唾液及胃幽门螺杆菌的分型和胃幽门螺杆菌与胃细胞凋亡的研究

发布时间：2020-07-16 19:02

【摘要】：幽门螺杆菌(Hp)是一种世界性流行的革兰氏阴性细菌，Hp的人群感染率约20.80％，是十二指肠溃疡和慢性活动性胃炎的主要致病因素之一，与胃癌的发生有一定的关系。由此吸引了众多学者对Hp的广泛深入的研究，但仍有许多问题有待解决，如口腔是不是Hp的寄居环境之一；为何Hp感染后，临床结局和转归有很大差异；如何判断Hp根治性治疗失败后是属再感染抑或复燃等。故本研究同时采用16sRNA和vacA为模板设计的引物，对唾液和胃粘膜中的Hp直接进行扩增，并与常规Hp检测法--快速尿素酶(RUT)和组织学银染法进行比较，观察其特异性和灵敏度。由于采用了一对以vacA基因的特殊部位为模板设计的引物，可将Hp扩增出259bp、286bp两种产物，而每一种Hp只能扩增出一种片段，前者来源于可表达VacA蛋白的60190菌株的信号序列，称为vacA_1；后者来源于不表达VacA蛋白的Tx30a菌株的信号序列，称为vacA_2。同时，对Hp的vacA PCR产物进行单链构象多态性分析(PCR-SSCP)，期望用Hp的毒力因子(vacA)，将不同Hp区分开来，寻找与临床某一疾病相关的细菌DNA单链构象。另外，根据PCR-SSCP分型结果，对3例DU的PCR产物行基因序列分析，观察是否有某处或某几处vacA基因有点突变或缺失及其与临床疾病的关系。并利用Southern杂交来证实PCR产物的特异性。此外，利用蛋白印迹法(western blot)来判断Hp的vacA和cagA基因型与表现型间的关系，以期建立一种简单、实用的临床诊断法来初步判断Hp的毒力强弱。最后，采用原位凋亡检测法和电镜分析，对Hp感染的胃十二指肠疾病进行研究，来探讨细胞凋亡与Hp感染在胃十二指肠疾病中的意义。本文结果及意义如下： 1．本文利用16sRNA和vacA为模板设计的引物对149例Hp阳性患者的胃粘膜直接行PCR检测，其特异性和灵敏度均与临床常规的Hp诊断法
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：1997
【分类号】：R573
【图文】：

andPCRassayofvacAZofsaliva，gastriebioPsysPeeiPCRassriebioPsysPecimens困)Se川mRUTIgGPositive困)困)GastriebioPsylogicstain一PositiveP(149)logiestain一negativeP(10)l(159)146/(149)77/(80)35/(149)2/(10)l/(4)159840/(10)159:Ote:括弧中的N代表每组实际可用的病例数NumbersinParenthesesindieatethenumberofavasamPlestestedineaehgrouPM65432IM

3以vacA标准参照物为模板的唾液和胃PCR产物在1.5%琼脂糖上的1阴性对照，23阳性对照(11637，11639)4，5:各来自于同一病人，奇数为唾液标本，偶数为胃粘膜标本analysisofpCRproductsrfomvastomaeh.，6;7，8;9，10MpBR322lllinflInegativecontr0I;11，12rePresentaPatient，resPeetively，AgarosegeleleetroPherosis2，3Positoddnumbsaliva，evennumbershowinggastrie38bioPsysPeeimen

2M以vacA为模板的胃PCR产物在2%琼脂掂上的电泳图pBR322luinnl阴性对照2阳性对照3，4，5胃粘膜标本garosegeleleetroPhoresisanalysisofPCRProductsfromvaeAin2lHinn1negativeeontrol2Positiveeontrol3，5，6gastriebioPsysP_286b

【共引文献】

相关期刊论文 前7条

1 袁著忻,叶明亮;细菌L型研究现状[J];前卫医药杂志;1998年03期

2 张拔山;赖福娣;辛培建;;五种检测幽门螺杆菌感染方法的评估[J];热带医学杂志;2006年01期

3 甘华田,欧阳钦;细胞凋亡与胃癌[J];四川医学;2000年04期

4 侯桂华,赵丽,贾继辉,李华芬,闫世坤,丛华;原因不明发热患者尿标本细菌L型的研究[J];山东医科大学学报;1998年02期

5 陈强;任刚;蔡嵘;许幼如;奚政君;张文竹;;胃癌及癌前病变中幽门螺杆菌的联合检测[J];上海第二医科大学学报;1998年05期

6 俞莹莹;吴勤动;许凯声;刘建爱;朱永良;钱可大;;唾液幽门螺杆菌抗原检测与慢性胃炎活动性及癌前病变关系的研究[J];中国实用内科杂志;2006年18期

7 华江,郑家驹,王毓明,李明珍;PCR检测胃黏膜和唾液中的幽门螺杆菌[J];苏州大学学报(医学版);2005年01期

相关会议论文 前2条

1 黎飒;朱贻盛;;乳腺癌对紫杉醇抗药性的研究进展[A];全国中医药科研与教学改革研讨会论文集[C];2000年

2 吴晓娟;陈峥宏;王菲;;抗生素致幽门螺杆菌细胞壁缺陷的研究[A];第3届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2011年

本文编号：2758382