慢性萎缩性胃炎患者幽门螺旋杆菌感染与TGF-βRⅡ、IL-6和TNF-α表达研究

发布时间：2020-07-27 19:46

【摘要】：目的:研究慢性萎缩性胃炎患者幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染情况对胃粘膜小凹上皮、间质炎性细胞中转化生长因子-β受体Ⅱ(Transforming Growth Factor-βReceptorⅡ,TGF-βRⅡ)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表达的影响。方法:1.收集2016年1月至2016年12月在四川省人民医院消化内科就诊的慢性萎缩性胃炎患者,行上消化道内镜检查和病理组织学活检,诊断标准参照中国慢性胃炎共识意见(2012年,上海)。2.采用石蜡组织DNA提取试剂盒,提取慢性萎缩性胃炎患者病理活检组织DNA。3.采用实时荧光定量PCR法(Taqman探针法)和免疫组化(Envision两步法)进行Hp检测。对检测过程进行全程质量控制。4.采用免疫组化(Envision两步法),检测TGF-βRⅡ、IL-6和TNF-α在胃粘膜小凹上皮和间质炎性细胞的表达情况。结果:1.对76例慢性萎缩性胃炎患者进行Hp检测,检测结果为Hp感染阴性组34例,其中女性19例,男性15例;Hp感染阳性组42例,其中女性23例,男性19例。2.在76例慢性萎缩性胃炎患者中,慢性萎缩程度与肠上皮化生严重程度、上皮内瘤变程度呈正相关(分别为r_1=0.697,r_2=0.366)。3.在76例慢性萎缩性胃炎患者中,肠上皮化生严重程度与上皮内瘤变程度呈正相关(r=0.522)。4.在Hp感染阳性组和阴性组中,慢性萎缩性胃炎患者慢性炎性反应差异有统计学意义(P0.05);5.在Hp感染阳性组和阴性组中,间质炎性细胞中IL-6的表达差异有统计学意义(P0.05);6.在Hp感染阳性组和阴性组中,间质炎性细胞中TGF-βRⅡ、TNF-α的表达无显著性差异(P0.05);7.在76例慢性萎缩性胃炎患者中,间质炎性细胞中IL-6的表达与慢性炎性反应程度呈正相关关系(r=0.249,P=0.03);8.在Hp感染阳性组和阴性组中,胃小凹上皮中TGF-βRⅡ、IL-6和TNF-α的表达无显著性差异(P0.05)。结论:在慢性萎缩性胃炎患者中,萎缩可能会促进肠上皮化生和上皮内瘤变的发生与发展,肠上皮化生刺激上皮内瘤变的进展。Hp感染可能会使慢性炎性反应严重程度增加,慢性炎性反应程度的增加诱导IL-6在间质炎性细胞中的表达水平增加。Hp感染可能与TGF-βRⅡ、TNF-α在胃小凹上皮和间质炎细胞无关,与IL-6在小凹上皮中表达也无关。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R573.32
【图文】：

参考图,慢性胃炎,诊断标准,意见

图 1 慢性胃炎诊断标准参考图（来源于:中国慢性胃炎共识意见，2012 年，上海）1.4.3 免疫组化结果判读标准：由两名未参与实验的高年资病理科医生协助判断 IHC结果。TGF-βR Ⅱ主要定位于细胞膜，IL-6 定位于细胞质，TNF-α 定位于细胞质，三者阳性物质均呈棕黄色（www.proteinatlas.org）。按切片中细胞染色强度(A)记分：0分为细胞无染色，1 分为浅黄色，2 分为棕黄色，3 分为红褐色[30,31]；再按切片中显色细胞所占比例(B)记分：每片随机观察 5 个具有代表性的高倍视野，计数 500 个细胞中的染色阳性细胞数，0分为<5%，1分为5%-25%，2分为25%-50%，3分为50%-75%，4 分为>75%。每张切片细胞染色积分=A×B，0 分为阴性（-），1-4 分为弱阳性（+），6-8 分为阳性(++)，9-12 分为强阳性(+++)[30,31]。1.5 统计方法应用 SPSS 20 软件进行生物学统计分析。基于实验数据为等级资料及结合其特征，

标准图,患者,女性,男性

经 RT-qPCR 和 IHC 共同检测 76 例 CAG 患者 Hp 感染情况。Hp 感染阴性组 3，其中女性 19 例，男性 15 例；Hp 感染阳性组 42 例，其中女性 23 例，男性 19 例见表 3）。RT-qPCR 与 IHC 结果判读标准图（见图 2、3）表 3 CAG 患者中的 Hp 感染情况Tab. 3 The infection of Hp in patients with CAGHp infection TotalHp(-) Hp(+)Female 19 23 42Male 15 19 34Total 34 42 76

标准图,肠上皮化生,性反应,慢性炎

图 3 IHC 检测 Hp 结果判读标准图（Envision 法，20×10 倍）A 和 B 为 Hp 感染阴性(-)图;C 和 D 为 Hp 感染阳性 (+)图，箭头所指为 Hp2.2 CAG 患者不同病理特征之间的关系:根据中国慢性胃炎共识意见[28]（2012 年，上海）病理组织学诊断标准，本研中 76 例 CAG 患者不同病理特征（慢性炎性反应、萎缩、肠上皮化生和上皮内瘤的检查结果如下：慢性炎性反应轻度 13 例，中度 45 例，重度 18 例；萎缩轻度例，中度 22 例，重度 8 例；肠上皮化生阴性 29 例，肠上皮化生轻度 24 例，中度例，重度 9 例；上皮内瘤变阴性 14 例，低级别内瘤变 35 例。（见表 4-6）表 4 CAG 患者不同程度慢性炎性反应和萎缩的表现情况Tab. 4 Different degrees of chronic inflammatory reactions and atrophy in CAG patientsMild Moderate Severe TotalChronic inflammation 13 45 18 76

【参考文献】