【摘要】:目的:探讨长链脂酰辅酶A合成酶(long-chain acyl-Co A synthetase,Acsl)抑制剂triacsin C对HSC-T6细胞增殖的影响。方法:应用不同浓度的Acsl抑制剂triacsin C作用HSC-T6细胞不同时间段;利用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测triacsin C对HSC-T6细胞增殖的影响。同时,应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,q PCR)检测triacsin C作用HSC-T6细胞前后Acsl m RNA的表达。结果:1.不同浓度(500μg/L、1000μg/L、1500μg/L、2000μg/L)triacsin C作用HSC-T6细胞24 h,细胞存活率分别为(12.76±6.25)%、(17.91±9.31)%、(16.76±15.89)%、(12.22±13.50)%,48 h后细胞存活率分别为(1.64±1.61)%、(0.64±1.82)%、(1.57±2.85)%、(0.19±2.59)%。在该浓度范围内,各时间段triacsin C对HSC-T6细胞增殖抑制作用显著(P0.05)。HSC-T6细胞生长抑制率随着triacsin C作用时间延长而增加,但并未随着triacsin C作用浓度增大而出现相应改变。2.较小剂量(1μg/L、10μg/L、100μg/L、1000μg/L)triacsin C作用HSC-T6细胞24 h,细胞存活率分别为(85.40±11.13)%、(88.45±8.97)%、(34.96±6.23)%、(11.53±5.30)%,48 h后细胞存活率分别为(88.61±5.78)%、(92.86±8.03)%、(39.13±3.71)%、(2.36±0.70)%。1μg triacsin C作用24 h、10μg/L triacsin C作用24h、48 h对HSC-T6细胞增殖无明显抑制作用(P0.05)。1μg triacsin C作用48 h对HSC-T6细胞增殖有明显抑制作用(P0.05)。在100μg/L、1000μg/L时,HSC-T6细胞生长抑制率随着triacsin C作用浓度增加而增加,但并未随着triacsin C作用时间延长而出现相应改变。3.更小剂量(0.01μg/L、0.1μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L)triacsin C作用HSC-T6细胞24 h,细胞存活率分别为(89.91±6.31)%、(88.08±5.68)%、(85.33±6.68)%、(58.55±9.64)%,48 h后细胞存活率分别为(89.52±5.68)%、(92.75±3.60)%、(88.83±5.54)%、(62.80±4.85)%。在该浓度范围内,各时间段triacsin C作用各时间段对HSC-T6细胞增殖抑制作用显著(P0.05)。在该浓度范围内,HSC-T6细胞生长抑制率并未随着随着triacsin C作用浓度增加和作用时间延长而出现相应改变。4.Triacsin C作用HSC-T6细胞前,HSC-T6细胞中Acsl家族m RNA均有表达,其中Acsl5 m RNA表达量最高,相当于内参GAPDH的(4.74±0.06)%,而Acsl6表达量最低,仅相当于Acsl5的0.04%。HSC-T6细胞中Acsl m RNA表达量的高低依次为Acsl5Acsl3Acsl4Acsl1Acsl6。5.在100μg/L triacsin C作用HSC-T6细胞24 h后,Acsl1、Acsl4表达降低,与DMSO组相比,有统计学意义(P0.05)。结论:1.在一定浓度范围内,triacsin C对HSC-T6细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现时间依赖性。2.HSC-T6细胞中Acsl家族成员均有表达,但表达量不同,以Acsl5表达量最高,Acsl6表达量最低。3.Triacsin C主要通过下调Acsl1、Acsl4的表达抑制HSC-T6细胞增殖。
【图文】: 故其具有酸性,也被认为是一种,triacsins 的 IC50 值反映出在抑制细胞增riacsin C 的能力最强,故一般利用 triacsin 中的作用[40]。胞增殖多采用 MTT 法,而近年来越来越实验药物对细胞增殖的影响。CCK-8 与 M体中被某些脱氢酶还原成橙黄色的甲佨,相较于常用的 MTT 法,CCK-8 法灵敏度更 法还原后的甲佨并非脂溶性,可免去之后K-8 法观察了在 24 h、48 h 2 个时间段内的关系。1000 μg/L、1500 μg/L、2000 μg/L triacsin图 5.1 Triacsins 的分子结构
故其具有酸性,也被认为是一种,triacsins 的 IC50 值反映出在抑制细胞增riacsin C 的能力最强,,故一般利用 triacsin 中的作用[40]。胞增殖多采用 MTT 法,而近年来越来越实验药物对细胞增殖的影响。CCK-8 与 M体中被某些脱氢酶还原成橙黄色的甲佨,相较于常用的 MTT 法,CCK-8 法灵敏度更 法还原后的甲佨并非脂溶性,可免去之后K-8 法观察了在 24 h、48 h 2 个时间段内的关系。1000 μg/L、1500 μg/L、2000 μg/L triacsin图 5.1 Triacsins 的分子结构
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R575.2
【共引文献】
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本文编号:
2579778
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