内毒素对枯否细胞功能的影响及甘氨酸拮抗作用的研究

发布时间：2020-05-29 19:07

【摘要】：大量资料表明，在四氯化碳、半乳糖胺、硫代乙酰胺、乙醇等各种实验性肝损伤、病毒性肝炎与肝炎后肝硬化、肝癌患者中大多伴有肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia，IETM)，尽管各学者报道的发生率不同，但肝病患者中存在IETM已是不争的事实，因此IETM与肝病的关系日益受到重视。二十余年来，我所在韩德五教授的领导下，一直致力于IETM在肝病发生发展中作用的研究，经大量动物实验与临床观察证实，IETM可以通过活化枯否细胞(Kupffer cell，KC)使肝炎重症化、慢性化(急性肝炎→慢性肝炎→肝硬化→肝癌)，从而提出了IETM假说。根据该假说的观点，抑制和封闭活化的枯否细胞可能是预防和治疗各种肝病的关键之一。但内毒素对体外培养的枯否细胞功能影响的研究至今报道甚少，为了证实此假说仍需在体外进行较深入的观察和研究；由于酒精性肝病几乎均伴有IETM，因而对于枯否细胞的作用尚需鉴别是乙醇本身，还是内毒素所致，或者是二者兼有之；同时由于调整或抑制枯否细胞药物尚属罕见，在我所甘氨酸研究基础上，进一步观察甘氨酸是否具有抑制枯否细胞的作用，研究甘氨酸拮抗IETM的全面机制也是本论文的研究目的之一。实验共分四部分：第一部分内毒素对枯否细胞功能影响的观察第二部分乙醇对枯否细胞功能影响的观察第三部分甘氨酸对内毒素所致枯否细胞功能变化拮抗作用的观察第四部分甘氨酸拮抗IETM机制的研究山西医科大学博士学位论文2003 第一部分内毒素对枯否细胞功能影响的观察实验一内毒素在体外对枯否细胞吞噬功能的影响结果提示:内毒素可以增强体外培养枯否细胞的吞噬能力，但随作用时间延长和内毒素剂量的增加，培养的枯否细胞吞噬能力反而下降。实验二内毒素对枯否细胞微丝和微管的影响结果表明:小剂量内毒素可使枯否细胞微管量显著增加，荧光增强，但随着剂量的增加此作用反而减弱。内毒素可使枯否细胞微丝表达增强，肌动蛋白含量显著增加，但剂量过大表达反而减弱。实验三内毒素对枯否细胞凋亡的影响结果表明:大剂量内毒素可导致养枯否细胞凋亡，这也可能是吞噬功能降低的原因之一。实验四内毒素对枯否细胞分泌功能的影响结果表明:内毒素组培养上清中TNF一Q的产生明显增多，提示内毒素对枯否细胞的分泌功能有激活作用。综合_L述实验结果可概括为:内毒素可激活枯否细胞功能，但剂量过大作用时间过长则可抑制其功能，甚至导致凋亡。第二部分乙醇对枯否细胞功能影响的观察实验一乙醇对培养枯否细胞吞噬功能的影响结果表明:乙醇可以抑制体外培养枯否细胞的吞噬能力，并随作用时间延长和剂量加大而增强其抑制作用。实验二乙醇对培养枯否细胞微丝和微管的影响结果表明:乙醇对使枯否细胞微丝呈网状排列。小剂量乙醇可使微管表达增强，细胞灰度显著增加，大剂量反而使微管荧光强度和细胞灰度显著减弱。山冠穿医科大学博弋七学位任仑文2003 实验三乙醇对培养枯否细胞膜流动性的影响结果表明:较大剂量乙醇可使枯否细胞的膜流动性降低。实验四乙醇对枯否细胞TNF一。分泌的影响结果表明:小剂量乙醇可以增强体外枯否细胞分泌TNF一a的能力，，并随剂量加大和时间延长而下降。此部分实验结果表明:乙醇对枯否细胞吞噬功能的影响与其微丝、微管有关;乙醇对枯否细胞功能分泌功能的影响与其剂量和作用时间有关。第三部分甘氨酸对内毒素所致枯否细胞功能变化拮抗作用的观察实验一甘氨酸对体外培养枯否细胞功能的影响结果表明:①甘氨酸体外可抑制枯否细胞吞噬能力，但剂量依赖性不明显。②甘氨酸对枯否细胞肌动蛋白含量无明显影响，但大剂量可使微丝排列紊乱。③甘氨酸可使大鼠枯否细胞微管荧光强度显著减弱，细胞灰度显著降低。实验二甘氨酸对体外内毒素所致枯否细胞吞噬功能变化的拮抗作用结果提示:甘氨酸可以抑制内毒素增强培养枯否细胞吞噬能力的作用，但剂量依赖性不明显。实验三甘氨酸对体外内毒素所致枯否细胞分泌功能的作用结果表明:甘氨酸体外作用3h和24h，均可降低内毒素活化枯否细胞分泌TNF一a的能力，培养上清中TNF一。含量显著下降，并且有一定的剂量依赖性。实验四甘氨酸对体外内毒素所致枯否细胞微丝和微管变化的作用结果表明:甘氨酸可减弱内毒素使大鼠枯否细胞微管荧光增强的作用，细胞灰度显著降低。甘氨酸可拮抗内毒素增强枯否细胞微管表达的作用。山西医科大学傅士学位自仑文2003 实验五一甘氨酸对体外内毒素所致体外培养枯否细胞凋亡的作用结果表明:较小剂量甘氨酸可以完全抑制内毒素所致体外培养枯否细胞的凋亡。此部分实验结果表明:甘氨酸自身对枯否细胞有抑制作用，并具有拮抗内毒
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R575

【引证文献】