多聚嘧啶序列结合蛋白（PTB）与HBV转录后调节元件（HPRE）结合抑制HBV表面抗原的基因表达

发布时间：2020-05-29 16:15

【摘要】： 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)转录后调节元件(HBV posttranscriptional regulatory element, HPRE)是位于HBV基因组内的一段调控序列。因其在转录后水平调节HBV的基因表达而命名。它对HBV基因的高表达是非常重要的。自从1993年被Huang J等发现后,它的功能机制及与其相互作用的蛋白因子一直是人们的研究热点。虽然HPRE的作用机制至今还不是完全清楚,但比较一致的认为是HPRE依赖与细胞蛋白的结合来发挥它的作用,因此验证HPRE结合蛋白就可以帮助明确HPRE在HBV生活周期中发挥的作用。多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein,PTB)就是已经鉴定出的能和HPRE结合的一种核蛋白。 目的:表达纯化大量PTB-His融合蛋白,体外验证PTB与HPRE RNA之间的结合作用;利用CAT检测系统pDM138-HPRE验证PTB对HPRE功能的影响;用HepG2.2.15细胞系、HBs-HPRE瞬时转染Hela细胞探讨PTB对HBV基因表达的作用机制。 方法:1.用XhoI酶切线性化pGEM-11zf-HPRE质粒DNA,利用T7RNA聚合酶,以体外转录地 ?ê铣，

本文编号：2687178