Survivin在活化的肝星状细胞中的表达及其意义

发布时间：2020-07-16 20:15

【摘要】：目的:了解survivin在活化的肝星状细胞中的表达及其意义。 方法:实验分为原代肝星状细胞组、活化的肝星状细胞组、肝癌细胞组、正常肝细胞组,RT-PCR法测定各组细胞survivin mRNA的表达,以GAPDH作为内参照。用免疫荧光方法检测各组survivin的表达差异,荧光显微镜下取不同的高倍镜视野,计算阳性细胞百分率。用western-blotting法检测各组细胞survivin蛋白的表达。 结果:RT-PCR结果显示:survivin mRNA在活化的肝星状细胞的表达明显高于肝细胞和原代肝星状细胞,肝癌细胞中的表达最高。细胞免疫荧光显示:survivin在活化的肝星状细胞中明显表达,阳性率为66.07%±8.55%,明显高于肝细胞(9.74%±2.68%)和原代肝星状细胞(9.95%±2.53%),比较有统计学意义(p0.05)。而且肝细胞及原代肝星状细胞表达荧光强度很弱,在肝癌细胞中表达率最高,阳性率达69.41%±9.10%。Western-blotting的结果显示: survivin蛋白在活化的肝星状细胞中明显表达,明显高于肝细胞和原代肝星状细胞,在肝癌细胞中表达最高。 结论:抗凋亡基因Survivin在活化的肝星状细胞HSC-T6细胞中高表达,为开辟肝纤维化基因治疗提供了理论基础。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R575.2
【图文】：

实验结果提取的原代 HSCS显微镜下刚分离出的 HSCS 呈圆形，边界培养 24h 的 HSCS 细胞爬片 α-SMA 免疫 HSCS 未活化。一周后镜下可见细胞体积的 HSC 样，台盼兰拒染实验鉴定活细胞48 小时的细胞爬片进行 desmin 和 GFAP[1(93.7 士 0.53)%，见图 2.

培养 24h 的 HSCS 细胞爬片 α-SMA 免 HSCS 未活化。一周后镜下可见细胞体的 HSC 样，台盼兰拒染实验鉴定活细胞48 小时的细胞爬片进行 desmin 和 GFAP(93.7 士 0.53)%，见图 2.图 1 刚提取的原代 HSCS（×250）

图 3 总 RNA 电泳图注：1：HSC-T6 组；2：CBRH-7912.2 CBRH-7919、HSC-T6、BRL 细胞RT-PCR 结果显示：各组细胞的 GA条带均匀一致；在 260 bp 处组可见到不AlphaImager 凝胶成像系统对扩增产物中 survivin mRNA 相对表达值（survivi中 survivin mRNA 相对表达值（survivin相对表达值为 0.533 ±0.020，BRL 的相与 HSC-T6 细胞组间比较，p<0.05,差异胞组间比较，p<0.05,差异有统计学意义较，p<0.05,差异有统计学意义。BRL 组

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本文编号：2758454