肝特异性miR-122负向调控IFN-alpha抗乙肝病毒活力

发布时间：2020-04-29 04:59

【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV, Hepatitis B Virus)感染是常见的传染性疾病之一,不仅能引起急、慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化、肝细胞癌的发生发展密切相关,严重威胁人类的健康。目前,治疗乙肝的药物主要有两类：干扰素与核苷类似物。干扰素(IFN)是由干扰素诱生剂诱导生物细胞后所产生的一类高活性多功能的糖蛋白。1976年Greenberg等首先报道用人白细胞干扰素治疗4例慢性活动性乙肝,治疗后有2(?)HBeAg消失。此后,干扰素一直被视为治疗乙肝的首选药物,且在欧洲取得了较满意的治疗效果。在亚洲,仅有20-30%的乙肝患者对干扰素治疗敏感。前人报导干扰素可以调节肝细胞中microRNA-122的表达,且microRNA-122与HBV息息相关。本文通过Real-time PCR,Nanodrop等方法旨在于研究microRNA-122介导干扰素抗HBV复制的可能机制。 首先,通过用IFN-α体外处理Huh7细胞,qRT-PCR检测Huh7细胞中microRNA-122表达量的变化,发现1000IU/ml IFN-α可以显著下调细胞中microRNA-122的表达。其次,本文成功构建pSuper-miR-122真核表达载体。用pSuper-miR-122或miR-122-mimic与pHBV1.3转染HepG2细胞,发现miR-122在体外可以抑制HBV的复制。同时,用miR-122-inhibitor与HBV1.3转染Huh7细胞,结果表明miR-122-inhibitor在Huh7细胞中具有促进HBV复制的作用。两项结果分别从正反面表明：miR-122在体外可抑制HBV的复制。再次,为了探求为什么miR-122能抑制HBV, HBV1.3-luci报告基因与miR-122共转染Huh7细胞,发现miR-122可能作用于HBV-C的5'非编码区。最后,本研究对干扰素、HBV与miR-122进行了综合实验分析,得出miR-122负向调节IFN抗HBV复制的结论。这个结果对于治疗乙肝提供了一条新的方案,主要体现在两个方面：一、也许可以通过某种方法抵消miR-122在IFN抗HBV复制过程中所起到的负调控作用而增强IFN治疗乙肝的能力；二、可以从miR-122自身出发设计RNA药物,直接进行乙肝治疗。
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R512.62

【参考文献】

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本文编号：2644248