酒精性肝病患者肠道菌群变化与肝功能相关性研究

发布时间：2020-04-02 12:11

【摘要】：目的:本课题旨在通过实时荧光定量PCR技术对酒精性肝病患者(alcoholic liver disease,ALD)的肠道菌群中双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌、脆弱拟杆菌及柔嫩梭菌进行定量分析,探讨其与丙氨酸转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)和总胆红素(Total bilirubin,TBil)等肝功能评价指标的关系,以便为ALD的防治提供新的思路。方法:1.选取医院就诊ALD患者样本42人,留取大便标本,使用实时荧光定量PCR技术对大便菌群中双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌、脆弱拟杆菌及柔嫩梭菌进行定量分析,同期选取22名无长期大量饮酒经历的健康男性做为对照组,使用SPSS 21.0软件对肠道菌群数据进行统计学分析。2.排除未留取肝功能血清标本的患者后,最终有31人成功留取血标本,对照组另选20名无长期大量饮酒经历的健康男性入组;采用全自动生化分析仪测定ALD患者血清丙氨酸转氨酶(ALT)活力、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活力和总胆红素(TBil)含量。使用SPSS 21.0软件对肠道菌群的有显著改变的菌株与肝脏功能生化指标作Pearson相关性分析。结果1.1组ALD患者大便菌群中双歧杆菌为5.52±1.73(copies/g)和脆弱拟杆菌为7.01±0.72(copies/g),与对照组双歧杆菌和脆弱拟杆菌相比明显减少,差别具有显著的统计学意义(P0.05);而大肠杆菌、粪肠球菌、乳酸杆菌和柔嫩梭菌含量与对照组比较有改变,但差别无统计学意义(P0.05)。2.与对照组相比,2组ALD患者的ALT活力、AST活力及TBil含量显著增高,分别达到43.47±23.57 U/L、40.07±26.55 U/L和17.47±10.71μmol/L(P0.05)。将2组ALD患者大便菌群的双歧杆菌和ALT、AST及TBil等肝功能生化指标进行相关性分析发现,双歧杆菌与ALT(r=-0.64)、AST(r=-0.45)存在中等负相关性(P0.01),与TBil存在弱负相关性(r=-0.11,P0.05)。结论1.酒精性肝病患者存在肠道菌群失调,双歧杆菌、脆弱拟杆菌较健康人群明显减少。2.ALD患者肝脏的ALT活力、AST活力及TBil含量显著升高,且双歧杆菌与肝功能生化指标ALT及AST存在负相关性。
【图文】：

脆弱拟杆菌,梭菌,实时荧光定量PCR,粪肠球菌

种标准菌株的实时荧光定量PCR扩增片段M：DL2000DNAMarker；1：双歧杆菌；2：乳酸杆菌；3：大肠杆菌；4：粪肠球菌；5：脆弱拟杆菌；6：柔嫩梭菌

扩增曲线,脆弱拟杆菌,粪肠球菌,双歧杆菌

图 1.2 6 种标准菌株的 PCR 扩增曲线A：双歧杆菌；B：乳酸杆菌；C：大肠杆菌；D：粪肠球菌；E：脆弱拟杆菌；F：柔3 标准菌株实时荧光定量 PCR 标准曲线及线性回归方程6 种标准菌株 PCR 扩增产物浓度换算为拷贝数分别为双歧杆菌 3.6×101酸杆菌 3.1×1011/μl，大肠杆菌 2.8×1011/μl，粪肠球菌 9.6×1011/μl，脆弱拟杆菌/μl，柔嫩梭菌 2.2×1010/μl。图 1.3 显示，以经 10 倍系列稀释的各标准品为模
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R575

【参考文献】