气体信号分子硫化氢在门静脉高压中的作用研究

发布时间：2020-05-18 08:47

【摘要】： 目的:本课题旨在观察门静脉高压大鼠内源性硫化氢体系的变化,并进一步探讨硫化氢供体——硫氢化钠对实验性门静脉高压以及内源性一氧化氮/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)体系、一氧化碳/血红素氧合酶(heme oxygenase, HO)体系的影响。 方法:⑴将20只健康成年SD大鼠随机分为3组:正常组(5只),假手术组(5只)和部分门静脉结扎(partly portal vein ligation, PPVL)组(10只)。PPVL组行部分门静脉结扎术建立门静脉高压的动物模型。模型制作14天后,分别测定大鼠的门静脉压力(PVP)和平均动脉压力(MAP),采用免疫组织化学方法检测肝细胞和门静脉血管平滑肌细胞中胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的蛋白表达,RT-PCR方法检测肝组织CSEmRNA水平的表达情况。⑵将30只健康成年SD大鼠随机分为4组:正常组(5只)、假手术组(5只)、PPVL组(10只)、PPVL+ NaHS组(10只)。PPVL组和PPVL+ NaHS组行部分门静脉结扎术建立门静脉高压的动物模型。模型制作14天后,分别测定各组大鼠的PVP和MAP;采用免疫组织化学方法检测大鼠肝细胞中一氧化氮合酶(NOS2、NOS3)、血红素氧合酶(HO-1、HO-2)的蛋白水平表达情况,RT-PCR方法检测大鼠肝组织中NOSmRNA、HOmRNA水平的表达情况。 结果:⑴与正常组和假手术组大鼠比较,PPVL大鼠的PVP明显升高(p0.01),MAP下降(p0.05);PPVL大鼠肝细胞和门静脉血管平滑肌细胞中CSE蛋白表达显著增加(p0.05);PPVL大鼠肝组织中CSEmRNA表达亦显著增加(p0.01)。假手术组和正常组之间比较无显著差异。⑵术后14天,假手术组和正常组比较,各项检测指标无显著差异,两组中NOS2蛋白及mRNA水平未见明显表达;NOS3蛋白及mRNA表达水平无显著差异。PPVL组与假手术组比较,PVP明显升高(p0.05),MAP则下降(p0.05),PPVL+ NaHS组与PPVL组相比较,PVP进一步升高(p0.05),MAP则进一步降低(p0.05)。PPVL组和PPVL+ NaHS组NOS2在蛋白及mRNA水平均有表达,且后者NOS2蛋白及mRNA表达水平降低(p0.05)。4组之间NOS3的蛋白及mRNA表达水平则无显著差异。PPVL与假手术组比较,PVP明显升高(p0.05),MAP则下降(p 0.05),HO-1的蛋白表达增加(p 0.05),其mRNA表达水平亦增加(p 0.01),HO-2的蛋白及mRNA表达水平则无显著差异;PPVL+ NaHS组与PPVL组比较亦有相似结果。 结论:⑴内源性硫化氢体系对门静脉高压的形成和维持起重要作用。⑵NaHS对门静脉高压的形成起促进作用,其作用机制可能与调节内源性NO/ NOS2体系、CO/HO-1体系的变化有关,而与NO/NOS3体系、CO/HO-2体系的变化无关。
【图文】：

CSE在正常大鼠肝脏中的表达×400

CSE在假手术组大鼠肝脏中的表达×400
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R575.2

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本文编号：2669470