FTO与FoxO1在非酒精性脂肪肝中的表达及其意义

发布时间：2017-03-20 17:00

  本文关键词：FTO与FoxO1在非酒精性脂肪肝中的表达及其意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景 非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是遗传-环境-代谢应激相关性疾病，与肥胖密切相关。FTO(fat mass and obesity associated)基因是Frayling发现的肥胖新基因。FTO在NAFLD中表达上调，促进肝脏细胞内的成脂及氧化应激。在肝脏发生胰岛素抵抗时，叉头转录因子O1(Forkhead BoxO1,FoxO1)的活性增加，引起糖脂代谢紊乱。然而，FTO与FoxO1在非酒精性脂肪肝发病过程中的关系及作用机制尚未完全阐明。本实验旨在观察FTO与FoxO1在非酒精性脂肪肝小鼠模型肝脏中的表达水平及组织学定位，及肝细胞脂肪变性模型中FTO mRNA、FoxO1mRNA的表达水平，并初步探讨其可能的机制，期望为NAFLD的防治提供新的思路。 目的 (1)观察非酒精性脂肪肝小鼠模型中FTO、FoxO1及AMPK的组织学定位及表达水平，并分析三者之间的相关性进一步探讨NAFLD发病的分子机制。 (2)探讨FTO与FoxO1在高脂诱导的人肝脏细胞中的表达水平,探讨二者在非酒精性脂肪肝中的作用机制。 方法 (1)用高能高脂饲料制备非酒精性脂肪肝小鼠动物模型,测肝指数；全自动生化仪检测AST、ALT、TG、TC、ALP、HDL、LDL；HE染色进行小鼠肝脏病理检测；用免疫组织化学方法检测FTO、FoxO1蛋白,AMPK的表达及组织学定位； (2)用含50%胎牛血清的培养基诱导人L02肝细胞脂肪变性模型,正常对照组用含10%胎牛血清的培养基进行培养，两组分别培养24h、48h、72h；油红O染色观察细胞内脂滴；全自动生化仪检测细胞上清肝酶及细胞内甘油三酯含量；RT-PCR检测不同时间点各组肝细胞内FTOmRNA、FoxO1mRNA表达； 结果 (1)模型组小鼠与正常组小鼠在喂养10周末相比肝重、体重及肝指数明显升高(P0.05)ALP、ALT、AST、LDL显著升高（P0.01）TC、TG亦明显增高（P0.05）HDL明显降低（P0.05）；HE染色结果显示模型组肝小叶内出现大量脂肪变性,正常组肝小叶内无脂肪变性；正常组FTO蛋白及FoxO1蛋白呈低分化表达，模型组FTO蛋白及FoxO1蛋白表达显著增高（P0.01)且二者的表达具有相关性，AMPK在模型组小鼠表达下调，AMPK与FoxO1尚不存在线性相关，FTO与AMPK之间存在相关性。 (2)油红O染色结果显示含50%胎牛血清的培养基24h、48h、72h均能成功诱导肝细胞脂肪变性模型，在各个时间点模型组肝酶及TG含量均高于正常对照组且随着时间延长含量增加；模型组FTOmRNA、FoxO1mRNA表达较对照组显著增高（P0.01）模型组三个时间点FTOmRNA、FoxO1mRNA在48h表达水平最高（P0.05），在24h、72h表达差异不明显（P0.05）。 结论 高脂能引起小鼠肝脏中FTO表达上调，FoxO1去磷酸化水平升高，AMPK磷酸化水平降低，且FTO与FoxO1共同作用与非酒精性脂肪肝发病机制密切相关。FTO与FoxO1在非酒精性脂肪肝中变化趋势一致，提示二者可能相互作用共同参与非酒精性脂肪肝的发病过程。
【关键词】：肥胖易感基因 叉头转录因子 非酒精性脂肪肝 腺苷酸活化蛋白激酶
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R575.5
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 主要英文缩略词表11-12
• 前言12-15
• 参考文献14-15
• 第一部分 FTO 与 FoxO1 在 NAFLD 小鼠肝脏中的表达及其意义15-31
• 材料和方法15-19
• 结果19-25
• 讨论25-28
• 结论28-29
• 参考文献29-31
• 第二部分 FTO 与 FoxO1 在 L02 肝细胞脂肪变性模型中的表达及其意义31-47
• 材料和方法31-39
• 结果39-44
• 讨论44-45
• 结论45-46
• 参考文献46-47
• 综述47-59
• 参考文献55-59
• 致谢59-60
• 个人简介60

【参考文献】

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1 范建高,李新建,朱军,李锐,戴菲,宋晓敏,刘天舒,陈兰,李锋;上海市成人代谢综合征与脂肪肝关系分析[J];中华内分泌代谢杂志;2005年04期

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本文编号：258091