【摘要】：目的：建立血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型,观察AKF-PD对血吸虫性肝纤维化的治疗效果,探索其有效治疗剂量。 方法：雄性昆明小鼠336只,适应性喂养1周后,随机分为①正常组(n=30)：不予以尾蚴感染及吡喹酮杀虫,自尾蚴感染后第8周开始予以0.5%CMCNa6ml/kg灌胃,每天一次,共16周；②模型组(n=30)：以腹部贴片法感染小鼠,每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴22+2条,不予以杀虫,自尾蚴感染后第8周开始予以0.5%CMCNa6ml/kg灌胃,每天一次,共16周；③单纯吡喹酮杀虫组(n=30)：以同样方法感染小鼠,感染6周后开始予以吡喹酮杀虫,吡喹酮剂量共1000mg/kg,分两天给药,杀虫1周后：予以0.5%CMCNa6ml/kg灌胃,每天一次,共16周；④杀虫+AKF-PD (62.5mg/Kg、125mg/Kg、250mg/Kg、500mg/Kg)组,每组30只,以同样方法感染小鼠及杀虫,杀虫1周后开始予以相应AKF-PD剂量及浓度灌胃,每天一一次,共16周；⑤杀虫+INF-a组(n=30)：以同样方法感染小鼠及杀虫,杀虫1周后开始予以IFN-a10万单位／只,肌肉注射,每天一次,共16周。各组小鼠于末次给药12小时后麻醉下处死,留取血清、肝脾组织分别行：(1)生化检测：血清谷丙转氨酶(Alanine minotransferase, ALT)、谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase, AST) (2)肝组织病理学检查：HE染色检测肉芽肿结节大小、VG(纤维染色)检测胶原表达、免疫组化染色检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。 结果： 1.血清ALT：模型组比正常组显著增高(P0.001),单纯吡喹酮杀虫组与模型组比较无显著性差异(p0.05)；杀虫+AKF-PD(62.5mg/kg, 125mg/kg,250mg/kg)组显著低于模型组(P0.05)；杀虫+AKF-PD250mg/kg组显著低于单纯吡喹酮杀虫组(P0.05),与杀虫+IFN-a组比较无显著差异(p0.05) 2.肝组织病理学检查： 少卵肉芽肿结节大小：模型组最大,正常者最小,两者比较差异显著(P0.001)；单纯吡喹酮杀虫组与模型组比较无显著差异(P0.05)；杀虫+AKF-PD各剂量组比模型组显著缩小(P0.05)；杀虫+AKF-PD各剂量组比单纯吡喹酮杀虫组显著缩小(P0.05)；杀虫+AKF-PD各剂量组与杀虫+IFN-a组比较,无显著差异(p0.05) VG纤维表达量：模型组比正常组显著增多(P0.001)；单纯吡喹酮杀虫组与模型组比较无显著差异(P0.05)；杀虫+AKF-PD各剂量组比模型组显著减少(P0.01)；杀虫+AKF-PD各剂量组比单纯吡喹酮杀虫组显著减少(P0.01)；杀虫+AKF-PD125mg/kg组比杀虫+IFN-α组显著减少(P0.01) 免疫组化Ⅰ、Ⅲ型胶原表达量：模型组比正常组显著增多(P0.001)；单纯吡喹酮杀虫组比模型组显著减少(P0.001)；杀虫+AKF-PD各剂量组比模型组显著减少(P0.001)；杀虫+AKF-PD (125mg/kg,250mg/kg)组比单纯吡喹酮杀虫组显著减少(P0.001)；杀虫+AKF-PD (125mg/kg,250mg/kg)组显著低于杀虫+干扰素组(P0.001) 结论： 1.血吸虫诱导的小鼠肝纤维化模型成功。 2.单纯吡喹酮杀虫后血吸虫肝纤维化仍能进展。 3.在杀虫的基础上,联合AKF-PD250mg/kg治疗可降低血吸虫性肝纤维化血清ALT,减轻小鼠肝脏炎症反应,保护肝细胞；联合AKF-PD治疗可缩小肉芽肿,减少胶原纤维表达,降低Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝脏的沉积,以AKF-PD 125mg/kg组效果最佳,效果优于IFN-a。
【图文】：
各组ALT、AST结果
细胞形态规则，，核大而圆，未见纤维组织增生，无肝细胞坏死，肝小叶无纤维间隔，汇管区有一定数量的结缔组织，内含小叶间动脉、小叶间静脉和小叶间胆管。(附图2)。小鼠予相应药物治疗16周后模型组:肝内可见典型的慢性虫卵肉芽肿形成，周围可见各组炎性细胞浸润，汇管区因肉芽肿形成、胶原纤维组织增生及炎细胞浸润而明显扩大、变形。单纯毗喳酮杀虫组、杀虫+AKF一PD(62.5mg/kg、SOOmg/kg)组:虫卵肉芽肿范围和密度略少一于模型组，虫卵周围包胶原纤维及炎症细胞浸润。杀虫+AKF一 PD(125mg/kg、25Omg/kg)及杀虫 +IFN一a组:与单纯毗喳酮杀虫组相比，肉芽肿面积缩小，纤维组织明显减少。正常组小鼠肝组织结构正常，未见肉芽肿，无肝细胞坏死及纤维组织的增生。(附图3)。3.2.3肝组织HE染色少卵结节大小结果(表3一3，图一2)HE染色肉芽肿少卵结节大小结果:正常组为0.00士0.00，模型组为0.82士0.56，模型组比正常组显著增大(P<0.001):单纯毗哇酮杀虫组为0.82士0.47
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2;R532.21
【参考文献】
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2594699
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