PC及BCP区变异对拉米夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎影响的探讨研究

发布时间：2020-05-29 16:40

【摘要】：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是目前世界上流行最为广泛的病毒之一。全球大概有3.5亿人为慢性HBV感染者。据世界卫生组织调查显示,每年约有100万～200万人死于HBV感染。我国作为乙型肝炎的高流行区,占全球HBV表面抗原(HBsAg)总携带率的50%。60%的人受过HBV的感染,8%～10%的人(可能超过1.2亿)为HBV慢性携带者,其中有近20%～25%的病人发展为慢性肝病。因此,HBV感染已成为全球亟待解决的公共卫生问题之一。 HBV是一种DNA病毒,属嗜肝DNA病毒科,由外膜和核心两部分组成,其基因组是一个约3.2kb的部分双链环形DNA,其负链核苷酸序列有4个开放性读框架(open reading frame,ORF):S、P、C、X基因区。前C基因(precore,PC)位于HBV基因组nt1814-1900之间,编码e抗原(HBeAg)。C基因启动子(core promoter,CP)位于nt1643-1849之间,指导3.4kb前基因组mRNA和3.5kb前C mRNA的转录,由基本启动子(nt1742-1849 )和上游调控序列(nt1643-1742)两部分构成。 HBV复制需由前基因组RNA中间体反转录为负链DNA,在此过程中需要病毒本身的DNA聚合酶,而此酶缺乏校正活性,可导致复制过程中反转录失真,从而使HBV出现很高的变异率。目前关于PC及BCP区变异报道和研究最多的主要有2组:PC区G1896A的终止密码子变异、BCP区A1762T和G1764A的双位点变异。PC区G1896A变异使TGG(色氨酸)变为TAG(终止密码),导致HBeAg不能合成,在血清学上表现HBeAg阴性。BCP区A1762T和G1764A的双位点变异可导致HBeAg合成减少,但不能使其完全消失。另外,上述变异与病毒的复制以及HBV相关性肝炎的发展密切相关。 HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)是当今临床上常见的一种CHB临床亚群。近期来自世界不同地区人群的研究结果显示,在慢性HBV感染者中,HBeAg阴性CHB的流行率为70%～100%,并且呈逐年上升的趋势。目前我国HBeAg阴性CHB占40%左右,但未来呈逐渐增加的趋势,其理由是:①随着预防接种的广泛应用,使HBeAg阳性CHB日益减少;②现有的HBeAg阳性CHB病例逐渐在天然及药物的作用下转化为HBeAg阴性病例;③已知HBeAg阴性CHB比HBeAg阳性CHB更难治愈,长期使用核苷类类似物可致耐药机率增多,故阴性病例将日益增多。HBeAg阴性CHB的产生主要与HBV基因前C区或核心启动子突变有关,其检出率为50%～70%。与HBeAg阳性CHB相比,HBeAg阴性CHB病情自发或持续缓解极少发生、中度/重度HBV相关肝病(慢性肝炎、肝硬化及HCC)比例较大、预后较差。HBeAg阴性CHB抗病毒治疗的持久应答率低,治疗时间更长,治疗终点亦难确定。拉米夫定(lamivudine,LAM)作为一种最早、应用最广泛的核苷类似物类抗病毒药物,已大量应用于HBeAg阴性CHB的抗病毒治疗当中。一般认为,在其治疗过程中,治疗前血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和HBV DNA水平、年龄、性别及HBV基因型与其疗效有关。而关于PC及BCP区变异研究极少涉及。因此,本研究连续收集2006年1月至2009年12月间在西南医院感染科门诊及住院接受LAM治疗HBeAg阴性CHB患者的临床资料和血清标本,系统的分析了在LAM治疗HBeAg阴性CHB过程中影响其疗效的各种因素;并且,采用聚合酶链反应(PCR)扩增后直接测序的方法检测了部分患者血清中PC及BCP区变异情况,并分析该变异对治疗效果的影响。主要研究成果 1.203例接受LAM治疗的HBeAg阴性CHB患者中,180例患者获得病毒学应答(VR),应答率为88.7%,应答患者较之无应答患者基线HBV DNA水平较低。在长期治疗过程中,81例(45%)患者发生病毒学突破(VB),发生病毒学突破患者较之获得持续应答的患者基线HBV DNA水平较高;COX比例风险回归模型分析认为,治疗前HBV DNA水平以及治疗6个月时HBV DNA状态是发生病毒学突破的危险因素。 2.采用PCR扩增后直接测序的方法对治疗前血清中HBV的PC及BCP区变异情况进行检测。共有101例患者治疗前血清留取并被检测,其中PC区G1896A位点变异41例(40.6%),BCP区A1762T/G1764A双位点变异44例(43.6%),两者并存12例(11.9%);COX比例风险回归模型分析认为,治疗前PC区1896位点变异、BCP区1762/1764双位点变异与应答密切相关;PC区G1896A位点变异组与野生组相比,初始应答率分别为83%和85%(P0.05),第1年病毒学突破率分别为17%和10%(P0.05),第2年病毒学突破率分别为35%和26%(P0.05);BCP区A1762T/G1764A双位点变异组与野生组相比,初始应答率分别为80%和83%(P0.05),第1年病毒学突破率分别为13%和12%(P0.05),第2年病毒学突破率分别为32%和28%(P0.05)。结论 1.LAM治疗HBeAg阴性CHB过程中,治疗前较低的HBV DNA水平能够获得较好的应答,治疗6个月时HBV DNA阳性状态是病毒学突破的高危因素。 2.PC及BCP区变异不会使HBV对LAM的敏感性产生变化,但随着治疗时间延长,PC区1896位点变异组比野生组更容易发生耐药;而BCP区1762/1764双位点变异组与野生组之间无明显差异。
【图文】：

曲线,病毒学,患者,无病毒

图 1 患者病毒学应答曲线表 2 病毒学应答患者与无病毒学患者治疗前各因素比较量病毒学应答患者(n=180)无病毒学应答患者(n=23)P 均年龄 40±12 37±11 ＞0别（例）＞0男 149 17
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R512.62

【参考文献】