NF-κB信号通路在幽门螺杆菌致病机制中的作用的研究

发布时间：2020-05-18 08:41

【摘要】： 目的:通过体外实验研究NF-κB信号通路在幽门螺杆菌引起慢性胃炎的机制中所起的作用,以及评价特异性调节NF-κB活性对于减轻幽门螺杆菌引起的慢性炎症反应的作用,为将来的动物及临床实验做好准备,为阻断慢性炎症向胃癌发展这一进程提供依据,从而为最终解决由幽门螺杆菌所引起的慢性胃炎等疾病提供有效的方案。 方法:分别培养幽门螺杆菌11637标准菌株以及人胃粘膜上皮细胞(GES-1),将GES-1细胞分为3组:空白组、GES-1+Hp组及GES-1+Hp+NF-κB抑制剂组,每组各做10例,在后两组中按细胞与细菌为1:50的量加入Hp11637菌株,共培养24小时后,提取上清液用ELISA法检测IL-8、TNF-α的含量,裂解细胞,用Western Blot法检测NF-κB的表达含量。以空白组为对照分别比较Hp及NF-κB抑制剂对于NF-κB信号通路的影响作用。 结果:1、成功培养Hp11637标准菌株及GES-1细胞。2、在GES-1细胞中加入Hp菌株后共培养24小时后提取上清液再次进行Hp培养,Hp培养成功。3、在GES-1细胞中按比例加入定量的Hp菌株,共培养24小时后检测上清液中的IL-8、TNF-α含量,较空白组明显升高(p0.05),裂解细胞后检测裂解液中的NF-κB表达量较空白组升高(p0.05)。4、在GES-1细胞中加入定量的Hp菌株以及特异性NF-κB信号通路抑制剂,共培养24小时后检测上清液中的IL-8、TNF-α含量,与仅加入Hp的干预组相比,表达量有所降低(p0.05),裂解细胞后检测裂解液中的NF-κB表达量较干预组降低(p0.05),但较空白组升高(p0.05)。 结论:NF-κB信号通路在幽门螺杆菌引起慢性胃炎的发病机制中起到核心作用,采用特异性阻断NF-κB信号通路的方法可以有效减少幽门螺杆菌诱导的炎性因子的分泌。
【图文】：

27图 10本实验首先进行了细菌及细胞的分别培养，，扩增了 Hp 标准菌株（11637 菌株，CagA+），以及人胃粘膜上皮细胞株 GES-1 细胞，为试验模型的建立奠定了初步的基础。其次，利用培养的 Hp11637 菌株感染 GES-1 细胞，在细胞的生长环境中培养了24 小时[28]，观察细胞的形态变化，可见细胞受损严重，出现变圆、肿胀，甚至出现碎裂、崩解的现象。提取此时的细胞培养液，接种于特制的 Hp 培养基上，2 天后可见Hp 菌落生长，挂下细菌进行 Hp 的鉴定，革兰染色后可于油镜下（10×100 倍）见到革兰氏阴性的短杆菌，快速尿素酶试验为强阳性。说明 Hp 可定植于胃粘膜细胞上，可
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R573.3;R735.2

【引证文献】

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1 苗益辉;煤矿工人幽门螺杆菌感染胃癌细胞系NF-κB表达水平的研究[D];河北联合大学;2011年

本文编号：2669462