慢性HBV携带者重叠感染麻疹血清HBV载量变化及其与细胞因子关系研究

发布时间：2020-08-09 11:36

【摘要】： 【背景】我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区。人群中乙型肝炎病毒(HBV)感染率较高且绝大多数为慢性化,是导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要原因,严重威胁人们健康。持久而高水平的HBV复制是病情发展为肝硬化及肝癌的危险因素。抗病毒是治疗慢性乙肝的关键已成为全球的共识。虽然近年病毒性肝炎的抗病毒药物治疗方面取得了令人欣喜的进展,但目前临床上应用的抗病毒药物的不良反应较大,且获得的疗效“非常有限”。最大限度地长期抑制或消除HBV,是治疗慢乙肝的关键。联合当前使用的抗病毒药物,免疫治疗有可能持久抑制病毒复制,从而有希望清除cccDNA最终能获得完全应答,因此,免疫调节治疗是慢性乙型肝炎治疗的重要手段之一。但目前尚缺乏有效的乙型肝炎特异性免疫治疗方法。乙肝免疫调节治疗需要进一步研究。慢性HBV感染时,患者对HBV的特异性细胞免疫低下,免疫耐受,T细胞功能低下,改善T细胞功能可作为探索慢乙肝抗病毒免疫治疗的一个方向。病毒重叠感染发生干扰的现象已被证实,利用这种现象,有研究者将减毒麻疹疫苗接种慢性HBV感染者,观察到部分患者血清HBV载量下降,IL-2、IFN-r增高,提示乙肝病毒下降的原因可能与麻疹病毒激活的特异细胞免疫时产生的多种细胞因子对HBV-DNA复制有关。麻疹病毒重叠感染对慢性HBV感染者免疫作用值得进行深入研究。【目的】本研究对慢性HBV携带者自然重叠感染麻疹后血清HBV载量进行观察,并以慢性HBV携带者、麻疹患者作为对照,旨在了解慢性HBV携带者重叠感染麻疹后血清HBV-DNA载量的变化,并通过三组细胞因子比较,进一步探索麻疹病毒感染诱导的免疫反应在乙型肝炎免疫清除病毒中发挥的作用。【资料和方法】 1.23例慢性HBV携带者重叠感染麻疹患者(重叠感染组),来源于2006-2008年广州市疾病控制中心麻疹流行病学调查收集的标本,HBV-DNA阳性,HBsAg(+),麻疹抗体(+),其中男13例,女10例,年龄5～14岁;27例慢性HBV携带患者(HBV感染组),来源于2006年12月～2008年7月我院门诊,其中男15例,女12例,年龄6～15岁;27例麻疹患者(麻疹组),来源于2006-2008年广州市疾病控制中心麻疹流行病学调查收集的标本,其中男16例,女11例,年龄5～12岁。采集静脉血5ml,离心分离血清,- 20℃保存待测。 2.荧光定量PCR检测HBV-DNA:HBV-DNA荧光定量PCR检测试剂购自中山大学达安基因公司,操作严格按照试剂盒说明书进行,使用仪器为PE-5700荧光定量PCR仪,由计算机软件SmartcyclerⅡ分析计算定量结果。报告结论以IU /ml表示,并作对数转换后进行计算,病例均以 500IU/ml为阴性结果。 3.Luminex液相蛋白芯片定量检测细胞因子:7种细胞因子Luminex液相蛋白芯片试剂盒购自美国Panomic公司,操作严格按照试剂盒说明书进行,使用仪器为Luminex200分析仪(美国Panomic公司),由计算机软件Luminex100 intergrated system 2.3分析计算定量结果。 4.酶联免疫吸附分析法定性检测HBeAg、HBsAg:人电化学发光酶联免疫吸附分析法(Elisa)乙型肝炎e抗原试剂盒购自夏门新创公司,操作及结果判定严格按照试剂盒说明书进行,使用仪器为Alisei全自动酶免分析仪。 5.统计学处理:采用SPSS 11.0软件包进行统计学处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,HBV DNA因定量所测得值个体差异较大即离散度较大呈偏态分布,故对其进行对数转换,取其对数值进行t检验统计分析。采用单因素方差分析,组间两两比较q检验,并对部分数据进行双变量相关性分析。以P0.05为差异具有统计学意义。【结果】 1.血清HBV-DNA载量对数值(IU/ml):重叠感染组(5.3579±1.4813),慢性HBV组(7.2549±0.9853),两组比较差异具有显著性(P0.05),重叠感染组水平显著低于HBV组。 2.三组IFN-r、TNF-a水平有差别,(P0.05)有统计学意义,重叠感染组水平最高,其次为MV组,最后是HBV组。两两比较,重叠感染组水平均与其余两组有差别(P0.05)且均高于其余两组。 3.三组血清IL-4,IL-5水平有差别,(P0.01)有统计学意义,重叠感染组水平最低,其次为MV组,最高是HBV组。两两比较,重叠感染组水平均与其余两组有差别(P0.05)且均低于其余两组。 4.三组IL-2、RANTES及IL-10的水平无差别,(P0.05)。 5.HBV-DNA载量与各细胞因子的关系:HBV-DNA载量水平与IL-4,IL-5水平均呈正相关关系(P0.05), IL-4(r=0.61)、IL-5(r=0.55)。HBV-DNA载量水平与IFN-r、TNF-a水平均呈负相关关系(P0.05), IFN-r(r=-0.71)、TNF-a(r=-0.57)。HBV-DNA定量与IL-2、RANTES水平无相关性(P0.05)。 6.重叠感染组HBeAg阳性率18/23,78%;慢性HBV组HBeAg阳性率22/27,81%,两组无差别,(P0.05)。【结论】 1.重叠感染组血清HBV-DNA载量水平明显低于慢性HBV组,麻疹病毒重叠感染对血清HBV载量有一定的抑制作用。 2.重叠感染组血清与对照组比较,Th1型细胞因子IFN-r、TNF-a水平升高,Th2型细胞因子IL-4,IL-5水平降低提示慢性HBV携带者重叠感染麻疹后,Th1型细胞应答增强。 3.重叠感染组和慢性HBV组HBV-DNA载量水平与IL-4,IL-5水平均呈正相关,与IFN-r、TNF-a水平均呈负相关提示慢性HBV携带者重叠感染麻疹后HBV-DNA复制减弱与Thl型细胞应答增强、Th2型细胞应答减弱有关。
【学位授予单位】：广州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R512.62
【图文】：

TNF-a标曲

慢性HBV携带者重叠感染麻疹血清HBV载量变化及其与细胞因子关系研究

IL-4标曲

慢性HBV携带者重叠感染麻疹血清HBV载量变化及其与细胞因子关系研究

HBV-DNA标曲

【参考文献】