重症急性胰腺炎大鼠不同病程的细菌移位及肠道菌群组成结构的变化研究

发布时间：2020-08-06 20:18

【摘要】：目的:探究重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道菌群结构、细菌移位随病程延长发生的改变。方法:随机情况下将健康SD大鼠分为对照组(Control组n=10)、SAP组(n=30),SAP组又分为6、12、24h亚组,每亚组分别为10只。按比例配置5%牛磺胆酸钠试剂,采用胰胆管逆行注射制作重症急性胰腺炎模型。模型制备成功后分别于6、12、24h后处死大鼠,检测血清淀粉酶、内毒素水平,细菌培养法检测腹腔及脏器细菌移位率并用质谱仪鉴定培养出的阳性菌株,16S r DNA、实时荧光定量-聚合酶链式反应(real time-PCR)进行肠腔细菌定量分析,并观察12h亚组胰腺及肠粘膜病理改变。结果:SAP组大鼠血清淀粉酶较对照组升高显著且大于三倍以上(对照组=2086±686 U/L,6h=8707±1672 U/L,12h=9012±1505 U/L,24h=8797±1298 U/L,P0.01),12h亚组胰腺组织及小肠粘膜出现明显病理损伤;随着病程延长,SAP组大鼠肠腔内大肠埃希菌不断增殖(对照组=4.53±1.26,6h=10.07±2.57,12h=16.18±3.51,24h=19.45±4.70,P0.01),乳酸杆菌不断减少(对照组=23.12±4.46,6h=11.43±2.68,12h=5.20±2.07,24h=2.02±0.94,P0.01),同样双歧杆菌也不断减少(对照组=23.30±6.00,6h=17.61±3.94,12h=13.21±2.84,24h=9.49±3.41,P0.01),血清内毒素检测阳性率、肠系膜淋巴结及腹腔脏器细菌移位率均不断升高(血清内毒素:对照组=0%,6h=30%,12h=50%,24h=60%;肝脏:对照组=0%,6h=20%,12h=50%,24h=70%;胰腺:对照组=0%,6h=30%,12h=40%,24h=60%;肠系膜淋巴结:对照组=0%,6h=40%,12h=70%,24h=80%;P0.01)。结论:重症急性胰腺炎大鼠肠道粘膜屏障受损,肠道菌群紊乱,肠腔内需氧菌与厌氧菌比例倒置,随着病程延长,以大肠埃希菌为主的条件致病菌不断增值,乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧益生菌不断减少,致使肠腔细菌及内毒素移位,其与SAP并发的胰腺及全身感染存在一定关系,且随着病程延长不断加重。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R576
【图文】：

血清淀粉酶,对照组

图 2 血清淀粉酶检测( x±s)Fig.2 Serum amylase detection level (注：与对照组相比，*P<0.01 具有显著统计毒素检测阳性率及腹腔淋巴结和各脏器细菌移位率结果血清内毒素检测结果、腹腔及脏器细菌培养均为阴性，S腹腔和脏器细菌培养阳性率明显高于对照组且随着病程延清内毒素阳性率：对照组=0%，6h=30%，12h=50%，24h=6：对照组=0%，6h=20%，12h=50%，24h=70%；胰腺：对照组h=60%；肠系膜淋巴结细菌培养阳性率：对照组=0%，6h=4亚组与对照组比较均具有明显统计学意义，P<0.01，(图

细菌培养,脏器,阳性率,内毒素

培养阳性率：对照组=0%，6h=20%，12h=50%，24h=70%；胰腺：对照组=0%，6h=30%，12h=40%，24h=60%；肠系膜淋巴结细菌培养阳性率：对照组=0%，6h=40%，12h=70%，24h=80%；各亚组与对照组比较均具有明显统计学意义，P<0.01，(图3)。但在SAP组内不同时间点的各亚组，无论是血清内毒素检测阳性率或腹腔淋巴结和各脏器细菌移位率结果的组内比较均不具备统计学意义P>0.05。观察培养出的阳性菌落生长特点并挑取单个菌落进行质谱仪分析，鉴定出菌属共三种，分别为大肠埃希菌、金葡菌和粪肠球菌（图4）。其中共检出大肠埃希菌41株，金葡菌6株，粪肠球菌5株，大肠埃希菌检出率明显高于其他菌属（P<0.01）。

细菌鉴定,质谱图,大肠埃希菌,粪肠球菌

细菌移位率结果的组内比较均不具备统计学意义P>0.05。观察培养出的阳性菌落生长特点并挑取单个菌落进行质谱仪分析，鉴定出菌属共三种，分别为大肠埃希菌、金葡菌和粪肠球菌（图4）。其中共检出大肠埃希菌41株，金葡菌6株，粪肠球菌5株，大肠埃希菌检出率明显高于其他菌属（P<0.01）。

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