DUSP14在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

发布时间：2020-04-06 11:10

【摘要】：背景及目标:肝脏缺血再灌注(Hepatic ischemia-reperfusion,I/R)损伤是临床肝脏移植和手术中常见的组织损伤,发生率极高,会导致严重的移植后或手术后肝脏功能障碍甚至器官衰竭。组织缺血再灌注损伤的病理过程的典型特征是大量细胞死亡和严重的炎症反应。包括NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路在内的多条分子信号通路均参与缺血再灌注过程中的细胞存亡和炎症反应的调节。双特异性磷酸酶 14(Dual specific phosphatase 14,DUSP14)能够调控 NF-κB 通路,影响炎症反应,但其是否参与组织缺血再灌注损伤的调节尚不清楚。本研究旨在探究DUSP14在肝脏缺血再灌注损伤中的作用,阐明其具体机制。方法:通过构建 DUSP14 肝脏特异性敲除(Hepatocyte-specific Duspl4 knockout,HKO)和过表达(Hepatocyte-specificDuspl4 transgenic,HTG)小鼠,建立体外肝脏缺血再灌注模型。分离小鼠的原代肝细胞进行缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)实验,建立体外细胞模型。收集小鼠的血清和肝脏组织样品,检测血清和组织中的炎性因子和组织病理损伤程度。应用RT-PCR、Western blot、Co-IP、pull-down等分子生物学技术探寻DUSP14调控肝脏缺血再灌注损伤的关键靶分子和机制。结果:实验结果证明,DUSP14不仅参与了肝脏缺血再灌注损伤,而且发挥着重要的保护肝细胞的作用。DUSP14能够减少肝细胞在缺血再灌注过程中的死亡,抑制组织炎症反应,促进肝细胞的增殖或再生,减轻肝脏损伤。实验结果还发现,TAK1是介导DUSP14调控肝脏缺血再灌注损伤的关键蛋白。DUSP14与TAK1结合互作,并抑制其磷酸化激活,进而抑制NF-κB和MAPK/Jnk/p-38通路分子的活化,减轻细胞损伤和炎症反应。结论:综上所述,DUSP14是抑制肝脏缺血再灌注损伤,保护肝细胞的重要分子蛋白,通过调控DUSP14-TAKl-Jnk/p-38信号通路可以调节肝脏缺血再灌注的病理过程,为临床中预防和治疗组织缺血再灌注损伤提供有意义的策略和方法。
【图文】：

细胞损伤,程度,肝脏缺血再灌注损伤,髓系细胞

而身体主要脏器和组织中的ＤＵＳＰ１４表达量并无明显变化。病理Ｈ＆Ｅ逡逑染色结果证明，与对照组相比，ＬｙｓＭ－ＤＭｊＷ－ＫＯ小鼠的肝脏损伤面积并无明显逡逑改变（图３邋Ｃ），细胞损伤程度也没有明显差异（图３Ｄ）。血清转氨酶检测结果逡逑也说明ＬｙｓＭ－ＤｗｉｐＭ－ＫＯ小鼠的肝功能受损程度与对照组小鼠相同（图３邋Ｅ）。逡逑这些实验结果说明，髓系细胞中的ＤＵＳＰ１４并不影响肝脏的缺血再灌注损伤。逡逑综上所述，ＤＵＳＰ１４不仅参与了肝脏缺血再灌注损伤过程，而且发挥着重要逡逑的调节作用。肝细胞中的ＤＵＳＰ１４可以保护肝细胞，减轻组织损伤，，改善肝脏功逡逑能；而髓系细胞中的ＤＵＳＰ１４对肝脏缺血再灌注损伤则无明显的调节作用，说明逡逑ＤＵＳＰ１４的这一作用具有组织特异性。逡逑Ａ邋＿＿—邋Ｋ—邋Ｈ邋咖逦一逡逑ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ邋ＷＴ邋ＨＫＯ逦ＷＴ邋Ｄｕｓｐ１４－ＨＫＯ逡逑Ｄｕｓｐ１４逦２２ＫＤａ邋Ｄｕｓｐ１４逦２２ＫＤａ逡逑Ｇａｐｄｈ逦３７ＫＤａ邋Ｇａｐｄｌｉ逦３７ＫＤａ逡逑Ｂ逦ｌ／Ｒ邋（ｈ）逡逑Ｓｈａｍ逦１逦６逦２４逡逑■■■■逡逑ｍｕｕｍ逡逑ｒ逡逑９０，邋＂邋ＷＴ逦５

DUSP14在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

图５邋Ｄ和Ｅ）
【学位授予单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R575

【参考文献】