慢性乙型肝炎相关肝纤维化的实验诊断方法的研究与评价

发布时间：2020-06-22 22:55

【摘要】：目的评价无创性血清学指标对慢性乙型肝炎(CHB)相关肝纤维化的诊断价值,初步构建logistic回归方程和人工神经网络(ANN)预测模型用于CHB相关肝纤维化的分期诊断。方法108例CHB患者,按病理诊断炎症分级G1级16例、G2级21例、G3级51例、G4级20例;按纤维化分期S0期12例、S1期18例、S2期21例、S3期20例、S4期37例。53例对照组包括非CHB其他疾病患者23例,健康体检30例。收集患者和对照组血清,利用化学发光法检测四项纤维化直接指标即透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ);利用颗粒增强免疫散射比浊法、速率法、氧化法和比浊法分别检测五项纤维化间接指标α2-巨球蛋白(α2M)、触珠蛋白(HPT)、谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、载脂蛋白A1(ApoA1),并通过公式计算出综合指标Fibrotest指数;直接指标和综合指标分别与肝活检组织病理结果相比较,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价其对CHB相关肝纤维化的诊断价值,并探讨联合诊断价值。分别以肝纤维化和肝硬化为因变量,以性别、年龄、四项直接指标、Fibrotest指数以及白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆碱酯酶(ChE)、5,-核苷酸酶(5,-NT)、腺苷脱氨酶(ADA)、血小板(PLT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)为自变量作单/多因素非条件Logistic分析,筛选与纤维化和肝硬化独立相关的指标,分别建立Logistic回归方程;同时应用Matlab6.5软件初步构建ANN预测模型用于CHB相关肝纤维化的分期诊断。结果CHB组血清HA(63.95 ng/ml)、LN(78.39 ng/ml)、PⅢNP(9.26 ng/ml)、CⅣ(67.32 ng/ml)和Fibrotest指数(0.41±1.55)水平均明显高于正常对照组(HA 19.73 ng/ml、LN 26.84 ng/ml、PⅢNP 2.58 ng/ml、CⅣ15.30 ng/ml ,Fibrotest指数-1.03±0.63),差异有统计学意义(P均0.01);CHB组LN、PⅢNP、CⅣ和Fibrotest指数水平高于疾病对照组(LN 30.69 ng/ml、PⅢNP 6.10 ng/ml、CⅣ35.27 ng/ml ,Fibrotest指数-0.59±1.58),差异有统计学意义(P均0.05),而HA差异无统计学意义(疾病对照组68.23 ng/ml, P㧐0.05);无炎症组的HA(34.72 ng/ml)、LN(30.67 ng/ml)、PⅢNP(3.90 ng/ml)、CⅣ(23.31 ng/ml)和Fibrotest指数(-0.84±1.15)低于G3组(HA76.63 ng/ml、LN120.38 ng/ml、PⅢNP10.01 ng/ml、CⅣ74.25 ng/ml ,Fibrotest指数0.34±1.20),更低于G4组(HA 104.68 ng/ml、LN 174.20 ng/ml、PⅢNP 15.95 ng/ml、CⅣ144.35 ng/ml ,Fibrotest指数1.74±1.53,P均0.001);G4组的五项指标显著高于G1组(HA 40.55 ng/ml、LN 32.03 ng/ml、PⅢNP 5.95 ng/ml、CⅣ40.66 ng/ml ,Fibrotest指数-0.24±1.39)和G2组(HA 35.77 ng/ml、LN 22.72 ng/ml、PⅢNP 6.13 ng/ml、CⅣ35.49 ng/ml ,Fibrotest指数0.23±1.28),差异有统计学意义(P㩳0.01);无纤维化组的HA(34.72 ng/ml)、LN(30.67 ng/ml)、PⅢNP(3.90 ng/ml)、CⅣ(23.31 ng/ml)和Fibrotest指数(-0.84±1.15)低于S3组(HA 66.31 ng/ml、LN 130.27 ng/ml、PⅢNP 8.73 ng/ml、CⅣ86.86 ng/ml ,Fibrotest指数0.62±1.29),更低于S4组(HA 88.78 ng/ml、LN 154.84 ng/ml、PⅢNP 12.36 ng/ml、CⅣ112.74 ng/ml ,Fibrotest指数1.15±1.63),差异有统计学意义(P㩳0.01);S4组的Fibrotest算术均数显著高于S1组(-0.24±1.84)和S2组(-0.27±1.26),差异有统计学意义(P0.05);CHB炎症分级和纤维化分期级别越高,各指标的浓度也越高;各指标诊断炎症的受试者工作特征曲线下面积(AUC)依次为PⅢNP(0.793)㧐CⅣ(0.787)㧐Fibrotest(0.753)㧐LN(0.715)㧐HA(0.631),其中LN可以阳性似然比㧐10诊断炎症,五项指标联合以阴性似然比㩳0.1排除炎症;各指标诊断纤维化的AUC依次为Fibrotest(0.80)㧐CⅣ(0.771)㧐PⅢNP (0.755)㧐LN(0.738)㧐HA(0.626),其中LN可以阳性似然比㧐10诊断肝纤维化,五项指标联合以阴性似然比㩳0.1排除肝纤维化;各指标诊断肝硬化的AUC依次为Fibrotest(0.776)㧐CⅣ(0.752)㧐LN(0.745)㧐PⅢNP (0.725)㧐HA(0.625),五项指标联合可以阴性预测值98.1%排除肝硬化。由Logistic分析结果可得到诊断CHB肝纤维化的回归方程:logitP = -2.739 + 3.270*性别+ 0.003*CⅣ+ 1.959*α2M - 0.032*PLT;诊断CHB早期肝硬化的回归方程:LogitP = 16.388 + 2.85*性别+ 0.004*CⅣ- 0.037*PLT - 1.694*FIB;23例ANN模型验证组中预测结果与病理学诊断结果一致的有17例;对有无纤维化的诊断,ANN模型预测的灵敏度为95.0%,特异度为66.67%,准确率达91.30%。结论纤维化血清学指标对监测CHB相关肝纤维化的进程有一定诊断价值,联合直接指标和综合指标可提高诊断效率,减少不必要的肝活检;化学发光法检测直接指标对CHB肝纤维化的诊断效能优于以往方法;logistic回归方程和ANN预测模型的构建有助于本实验室对CHB相关肝纤维化的分期诊断。本研究为CHB肝纤维化的无创伤性诊断和病情监测提供了帮助。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2
【图文】：

