肠系膜传入神经在感染后肠易激综合征发病中的作用

发布时间：2020-06-14 10:49

【摘要】：第一部分PI-IBS模型鼠肠系膜神经电活动变化目的：研究旋毛虫感染豚鼠不同时期肠系膜神经电活动变化,以及不同时期肠系膜传入神经对压力和酸刺激的反应,明确肠系膜传入神经参与PI-IBS发病的机制。方法：40只雌性豚鼠,分为对照组,急性感染期组,慢性感染期组,对照组20只,其中10只为急性感染期对照组,另外10只为慢性感染期对照,其余两组各10只,同步饲养。在适应性喂养1周后,急性感染期组和慢性感染期组分别给予旋毛虫喂养。在不同时间处死豚鼠,取3-5cm空肠,解剖显微镜下分离出肠系膜神经,用胞外神经电生理记录仪记录不同组肠系膜神经电活动。对照组和慢性感染期组空肠肠管分别给予不同压力扩张肠管(0cmH2O,5cmH2O,10cmH2O,20cmH2O,30cmH2O,40cmH2O),不同浓度盐酸肠腔内灌流(0mM,1mM,10mM,20mM,30mM,记录不同组肠系膜神经对不同压力和不同酸刺激的放电频率。结果：(1)与对照组相比,急性感染期组肠系膜神经放电频率为10.48±3.89 Hz,较正常对照组明显降低(31.36±4.71Hz,p0.001),放电幅度明显下降。而在感染后8W慢性感染期组肠系膜放电频率为75.98±14.01Hz,明显高于正常对照组和急性感染期组(p0.001,p0.001),其放电幅度也明显增加。(2)慢性感染期组肠管行不同压力扩张后,肠系膜神经放电频率在0cmH2O,5cmH2O,10cmH2O,20cmH2O,30cmH2O,40cmH2O不同压力扩张后分别为63.39±4.56Hz,93.6±23.18Hz,92.56±13.38Hz,107.11±15.26Hz,107.44±21.83Hz,112.79±20.85 Hz；明显高于同等压力条件下扩张正常对照组肠系膜神经放电频率,其分别为32.86±3.73Hz,52.86±3.2Hz,49.99±3.9Hz,56.22±7.19Hz,67.57±4.53Hz,52.38±9.86Hz(不同相应压力扩张比较p0.01)。(3)慢性感染期组肠系膜神经放电频率在0mM,1mM,10 mM,20mM,30mM不同浓度盐酸盐酸刺激后分别为66.28±6.96 Hz,68.38±8.17 Hz,77.23±9.88 Hz,85.95±6.48 Hz,101.75±10.9 Hz；明显高于同等浓度条件下盐酸刺激后正常对照组肠系膜神经放电频率,其分别为33.99±8.95 Hz,34.25±7.64 Hz,40.14±6.69 Hz,41.65±3.63 Hz,48.96±11.77 Hz(不同相应浓度比较,p0.01)。结论：PI-IBS模型鼠肠系膜传入神经自发性电活动增加,对压力和酸刺激更敏感,可能在感染后肠易激综合征内脏高敏感性形成中起重要作用。第二部分PI-IBS模型鼠肠黏膜提取物对肠系膜神经电活动影响目的：研究旋毛虫感染豚鼠慢性期肠黏膜提取物对肠系膜传入神经电活动影响及肥大细胞在其中的作用,以明确PI-IBS肠黏膜分泌物质对肠系膜传入神经的影响。方法：20只雌性豚鼠随机分为不同部位肠黏膜提取物正常对照组和不同部位肠黏膜提取物慢性感染期组,而不同部位肠黏膜提取物慢性感染期组又分为未处理组和色甘酸钠预处理组。在适应性喂养1周后,慢性感染期组给予旋毛虫喂养。在旋毛虫感染8W后,分别处死豚鼠,获取不同组回肠、近结肠和远结肠肠黏膜,提取肠黏膜分泌物。在慢性感染期色甘酸钠预处理组,提取肠粘膜分泌物前将肠黏膜与含色甘酸钠(1mg/ml)的Krebs溶液孵育30分钟。不同组不同部位豚鼠肠黏膜提取物灌流至10只正常雌性豚鼠离体空肠肠管,胞外神经电生理记录仪记录不同组肠系膜神经电活动。