白芍总苷对高脂饮食联合果糖水诱致NAFLD大鼠肝脏损伤的保护作用及其机理研究

发布时间：2020-06-04 09:48

【摘要】：目的：探讨白芍总苷对高脂饮食联合果糖水诱致NAFLD大鼠肝脏损伤的保护作用及其机理研究。方法：采用高脂饮食与10%果糖水联合诱致非酒精性脂肪性肝病大鼠模型。SD大鼠，雌雄各半，按体重随机分为正常组和模型组。正常组给予基础饲料加饮清洁自来水，模型组给予高脂饲料结合饮10%果糖水，连续6w后，正常组和模型组各随机抽取2只大鼠，取肝脏做病理切片，光镜下观察：正常组肝细胞结构正常，肝索排列整齐，肝窦清楚，无明显的病理变化；模型组肝细胞明显肿胀呈圆形，大量肝细胞出现颗粒、空泡变性，胞浆内充满大小不等的脂滴，肝索排列絮乱，肝窦不清，显示复制非酒精性脂肪性肝病模型成功。模型组根据体重随机分为：模型对照组、二甲双胍组（200mg.kg~(-1)）、白芍总苷低剂量组（100mg．kg~(-1)）和高剂量组（200mg．kg~(-1)）。连续灌胃给药4w，正常组和模型对照组大鼠均灌胃给予蒸馏水（10mlkg~(-1)），药物组给予相应剂量的药物。给药期间观察大鼠的一般情况和测定体重。末次给药后24h处理动物，取肝脏组织进行HE染色，切片观察其病理学变化；取血检测FBG、INS、TC、TG、HDL-C、LDL-C、肝功能、COL Ⅲ、COL Ⅳ、MDA、apelin-36、vifatin等含量变化以及SOD、GSH-PX等活性；计算肝脏指数，测定肝脏组织SOD活性、MDA含量、肝脂含量变化；Western-Blot检测肝脏组织p-ERK1/2、TLR4、TLR9蛋白表达情况。结果：（1）模型对照组大鼠肝细胞明显肿胀呈圆形，大量肝细胞出现颗粒、空泡变性，胞浆内充满大小不等的脂滴，肝索排列絮乱，肝窦不清；白芍总苷和二甲双胍处理后，，肝细胞损伤程度减轻。（2）与正常组大鼠比较，模型对照组大鼠肝脂含量明显增加、肝功能紊乱（P0.01）；FBG、INS、TC、TG、LDL-C水平显著升高，HDL-C含量明显降低（P0.01）；COL Ⅲ、COL Ⅳ、apelin-36、vifatin含量升高（P0.01）；SOD、GSH-PX活性明显降低，MDA含量明显升高（P0.01）；肝脏组织p-ERK1/2、TLR4、TLR9蛋白表达增加（P0.01）；（3）与模型对照组大鼠比较，白芍总苷高、低剂量组和二甲双胍组大鼠肝脂、肝功能含量均有不同程度的降低（P0.01, P0.05）；（4）与模型对照组大鼠比较，白芍总苷高、低剂量组和二甲双胍组大鼠FBG、INS、TC、TG、LDL-C水平明显降低，HDL-C含量增加（P0.01, P0.05）；（5）与模型对照组大鼠比较，白芍总苷高、低剂量组和二甲双胍组大鼠SOD、GSH-PX活性升高，MDA含量降低（P0.01, P0.05）；（6）与模型对照组大鼠比较，白芍总苷高、低剂量组和二甲双胍组大鼠COLⅢ、COL Ⅳ、apelin-36、vifatin含量显著降低（P0.01, P0.05）；（7）与模型对照组大鼠比较，白芍总苷高、低剂量组和二甲双胍组大鼠肝脏组织p-ERK1/2、TLR4、TLR9蛋白表达减少（P0.01）；结论：（1）白芍总苷对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏损伤具有保护作用；（2）白芍总苷可能通过干预ERK-TLRs信号通路，使apelin和visfatin水平降低，从而改善胰岛素抵抗，提高抗氧化能力以及减轻炎症起到抗非酒精性脂肪性肝病肝脏损伤作用。
【图文】：

发病机制

肝脏组织炎症反应等[17]。其中 IR 贯穿于“二次打击”的始终。图 1：NAFLD 的发病机制图1.2.1 胰岛素抵抗与非酒精性脂肪性肝病的关系胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）表现为机体组织或靶细胞对胰岛素的作用缺乏正常反应，即其敏感性或反应性降低的一种病理生理状态。胰岛素主要效应器官是肝脏、骨骼肌和脂肪组织，由于外周组织和脂肪肌肉组织对胰岛素的敏感性降低，出现代偿性高胰岛素血症伴多元代谢紊乱的应激反应，IR促进外周脂解和肝脏摄取FAA增加。目前认为IR是NAFLD发病的始动环节，并且在NAFLD的发生与发展中发挥重要作用，其中高胰岛素血症和FFA增多是关键因素[18][19]。早期研究发现[20]，动物腹腔注射胰岛素后，肝包膜下发生局灶性脂肪堆积。胰岛素通过上调葡萄糖转运蛋白（glucose transporters，GLUT）的含量来促进细胞对葡萄糖的吸收，过多的葡萄糖以糖原的形式储存在肝脏。胰岛素的另一个作用

果糖,机制

方的乳剂灌胃造模方法，Lieber等以高脂液体饲料（脂肪71%，碳水化合物11%，蛋白质 18%）喂养 SD 大鼠 3w，即可形成全小叶肝细胞脂肪变，伴有 TNF-α 和I 型胶原 mRNA 表达增强，并诱发线粒体损伤和氧化应激。1.4.1.2 高糖饮食脂肪肝模型该模型形成机制与大部分人群，尤其是女性不良饮食习惯导致的脂肪肝相似，其中在西方国家广泛存在。该模型主要是通过饮食不当引起，其中果糖玉米糖浆(High-fructose corn syrup, HFCS)是许多食物如谷物早餐、焙烤食品、果汁、软饮料等的主要甜味剂[41]。HFCS 含有 55%~90%的果糖并是日常饮食中主要的果糖来源。近 30 年里，随着 HFCS 的摄入不断增加，美国的肥胖发生率也形成一种趋势[42]。在对大鼠和人的果糖摄入对提质量和糖脂代谢的研究中，表明高果糖餐是肥胖、糖尿病和代谢综合征的主要危险因素[43][44]。研究显示[45]，富含果糖饮食可能是 NAFLD 发病的危险因素；动物实验[46][47]表明喂养高果糖饮食加快小鼠肝脏脂质沉积以及大鼠肝细胞形成饱和小泡混合型脂肪变。
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R965;R575

【参考文献】