变,这种改变可能与PI-IBS内脏高敏感性和肠道运动功能紊乱相关;PI-IBS小鼠肠组织细胞因子的改变可能与肠粘膜HSP70的表达变化有关,肠粘膜中高水平的HSP70在某种意义上可以反映PI-IBS肠粘膜的慢性炎症情况。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R574

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本文编号：2570579