指标,直接指标,预测值,炎症

选择“灵敏度+特异度-1 值（即约登指数）最大”状态下的血清值为诊断界值，HA、CⅣ、LN、PⅢNP、Fibrotest 指数诊断炎症的界值分别为：43.5、36.2、88.65、5.65、-0.28。将≥该界值定义为阳性，以肝组织活检病理结果为金标准计算该诊断界值下的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比；同时计算四项直接指标联合、四项直接指标+Fibrotest 联合（五项联合）后的各诊断评价指标。综合上述指标结果，PⅢNP、CⅣ、Fibrotest 指数、五项联合对炎症有一定的诊断价值。尤其在五项联合试验中，阴性似然比㩳0.1，说明其应用于排除炎症时非常可靠；而 LN 的阳性似然比㧐10，说明其用于诊断炎症时非常可靠。详见表 10。表10 血清纤维化直接指标、Fibrotest指数诊断炎症的能力AUC AUC 的 95%CI灵敏度(%)特异度(%)约登指数阳性预测值(%)阴性预测值(%)阳性似然比阴然HA 0.631 0.542-0.720 63.55 59.26 0.23 75.56 45.07 1.56 0

曲线,肝纤维化,指标,曲线

20HA、CⅣ、LN、PⅢNP、Fibrotest 指数诊断纤维化的界值分别为：22.1、42.05、88.65、6.75、-0.28。综合单项指标和联合指标的灵敏度、特异度、阳性/阴性预测值、阳性/阴性似然比结果发现，Fibrotest 指数、CⅣ、PⅢNP、LN 和联合指标对肝纤维化诊断价值稍高。尤其是五项联合试验的阴性似然比㩳0.1，说明其应用于排除肝纤维化时非常可靠；而 LN 的阳性似然比㧐10,说明其用于诊断肝纤维化时非常可靠。详见表 11。

【参考文献】