兰索拉唑通过抑制幽门螺杆菌诱导的NF-κB和Akt激活下调胃上皮细胞表达COX-2

发布时间：2020-06-26 04:24

【摘要】：目的： 研究兰索拉唑（lansoprazole，LPZ）在体外对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染胃上皮细胞后诱导表达环氧化酶2（cyclooxygenase-2，COX-2）及前列腺素E2（prostaglandin，PG）的影响，同时，观察该效应LPZ处理前后是否与核因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）和Akt通路的改变有关，从而了解LPZ潜在的免疫调控作用及其分子机制。 方法： 采用RPMI-1640培养基体外培养胃上皮细胞系AGS，并根据不同的实验目的分为5组：（1）空白对照组：仅给予0.1%DMSO；（2）Hp感染组：用感染复数（multiplicity of infection，MOI）为100的Hp感染细胞24h；（3）LPZ干预组：Hp感染前加入0～100μmol/L LPZ作用3h，100MOI的Hp感染24h。乳酸脱氢酶实验筛选LPZ的最大作用浓度；（4）NF-κB抑制剂PDTC干预组：Hp感染前加入PDTC作用30min，100MOI的Hp感染24h；（5）PI3K抑制剂LY294002干预组：Hp感染前加入LY294002作用30min，100MOI的Hp感染24h。实时定量PCR和Western blot分别检测处理前后COX-2的mRNA和蛋白的表达；ELISA检测PGE2分泌水平。提取细胞核蛋白与胞浆蛋白，Western blot检测细胞内NF-κB和Akt的激活情况。 结果： （1）与对照组AGS细胞相比，Hp感染后AGS细胞COX-2mRNA及蛋白表达水平显著增高；LPZ（100μmol/L）、NF-κB抑制剂PDTC和PI3K抑制剂LY294002预处理均可明显降低Hp诱导的COX-2mRNA及蛋白表达水平。 （2）与对照组AGS细胞相比，Hp感染后AGS细胞PGE2含量显著增高； LPZ（100μmol/L）预处理可明显降低Hp诱导的PGE2分泌。同样，PDTC和LY294002也能抑制Hp诱导的PGE2的产生。 （3）Western blot结果显示，Hp感染能诱导AGS细胞NF-κB p65亚基核转位，而LPZ预处理后细胞核内p65亚基含量明显减少。此外，Hp也能诱导AGS细胞内Akt磷酸化，而LPZ也能降低细胞内磷酸化Akt的水平。 结论： （1） LPZ能抑制Hp感染AGS细胞所诱导的COX-2和PGE2的产生； （2） LPZ抑制Hp诱导AGS细胞表达COX-2和产生PGE2可能与抑制NF-κB和Akt激活有关。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R573
【图文】：

图 1 不同浓度 LPZ 对 AGS 细胞 LDH 产生的影响唑对 Hp 感染 AGS 细胞后 COX-2 mRNA 表对照组样本的 cDNA 进行梯度稀释，稀释后取 2μL 作模物进行扩增，如图 2 所示，目的基因扩增曲线起峰良好，线斜率为 3.68，线性相关系数ｒ＞0.993，且具有较好的量 PCR 结果显示，Hp 未感染前 AGS 细胞 COX-2 表达A 水平显著增高。而 AGS 细胞预先经 100μmol/L LPZ 处有所降低。此外，AGS 细胞预先用 PDTC 或 LY29400p感染后所诱导的COX-2 mRNA表达，这表明COX-2的产活有关（图 2C）。

22C 2 LPZ、PDTC 以及 LY294002 对 Hp 诱导 AGS 细胞表达 COX-2 mRNA 的A：COX-2 的荧光扩增曲线；B：标准曲线图；C：各组 COX-2 表达相对含量

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 杨卓;张艳;黎村艳;于文;曹斌;余敏君;;幽门螺杆菌VacA N端片段通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡[J];中国免疫学杂志;2011年03期

2 唐卫军;;奥美拉唑、兰索拉唑和泮托拉唑治疗胃炎胃溃疡的疗效[J];中国医学创新;2013年10期

本文编号：2729820