IGFBPrP1 siRNA诱导的大鼠肝星状细胞凋亡及其机制

发布时间：2020-04-03 23:36

【摘要】：目的研究IGFBPrP1 siRNA对大鼠肝星状细胞凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分别设立:正常对照组,阴性对照组,IGFBPrP1 siRNA转染组。IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞,转染不同时间后,用CCK-8试剂盒检测肝星状细胞增殖的变化,AnnexinV/PI双标法流式细胞术检测肝星状细胞凋亡的变化,免疫细胞化学染色法检测P53及Bcl-2蛋白表达的变化。结果 (1)IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞不同时间(24、48、72 h)后,转染组细胞增殖受到抑制且凋亡率明显增高,与正常对照组及阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P0.01);(2)IGFBPrP1 siRNA转染大鼠肝星状细胞48 h后,与正常对照组及阴性对照组相比,转染组P53蛋白的表达量显著增高(P0.01);Bcl-2蛋白的表达明显降低(P0.01)。结论 IGFBPrP1 siRNA能显著抑制大鼠肝星状细胞增殖且能促进其凋亡;上调P53的表达,下调Bcl-2的表达可能是IGFBPrP1 siRNA诱导大鼠肝星状细胞凋亡的途径之一;推测抑制IGFBPrP1的表达有可能成为治疗肝纤维化的新靶点。
【图文】：

义(F=1536.190,P<0.01),分组主效应与时间主效应交互作用有统计学意义(F=11.696,P<0.01),说明各时间点三组间OD值有差别(表1,图1)。966　J C liniHepato,l September2011, Vo.l 27, No.9

提示IGFBPrP1 siRNA转染大鼠HSC,24 h出现明显的生长抑制,48 h达到抑制高峰,72 h生长抑制作用减弱,96 h生长抑制作用消除(表2,图2)。说明IGFB-PrP1 siRNA可以抑制HSC增殖。2. 2　AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率　AnnexinV-FITC/PI流式细胞术可区分实验样本中正常、坏死及凋亡细胞。以AnnexinV为横轴,PI为纵轴,作双参数点图,将细胞分为4个区:左上象限为机械坏死细胞(Annexin -V-/PI+);右上象限为晚期凋亡细胞(Annexin- V+/PI+);右下象限为早期凋亡细胞(Annexin-V+/PI-);左下象限为活细胞(Annexin-V-/PI-)。取右上及右下两个象限的细胞凋亡百分数之和作为细胞凋亡率进行比较,两因素方差分析结果显示:分组主效应有统计学意义(F=216·139,P<0.01)说明三组间凋亡率值有差别,两两比较结果显示IGFBPrP1 siRNA转染组凋亡率与正常对照组及阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0·01)

【参考文献】

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【共引文献】

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