硫化氢对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏炎性反应的作用

发布时间：2020-02-21 06:26

【摘要】：目的观察硫化氢(H2S)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠炎性因子水平的影响,探讨H2S防治NASH的可能机制。方法 2013年1月—2014年7月选用SPF级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为对照组、NASH模型组、硫氢化钠(Na HS)干预组,各20只。对照组给予普通饲料,NASH模型组给予高脂饲料,Na HS干预组给予高脂饲料的同时腹腔注射H2S供体Na HS(56 mg·kg-1·d-1),对照组和NASH模型组每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。8周后处死所有大鼠,留取静脉血及肝脏组织。检测血清及肝脏生化指标〔血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及肝脏组织TG、TC〕血浆及肝脏组织H2S水平、肝脏组织氧化应激指标〔丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)〕;HE染色观察肝脏组织病理学变化;检测肝脏组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)mRNA表达水平及肝脏组织TNF-α、IL-6、核因子κB抑制因子α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)表达水平。结果 NASH模型组和Na HS干预组血清ALT、AST、TG、TC水平及肝脏组织TG、TC水平均高于对照组,且Na HS干预组以上指标均低于NASH模型组(P0.05)。NASH模型组血浆H2S水平和肝脏组织H2S水平均低于对照组及Na HS干预组(P0.05)。与对照组比较,NASH模型组和Na HS干预组肝脏组织MDA水平升高,SOD水平降低(P0.05);与NASH模型组比较,Na HS干预组MDA水平降低,SOD水平升高(P0.05)。与对照组比较,NASH模型组肝脏组织结构紊乱,呈弥漫性脂肪变性、肝细胞灶性坏死,并可见淋巴细胞和中性粒细胞浸润;Na HS干预组肝脏组织脂肪变性、坏死及炎性反应程度较NASH模型组明显减轻。NASH模型组和Na HS干预组肝脏组织TNF-α、IL-6 mRNA表达水平和TNF-α、IL-6表达水平均高于对照组,且NASH模型组以上指标均高于Na HS干预组(P0.05)。与对照组比较,NASH模型组和Na HS干预组细胞质IκBα表达水平均降低,细胞核NF-κB p65表达水平均升高(P0.05);与NASH模型组比较,Na HS干预组细胞质IκBα表达水平升高,细胞核NF-κB p65表达水平降低(P0.05)。结论 H2S能够有效改善NASH大鼠肝脏组织病理变化,并抑制炎性反应,这可能是H2S发挥治疗作用的机制之一。
【图文】：

表达水平,统计学意义,核因子κB

注:与对照组比较，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05;TNF－α=肿瘤坏死因子α，IL－6=白介素6图23组大鼠TNF－α、IL－6mＲNA表达水平比较Figure2ComparisonofmＲNAexpressionlevelsofTNF－αandIL－6ofratsamongthreegroups注:β－actin=β肌动蛋白图3TNF－α、IL－6电泳结果Figure3ElectrophoresisresultsofTNF－αandIL－6protein注:与对照组比较，，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05图43组大鼠TNF－α、IL－6表达水平比较Figure4ComparisonofexpressionlevelsofTNF－αandIL－6ofratsamongthreegroups2.6肝脏组织IκBα、NF－κBp65表达水平比较3组肝脏组织IκBα、NF－κBp65表达水平比较，差异均有统计学意义(F=25.45、32.23，P＜0.05)。与对照组比较，NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织IκBα表达水平均降低，NF－κBp65表达水平均升高，差异有统计学意义(P＜0.05);与NASH模型组比较，NaHS干预组肝脏组织IκBα表达水平升高，NF－κBp65表达水平降低，差异有统计学意义(P＜0.05，见图5～6)。注:IκBα=核因子κB抑制因子，NF－κBp65=核因子κBp65图5IκBα、NF－κBp65电泳结果Figure5ElectrophoresisresultsofIκBαandNF－κBp65protein注:与对照组比较，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05图63组大鼠IκBα、NF－κBp65表达水平比较Figure6ComparisonofexpressionlevelsofIκBαandNF－κBp65ofratsamongthreegroups3讨论机体大多数组织均能通过含硫氨基酸的代谢过程合成内源性H2S，具有调节细胞凋亡、介导炎性反应等广泛的生理和病理效应。有研究表明，NASH患者和动物模型中H2S水平显著降低，与NASH病变程度呈反比，提示内源性H2S可能参与NASH发病［6］，但其具体

电泳图,电泳,表达水平

注:与对照组比较，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05;TNF－α=肿瘤坏死因子α，IL－6=白介素6图23组大鼠TNF－α、IL－6mＲNA表达水平比较Figure2ComparisonofmＲNAexpressionlevelsofTNF－αandIL－6ofratsamongthreegroups注:β－actin=β肌动蛋白图3TNF－α、IL－6电泳结果Figure3ElectrophoresisresultsofTNF－αandIL－6protein注:与对照组比较，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05图43组大鼠TNF－α、IL－6表达水平比较Figure4ComparisonofexpressionlevelsofTNF－αandIL－6ofratsamongthreegroups2.6肝脏组织IκBα、NF－κBp65表达水平比较3组肝脏组织IκBα、NF－κBp65表达水平比较，差异均有统计学意义(F=25.45、32.23，P＜0.05)。与对照组比较，NASH模型组和NaHS干预组肝脏组织IκBα表达水平均降低，NF－κBp65表达水平均升高，差异有统计学意义(P＜0.05);与NASH模型组比较，NaHS干预组肝脏组织IκBα表达水平升高，NF－κBp65表达水平降低，差异有统计学意义(P＜0.05，见图5～6)。注:IκBα=核因子κB抑制因子，NF－κBp65=核因子κBp65图5IκBα、NF－κBp65电泳结果Figure5ElectrophoresisresultsofIκBαandNF－κBp65protein注:与对照组比较，aP＜0.05;与NASH模型组比较，bP＜0.05图63组大鼠IκBα、NF－κBp65表达水平比较Figure6ComparisonofexpressionlevelsofIκBαandNF－κBp65ofratsamongthreegroups3讨论机体大多数组织均能通过含硫氨基酸的代谢过程合成内源性H2S，具有调节细胞凋亡、介导炎性反应等广泛的生理和病理效应。有研究表明，NASH患者和动物模型中H2S水平显著降低，与NASH病变程度呈反比，提示内源性H2S可能参与NASH发病［6］，但其具体

【参考文献】