结果：(1)慢性感染期未处理组回肠、近结肠、远结肠肠黏膜提取物上清液灌流肠管后肠系膜神经放电频率分别为41.01±7.6Hz、45.9±11.2Hz和48.25±9.7Hz,灌流前基线比较均明显升高(24.24±7.0Hz,p=0.001；25±9.35Hz,p0.001;25.43±7.6Hz,p0.001),较正常对照组相应部位黏膜提取物灌流后放电频率也明显增加(p=0.001,p=0.002,p0.001)。正常对照组回肠、近结肠、远结肠肠黏膜提取物灌流肠管后肠系膜神经放电频率分别为26.55±0.67Hz、30.88±6.92Hz和29.47±6.13Hz,与灌流前基线比较无明显变化(25.93±2.37Hz,p=0.666；27.25±6.97Hz,p=0.417；28.18±6.71Hz,p=0.694)。(2)色甘酸钠预处理慢性感染期组回肠、近结肠和远结肠肠黏膜提取物上清液灌流肠管后肠系膜神经放电频率分别为32.71±2.52Hz,30.94±4.44Hz和27.51±5.83Hz,与灌流前基线比较,回肠和近结肠色甘酸钠预处理慢性感染期组肠系膜神经放电频率有所增加(25.98±1.42Hz,p=0.015；26.14±2.15Hz,p=0.01),而远结肠色甘酸钠预处理慢性感染期组则无明显改变(26.75±1.18Hz,p=0.722)。与未处理慢性感染期组回肠、近结肠、远结肠肠黏膜提取物上清液灌流相比,色甘酸钠预处理组肠系膜神经放电频率则明显减少(p=0.03；p=0.002；p0.001)。结论：PI-IBS模型鼠肠黏膜提取物能明显兴奋肠系膜传入神经,参与PI-IBS病理生理过程,肥大细胞分泌的物质可能起重要作用,同时存在其它物质参与。第三部分PI-I BS患者肠黏膜提取物对肠系膜神经电活动影响目的：研究PI-IBS患者及非PI-IBS患者结肠黏膜提取物对肠系膜传入神经电活动影响,以明确PI-IBS患者肠黏膜分泌物质对肠系膜传入神经的作用。方法：分别取PI-IBS患者,非PI-IBS患者和正常人直肠乙状结肠交界处肠黏膜,获取肠黏膜提取物。将肠黏膜提取物上清液灌流至10只正常雌性豚鼠离体空肠肠管,胞外神经电生理记录仪记录不同组肠系膜神经电活动。结果：(1)PI-IBS患者直肠乙状结肠肠黏膜提取物上清液灌流后,肠系膜神经放电频率为54.96±14.49Hz,明显高于灌流前基线水平(26.59±2.1Hz,p0.001),而正常人直肠乙状结肠肠黏膜提取物上清液灌流后放电频率为32.37±4.89Hz,较灌流前基线水平无明显改变(30.24±2.62Hz,p=0.091)。PI-IBS患者肠黏膜提取物上清液较正常人肠黏膜提取物上清液能明显兴奋肠系膜神经(54.96±14.49Hz Vs.32.37±4.89 Hz,p0.001)。(2)非PI-IBS患者直肠乙状结肠肠黏膜提取物上清液灌流后,肠系膜神经平均放电频率为56.79±19.11Hz,明显高于正常人肠黏膜提取物上清液灌流后肠系膜神经放电频率(32.37±4.89Hz,p0.001),而与PI-IBS患者相比,无统计学差异(56.79±19.11Hz Vs 54.96±14.49Hz,p=0.66)。(3)存在排便过程异常的IBS患者肠黏膜提取物上清液灌流后肠系膜神经平均放电频率为66.03±12.6Hz,较排便过程正常患者明显增加(52.57±11.8Hz,p=0.045),平均病程超过12个月IBS患者肠黏膜提取物上清液灌流后肠系膜神经平均放电频率为58.26±18.81Hz,较病程不超过12个月的患者增加,但统计学无显著性差异(49.37±10.4Hz,p=0.09)。而性别、吸烟、饮酒、体重指数、睡眠障碍、腹胀和排便次数这些因素与IBS患者肠黏膜提取物兴奋肠系膜神经无明显相关性。结论：PI-IBS患者和非PI-IBS患者肠黏膜提取物均能明显兴奋肠系膜传入神经,提示肠道黏膜与肠系膜神经间的作用可能参与IBS病理生理过程。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R574

【参考文献】