3种方法检测乙型肝炎病毒YMDD变异的比较研究及临床结果分析

发布时间：2020-08-19 21:08

【摘要】： 目的对检测乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的3种方法进行灵敏度和特异性比较,并结合患者治疗前HBV DNA载量、ALT水平及免疫标志物和YMDD变异后HBVDNA载量等临床信息进行结果分析。方法分别以荧光定量PCR(FQ-PCR)、通用模板信号扩增(UT-PCR)和聚合酶链反应微板核酸杂交-酶联免疫吸附法(PCRmnh-ELISA),对拉米夫定治疗过程中血清出现HBV DNA由阴转阳的52例慢性乙型肝炎患者,进行HBV YMDD变异检测,比较3种方法的敏感性,并对3种方法检测结果不一致的标本进行测序,比较它们的特异性。同时将治疗前HBV DNA载量、ALT水平、免疫标志物及变异后HBV DNA载量与YMDD变异结果相结合进行综合分析。结果FQ-PCR、UT-PCR和PCRmnh-ELISA对YMDD变异的检出率分别为:53.85%、48.08%、73.07%,经两两比较,FQ-PCR和UT-PCR均与PCRmnh-ELISA有明显差异(P＜0.05),而FQ-PCR与UT-PCR无显著性差异(P＞0.1)。将检测结果不一致的17例标本进行测序,FQ-PCR、UT-PCR、PCRmnh-ELISA与测序结果的符合率分别为94.1%、70.6%、29.4%,三者之间差异有显著性(P＜0.005)。52例研究患者中,28例发生了YMDD变异,其中YIDD 17例,YVDD 7例,YIDD和YVDD混合变异4例。发生YIDD变异的患者较治疗前HBV DNA水平显著降低(P＜0.05),发生YVDD变异的患者较治疗前HBV DNA水平差别无统计学意义(P＞0.05)。YVDD变异后的HBVDNA水平与YIDD变异后HBV DNA水平无显著性差异(P＞0.05)。YMDD变异组治疗前的ALT基础水平高于YMDD野生组治疗前水平(P＜0.01),治疗前HBV DNA水平及HBeAg阳性率在变异组和野生组中无差别(P＞0.05)。结论①3种方法比较,FQ-PCR检测HBV YMDD变异具有较高的灵敏性和特异性,并能同时检测出野生株和变异株的混合感染,与测序结果相符,是诊断HBV YMDD变异较好的方法。UT-PCR与PCRmnh-ELISA相比,特异性较好,且能具体检测出YVDD、YIDD两种变异,与测序结果符合率较高。以上结果提示,FQ-PCR和UT-PCR法在检测HBV YMDD变异方面优于PCRmnh-ELISA法,值得临床推广应用。②PCRmnh-ELISA由于操作烦琐和较高的假阳性率,建议在方法学得以改进后再考虑临床应用。③拉米夫定治疗前ALT基础水平高可能是YMDD变异的一个易发因素。密切监控慢性乙肝患者的HBV DNA及ALT水平,有利于及时发现YMDD是否发生变异。④动态监测HBV YMDD变异情况,有助于在拉米夫定治疗过程中及时发现YMDD变异,及时调整治疗方案。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2007
【分类号】：R512.62;R450

【参考文献】

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本文编号：2797589