迷迭香酸通过调节巨噬细胞极化改善小鼠肝纤维化

发布时间：2020-05-07 12:07

【摘要】：目的:肝纤维化是肝内纤维结缔组织异常增生,是多种慢性肝病发展的共同结局,最终发展为肝硬化甚至肝细胞癌。但肝纤维化至今尚无有效的治疗手段。迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)是一种天然多功能酚酸类化合物,多项研究表明其具有抗氧化、抗炎及抗纤维化等广泛的生物学效应。其次法国科学家最近证实肝脏中巨噬细胞极化表型的变化与肝纤维化的关系密切。故本研究探讨RA对肝脏纤维化的作用疗效,以及其与巨噬细胞相关的作用机制。分析RA在改善肝脏纤维化的作用中,对巨噬细胞极化的影响。实验方法:1.体内实验:将40只成年雄性KM小鼠随机分为4组,即空白对照组(Oil+NS,ip,n=10),RA对照组(Oil+RA,ip,n=10),CCl_4模型组(CCl_4+NS,ip,n=10),RA治疗组(CCl_4+RA,ip,n=10)。测定四组小鼠中每一只的血清ALT,AST水平。并用Real-time PCR的方法测定肝脏组织中肝纤维化标志物以及不同极化表型的巨噬细胞标志物m RNA水平。2.体外实验:体外培养J774A.1巨噬细胞系,随机分组,即空白对照组,RA对照组,LPS/IL-4模型组和RA实验组。LPS和IL-4分别诱导巨噬细胞系极化为M1和M2型巨噬细胞,RA体外干预后,Real-time PCR的方法测定各组别不同极化表型的巨噬细胞表面标志物m RNA水平。实验结果:1.体内实验:1.1与CCl_4模型组比较,RA改善了CCl_4诱导的肝纤维化小鼠的血清学ALT,AST水平(P≤0.05)。1.2 CCl_4造模后,肝脏组织中的纤维化指标α-SMA,Colα1(I)和Colα1(Ⅲ)的mRNA水平显著升高(P≤0.01)。与CCl_4模型组比较,RA治疗后上述肝纤维化指标的mRNA水平下降(P≤0.05)。1.3 CCl_4造模后,肝脏组织中的M1型巨噬细胞的标志物(TNF-α,IL-1β,NOS2)和M2型的标志物(Arg-1,Mrc2)mRNA水平明显升高(P≤0.01)。与CCl_4模型组比较,RA干预后M1和M2型的标志物不同程度均有所下降(P≤0.05)。2.体外实验与体外LPS/IL-4模型组比较,RA显著减少了M1型巨噬细胞标志物(TNF-α,IL-1β,NOS2)的mRNA水平(P≤0.05),但IL-12与模型组比较差异无统计学意义。RA对M2型巨噬细胞标志物除Arg-1的m RNA水平改变具有统计学意义外(P≤0.05),对其余无明显影响。实验结论:RA可能通过调节巨噬细胞的极化方向改善CCl_4诱导的小鼠肝纤维化,进一步的研究将有利于肝纤维化的治疗。
【图文】：

图 1 小鼠体内肝纤维化标志物水平的变化Control：空白对照组；RA：RA 对照组；CCl4：CCl4模型组；CCl4+RA：RA 治疗组**p≤0.01 vs 空白组 ，#p≤0.05 vs 模型组。3.3 体内实验巨噬细胞标志物的变化CCl4造模后，模型组小鼠的 M1 型巨噬细胞标志物（TNF-α, IL-1β, N型的标志物（Arg-1, Mrc2）mRNA 较空白对照组明显升高，差异具有（**p≤0.01vs 空白组，图 2，图 3），表明 CCl4导致的肝纤维化模型中，M1 型和 M2 型巨噬细胞的含量均增多。RA 治疗后发现上述两个极化表型标志物 mRNA 水平较模型组下降，且差异具有统计学意义（#p≤0.05vs 模图 3）。

图 2 小鼠体内 M1 型巨噬细胞标志物的变化Control：空白对照组；RA：RA 对照组；CCl4：CCl4模型组；CCl4+RA：RA 治疗组。**p≤0.01 vs 空白组 ，，#p≤0.05 vs 模型组。
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R575.2

【参考文献】

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本文编号：2652948