LPS-TLR4通路在慢性酒精摄入大鼠胰腺纤维化发生的作用和机制研究

发布时间：2020-02-19 06:03

【摘要】：研究背景及目的:酒精性慢性胰腺炎(alcoholic chronic pancreatitis,ACP)的发病率逐年升高,因此,有关ACP的发生和发展机制受到科学家们的关注。近年来的研究发现G-细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在许多疾病的发生和发展起着重要的作用。LPS通过与模式识别受体(Toll-like receptor 4,TLR4)结合引起级联式炎症反应造成器官损伤。但是LPS-TLR4通路在ACP胰腺纤维化的确切作用和机制尚不十分明确。本研究目的是通过大鼠整体模型和胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSC)水平研究LPS-TLR4通路在酒精性性胰腺纤维化形成中的作用与机制。材料和方法:将48只体重120g±20g SD雄性大鼠随机分为两大组分别接受Lieber-De Carli酒精饲料和对照饲料喂养至10周末,于8周末再随机分为4组:(1)对照饲料喂养组;(2)对照饲料喂养加LPS组;(3)酒精饲料喂养组;(4)酒精饲料喂养加LPS组。8周末开始于(2)和(4)组每周经尾静脉注射LPS一次(3mg/kg),共3次,对照组注射生理盐水1ml。所有大鼠造模结束被采集胰腺组织标本。采用胰腺星状细胞系(RP-2细胞)进行体外研究。采用HE染色评价胰腺炎症程度,苯胺蓝染色评价胰腺胶原沉积程度。免疫组化法检测FSP-1和F4/80分别识别PSC和巨噬细胞。采用免疫荧光双染法检测PSC表达TLR4,巨噬细胞表达TLR4和TGF-β1。采用ELISA法检测胰腺I型胶原A1的含量。采用Western blot法检测RP-2细胞上Collagen I,Bambi,p Smad及NF-κB亚单位p65和p50变化。采用荧光定量RT-PCR检测胰腺细胞因子和RP-2细胞Bambi和Collagen I m RNA转录变化。结果:大鼠整体实验研究发现:LPS可引起酒精喂养和正常饮食喂养大鼠胰腺炎症和纤维化程度加重。LPS可激活TLR4通路引起PSC和巨噬细胞增殖,巨噬细胞表达TGF-β1增强。LPS可引起胰腺组织MCP-1、RANTES、TNFα和IL-6等炎症因子m RNA转录水平升高。体外研究发现LPS明显增加TGF-β1诱导的RP-2细胞胶原合成,其机制与LPS-TLR4通路活化可有效抑制RP-2细胞TGF-β1伪受体Bambi的合成有关,与TGF-β/smad通路无关。进一步研究结果显示:LPS与TLR4结合可激活RP-2细胞My D88-NF-κB信号通路,推测其与PSC介导I型胶原合成有关。结论:LPS是引起酒精性慢性胰腺炎胰腺纤维化形成的重要因素。LPS可以激活胰腺巨噬细胞和PSC释放致炎因子和I型胶原的合成。LPS-TLR4通路通过抑制Bambi上调TGF-β1诱导PSC合成I型胶原。抑制LPS-TLR4通路可能成为ACP抗胰腺纤维化的重要途径。
【图文】：

胰腺腺泡细胞坏死、水肿以及炎性细胞浸润程度加重（Fig 2.1A）；伤组织学评分结果显示：反复 LPS 注射可明显加重酒精喂养大鼠胰的程度（P<0.001）（图 2.1B）

原 A1 含量进行了检测，，结果显示反复 LPS 注射的酒精喂养大鼠胰腺 I 型胶原 A1 的含量明显高于单纯酒精喂养大鼠（Fig 2.2C）（P<0.001）。结果提示反复 LPS 注射可以加重酒精性胰腺纤维化的程度。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R576

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 朱本贵,李昌平;胰腺纤维化[J];胃肠病学和肝病学杂志;2003年06期

2 王瑜萍;王瑜真;张智高;尚庆玲;;胰腺纤维化发生机制的研究进展[J];实用医药杂志;2011年03期

3 张汝玲,王兴鹏,吴恺,龚自华,吴丽颖,董育玮;1型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂抑制大鼠胰腺纤维化形成[J];中华肝胆外科杂志;2005年01期

4 黄克楠;梁化印;郭瑞峰;王爱民;张莉;陈健;;细胞外基质在胰腺纤维化中的作用[J];中华内科杂志;2007年11期

5 周霞;徐可树;;转化生长因子-β3对肝脏和胰腺纤维化的影响[J];世界华人消化杂志;2007年28期

6 吴恺,张汝玲,王兴鹏;甘草酸对大鼠胰腺纤维化的干预作用及其机制[J];中国药理学通报;2003年12期

7 刘华生;林旭红;周景华;;胰泰复方对慢性胰腺炎胰腺纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原氨基端肽含量的影响[J];中国中医急症;2007年08期

8 李嘉;刘爽;孙海晨;崔叶青;王玉兰;李非;;结缔组织生长因子在胰腺组织纤维化中的作用及机制探讨[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2012年03期

9 梁晓强;章学林;顾宏刚;马恩伟;王玉凤;张静U

本文编号：2580933