ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达变化

发布时间：2020-06-02 09:05

【摘要】：背景: 门静脉高压症(Portal hypertension,PHT)是常见的临床综合征,其病理特点是门静脉系统压力升高,导致门静脉血流不进入肝脏而通过形成的侧支循环,直接进入体循环,多方面机制可导致其发生[1]。正常门静脉压力值为1-5mmHg,门脉高压症时压力值大都升至10mmHg以上[2]。门静脉是由脾静脉、肠系膜上、下静脉汇合成,其中约20%的血液来自脾静脉。所以,门脉高压症时脾静脉的形态学与血流动力学的改变是近年来研究的一个热点。研究发现,门脉高压症时脾静脉壁出现动脉化构形改变,主要表现为内膜出现弥漫性或局灶性增厚斑,呈丘状突向腔内,内含大量平滑肌细胞或胶原纤维,无泡沫细胞;中膜明显增厚肌纤维增粗、致密;外膜层炎性细胞浸润,称为“动脉粥样硬化样增生性病变(Para-atherosclerosis,PAS)”[3]。但是其形成机制尚未完全研究清楚。Rho激酶又称Rho相关卷曲蛋白激酶(Rho associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK),是小G蛋白RhoA的下游靶效应分子。相关研究表明RhoA/ROCK信号通路不仅调节平滑肌细胞肌动蛋白的聚合作用,而且还影响平滑肌的收缩、迁移和增殖等功能[4]。肌球蛋白轻链磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)的肌球蛋白结合亚基(myosine phosphatae targeting subunit 1,MYPT-1)是活化的ROCK的底物[5]。研究已证实,在哮喘、动脉粥样硬化病灶和高血压血管病灶等组织中ROCK均过度表达[6-8]。目的: 研究Rho激酶(ROCK-I)及其底物肌球蛋白磷酸酶肌球蛋白结合亚基(myosine phosphatae targeting subunit 1,MYPT-1)在门脉高压症病变的脾静脉壁中的表达情况,初步分析Rho/ROCK信号转导通路在门脉高压症时脾静脉病变中的作用。进一步为门脉高压症的临床诊断、治疗等各方面提供新的理论依据。方法: 1、采用免疫组织化学方法,检测ROCK-I及MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达情况,定性分析ROCK-I及MYPT-1的表达与脾静脉壁的病变的关系。 2、采用蛋白免疫印迹方法,检测ROCK-I及MYPT-1在门脉高压症脾静脉壁中的表达量,半定量分析ROCK-I及MYPT-1的表达与脾静脉壁的病变的相关性。 3、分析ROCK-I及MYPT-1两者的表达是否具有相关性。结果: 1、免疫组化结果显示:ROCK-I和MYPT-1在门脉高压症病变的脾静脉壁中表达明显上调(P0.01),较对照组差异有统计学意义。 2、蛋白免疫印迹结果显示:ROCK-I和MYPT-1的蛋白表达水平在实验组中明显升高(P0.01),较对照组差异有统计学意义。 3、ROCK-I和MYPT-1两种蛋白的表达,二者呈显著正相关(r=0.858, P0.01)。结论: 门脉高压症患者脾静脉壁中明显存在ROCK表达上调,而且MYPT-1的表达上调说明ROCK功能活化增强,提示Rho/ROCK信号转导通路在门脉高压症脾静脉的动脉化构形改建中发挥重要作用。
【图文】：

HE染色,蛋白免疫,棕黄色,胞浆

A：对照组脾静脉壁 B：实验组脾静脉壁图 1 脾静脉壁组织 HE 染色（×200）3.2 ROCK-Ⅰ和 MYPT-1 蛋白免疫组化染色的表达ROCK-I 和 MYPT-1 阳性细胞为胞浆着色，呈黄色或棕黄色颗粒，无棕

免疫组化检测,蛋白表达,实验组,对照组

-32-A：对照组脾静脉壁 ROCK-I 蛋白表达 B：实验组脾静脉壁 ROCK-I 蛋白表达C：对照组脾静脉壁 MYPT-1 蛋白表达 D：实验组脾静脉壁 MYPT-1 蛋白表达图 2 免疫组化检测脾静脉壁 ROCK-I 和 MYPT-1 蛋白的表达（×200）
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2

【参考文献】