CysLTR1通路调控自噬参与铝负荷肝损伤机制

发布时间：2020-08-25 00:58

【摘要】：目的:1.观察LTs受体不同亚型及自噬通路在慢性铝负荷损伤肝组织中的表达变化。2.观察Cys LTR1信号通路干预对自噬通路及铝负荷肝损伤的影响。方法:1.采用SD大鼠灌胃给予葡萄糖酸铝(Al3+200mg·kg-1),一天一次,每周5天,连续20周,建立慢性铝超负荷大鼠肝损伤模型。HE染色观察大鼠肝组织病理学变化;用生化试剂盒检测大鼠血清ALT、AST活性,肝组织SOD活性和MDA含量;ELISA检测大鼠肝组织LTB4、LTC4、LTD4及LTE4含量;QPCR检测大鼠肝组织LTs受体m RNA表达情况;WB检测肝组织LTs受体、PI3K、AKT、p AKT、p-m TOR、P62、Beclin-1和LC3B-Ⅱ蛋白表达情况。2.正常人源肝细胞L02随机分为正常对照组、铝负荷模型组(麦芽酚铝200μM,36h)、MK-571(3n M)+Al组、雷帕霉素+MK-571+Al组、和渥曼青霉素+MK-571+Al组。采用噻唑蓝(MTT)法检测L02细胞活性;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,以及ALT、AST活性;流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡率;WB检测细胞内Cys LTR1、PI3K、AKT、p AKT、p-m TOR、p62、Beclin-1和LC3B-Ⅱ蛋白表达情况;透射电镜观察细胞自噬体的数量。结果:1.慢性铝负荷大鼠肝组织出现明显空泡变性及点状坏死;血清ALT和AST活性显著升高;肝组织SOD活性下降,MDA含量显著X椉

本文编号：2803064