肝硬化腹水并发自发性腹膜炎与MCP-1的相关研究

发布时间：2020-08-06 19:59

【摘要】：目的:探讨肝硬化腹水并发自发性腹膜炎(Spontaneous bacterial peritonitis,SBP)与单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的相关关系,寻找可以早期诊断肝硬化腹水并发SBP的敏感、特异临床指标;评估MCP-1在肝硬化腹水并发SBP中的应用价值,为疾病的预防及个体化治疗提供理论依据;探究影响肝硬化腹水患者并发SBP的危险因素,对减少肝硬化腹水并发SBP患病率、改善患者预后具有重要临床意义。方法:病例组选择2015年12月至2017年7月于大连市第六人民医院住院的肝硬化腹水患者共80例,分为:肝硬化腹水并发SBP组40例,肝硬化腹水无SBP组40例,同期选择就诊于该院30例门诊健康体检者作为健康对照组。收集所有临床资料。采集治疗前入组患者的外周静脉血、腹水,健康对照组的外周静脉血,应用限制性内切酶(PruⅡ)酶切法进行MCP-1启动子(A-2518G)基因多态性的检测,应用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血血清和腹水中MCP-1的水平,并进行统计学分析临床指标与肝硬化腹水并发SBP的关系。探讨MCP-1启动子(A-2518G)基因多态性及血清、腹水MCP-1浓度与肝硬化腹水并发SBP的相关关系;应用亚组分析评估病因(乙肝后肝硬化、酒精性肝硬化)对血清、腹水MCP-1水平的影响;采用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC),通过分析其曲线下面积(Area under receiver operating characteristic curves,AUC)来判定相应的诊断价值,同时研究MCP-1与临床指标的相关性。结果:1.两组患者一般临床资料比较显示:两组间年龄、性别、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aaspartate aminotransferase,AST)、凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)差异无统计学意义(P0.05);肝硬化腹水并发SBP组白蛋白(Albumin,Alb)、血钠低于肝硬化腹水无SBP组(P0.05)。肝硬化腹水并发SBP组Child-Pugh分级、总胆红素(Total bilirubin,TBil)、血常规白细胞(White blood cell,WBC)、血常规中性粒细胞比例(Neutrophilratio,N%)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)、血清MCP-1、腹水多形核细胞(Polymorphonuclear,PMN)、腹水MCP-1高于肝硬化腹水无SBP组,差异有统计学意义(P0.05)。2.MCP-1启动子(A-2518G)位点的基因型与等位基因:(1)肝硬化腹水并发SBP组AG基因型频率显著高于肝硬化腹水无SBP组、健康对照组(P0.05);(2)肝硬化腹水无SBP组GG基因型频率显著高于肝硬化腹水并发SBP组、健康对照组(P0.05);(3)肝硬化腹水并发SBP组、肝硬化腹水无SBP组G等位基因频率显著高于健康对照组(P0.05);同时肝硬化无SBP组G等位基因频率高于肝硬化腹水SBP组(P0.05);(4)肝硬化腹水并发SBP组A等位基因频率高于肝硬化腹水无SBP组(P0.05)。3.按病因(乙肝后肝硬化和酒精性肝硬化)进行亚组分析显示血清、腹水MCP-1浓度差异无统计学意义(P0.05)。通过ROC曲线进行分析,血清MCP-1水平、腹水MCP-1ROC曲线下面积分别为0.923(95%CI0.864-0.981)、0.931(95%CI0.930-0.999),对诊断肝硬化腹水并发SBP有较高的准确性。通过约-登指数分析,用于判断肝硬化腹水并发SBP的血清MCP-1临界值是:272.34pg/ml,敏感度和特异度分别为90%、85%;腹水MCP-1临界值是:121.18ng/ml,敏感度和特异度分别为90%、92.5%。4.Person相关性分析得出血清、腹水MCP-1浓度与Alb(P0.05)、血钠呈负相关(P0.01);同时与血常规WBC、血常规N%、PCT、腹水PMN呈正相关,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1.Alb、血钠、Child-Pugh分级、TBil、血常规WBC、血常规N%、PCT、血清MCP-1、腹水PMN、腹水MCP-1是肝硬化腹水并发SBP的危险因素。2.MCP-1启动子(A-2518G)基因多态性可能通过影响MCP-1的表达参与肝硬化腹水并发SBP的发生发展。MCP-1有望成为早期诊断肝硬化腹水并发SBP的临床指标。3.血清、腹水MCP-1浓度与Alb、血钠、血常规WBC、血常规N%、PCT及腹水PMN具有一定相关性。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R575.2;R572.2
【图文】：

PCR扩增产物,琼脂糖凝胶电泳,基因型,条带

A 分子 Marker,1-6 是 PCR 反应扩增出的 MCP-1 的 DNA 片段，长度为图 1 PCR 扩增产物琼脂糖凝胶电泳酶(PvuⅡ)酶切 MCP-1 启动子（A-2518G 度是长度为 930bp 的 DNA，经 PvuⅡ酶切之后凝胶分 AA 基因型：为一条大小 930bp 的 DNA 条带；AGp、708bp、222bp 的 DNA 条带；GG 基因型为两条大小带。结果如图 2 。3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17

肝硬化腹水,基因型频率,启动子,等位基因频率

表 5 三组 MCP-1 启动子（A-2518G）位点基因基因多态性分布（n, %）基因型频率等位基因频率AA AG GG A 并发=40）3(7.50)* 29 (72.50) *# 8(20.00)# 35(43.75) 45(5无=40）4(10.00)* 12(30.00) 24(60.00)* 20(25.00)* 6016(53.30) 10(33.30) 4(13.30) 42(70.00) 18照组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；#与肝硬化腹水无 SBP 组相比，差异有统计学

肝硬化腹水,基因型频率,启动子

MCP-1启动子（A-2518G）的AA、AG、GG基因型频率在肝硬化腹水并发SBP组与健康对照组中的比较

【参考文献】