Caspase-3和TNF-α在大鼠酒精性肝病中的表达及意义

发布时间：2020-05-05 16:57

【摘要】： 目的:本研究通过酒精灌胃方法建立的酒精性肝病大鼠模型,探讨肝细胞凋亡及Caspase-3和TNF-α在酒精性肝病中的表达及意义,为酒精性肝病发病机制的研究提供实验与理论依据。 方法: 1.酒精性肝病动物模型的建立与分组:Wistar系雄性大鼠随机分为两组,模型组和对照组,每组各70只。模型组给予40%酒精8g/kg/d,分二次灌胃,共12周;对照组给予等量的生理盐水灌胃。实验第8、12周末处死动物,左心室采血,离心保存,待测血清指标。取肝组织一部分,经10%中性福尔马林固定,待做病理学与免疫组织化学检测。 2.应用光镜(HE染色)观察肝组织病理变化,用TUNEL法检测肝细胞凋亡,用全自动生化仪分别检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量,用免疫组化染色方法(采用SABC法)分别观察肝组织内的半胱天冬酶—3(Caspase-3)和肿瘤坏死因子—α(TNF-α)的表达水平。 结果 1.模型组与对照组比较血清ALT(116.12±14.30 vs 43.56±7.89)IU/L值和AST(248.83±20.25 vs 84.67±12.67)IU/L值明显升高,ALT/AST比值大于2,有统计学意义(P＜0.05)。 2.HE染色组织切片光镜下模型组与对照组比较,肝细胞明显肿胀,可见大小不等的脂肪空泡,部分处可见“嗜酸性小体”和点状、灶壮坏死,周围有炎性细胞浸润,肝组织内胶原纤维轻度增生。 3.凋亡的肝细胞主要分布在肝组织中点状、灶状和碎屑样坏死区及其周围,模型组(6.2±1.7%)肝细胞凋亡指数明显高于对照组(1.7±0.8%),且随造模时间延长模型组细胞凋亡指数明显增加,有显著性差异(P＜0.05)。 4.Caspase-3和TNFα-阳性细胞主要分布在中央静脉及肝细胞坏死灶周围,模型组Caspase-3和TNF-α表达强度明显高于对照组(P＜0.05)。 5.肝组织Caspase-3的表达与TNF-α的表达呈正相关(r=0.648,P＜0.01)。 结论 大鼠酒精性肝病发生与肝细胞凋亡密切相关。大鼠酒精性肝病的发生、发展过程中Caspase-3和TNF-α参与肝细胞凋亡,且TNFα-通过其受体介导Caspase-3活化参与酒精性肝病的肝细胞凋亡的发生。
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R575

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本文编号：2650469