黏液填充在消化道上皮微缺损及肠屏障功能中的作用

发布时间：2020-09-15 07:19

　　目的探讨黏液是否参与填充肠上皮单层细胞间的微缺损(intestinal epithelial gaps,IEG),评价黏液填充IEG在局部肠屏障功能中的作用。方法取溃疡性结肠炎(UC)患者及对照组的回肠末端组织,用AB-PAS、M uc2标记黏蛋白,观察IEG及黏蛋白表达情况。另外,分析了2013年1月至2014年12月39例UC患者及34例对照共聚焦内镜图片,运用改良Watson分级方法评估局部肠屏障功能。结果 UC组IEG未被黏液填充率、上皮微缺损率、杯状细胞比率[M(P_(25),P_(75)),%]分别为27.52(25.00,29.68)、5.33(3.48,6.62)、17.38(16.00,19.87),对照组分别为12.27(9.78,16.67)、0.27(0.00,0.69)、23.44(20.24,26.18),两组差异均有统计学意义(P0.01)。上皮微缺损率与杯状细胞比率呈负相关(r=-0.74,P0.01)。结论 UC患者存在局部肠屏障功能障碍;黏液填充IEG,维持局部肠屏障功能。
【部分图文】：

图像,黏液,杯状细胞

64山东大学学报(医学版)53卷12期散在吸收细胞之间，纵切面呈酒杯状(图1A三角形)，横截面呈靶征(图1B)。按照Watson分级［11］方法，Ⅰ级正常，表现为单个上皮细胞脱落，无荧光素渗出;Ⅱ级功能性缺损，表现为单个细胞脱落伴荧光素渗出(图1A箭头);Ⅲ级结构性缺损，表现为大片细胞脱落，伴上皮荧光素渗漏(图1C、D箭头)。UC患者回肠末端较对照组有更多的Ⅱ、Ⅲ级IEG结构。图1CLE下回肠末端IEG图像A、B:对照组回肠末端杯状细胞及IEG图像(三角形示杯状细胞，箭头示IEG);C、D:UC患者回肠末端的IEG图像(箭头)。Fig．1ＲepresentativeconfocalimagesofIEGinterminalileumA，B:ＲepresentativeimagesofIEGandgobletcellsinterminalileumofcontrols(Tri-angleindicatedgobletcells，andarrowindicatedIEG);C，D:ＲepresentativeimagesofIEGinterminalileumofUCpatients(arrows)．2．2黏液填充IEGMuc2是黏液的主要组成成分，免疫荧光方法检测Muc2表达，荧光显微镜下显示红色，细胞核显示蓝色(图2)。免疫组化法检测Muc2表达，光学显微镜下呈棕褐色沉淀物(图3A、3B)。光学显微镜下观察回肠末端组织AB-PAS染色情况，紫色示肠道黏液成分(图3C、3D)。通过以上方法，观察到IEG处有黏蛋白填充，UC患者较对照组则有更多的IEG未被黏液填充。2．3回肠末端局部肠屏障功能的评价用WatsonII/IIIIEG缺损率评估局部肠屏障功能，两组差异有统计学意义(P＜0．001);进而分析了杯状细胞数目占上皮细胞数目的百分比，两组差异有统计学意义(P＜0．001)。对上皮微缺损率与杯状细胞比率进行Spearman秩相关分析，两组之间呈负相关(r=－0．74，P＜0．001)。在荧光显微镜下观察IEG未被黏液封堵率情况，两组差异有统计学意义(P＜0．001)。见表1。表1UC组与对照组

黏液,荧光显微镜,箭头,肠屏障功能

周晓艳，等．黏液填充在消化道上皮微缺损及肠屏障功能中的作用65图2荧光显微镜下观察到IEG由黏液填充(×400)A、B、C:箭头示IEG处有Muc2表达，三角形示IEG处没有Muc2表达(UC患者回肠末端);D、E、F:箭头示IEG处有Muc2表达(正常回肠末端)。Fig．2IEGwasfilledwithmucusunderfluorescencemicroscopy(×400)A，BandC:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEG，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEGinter-minalileumofUCpatients;D，EandF:ArrowsindicatedMuc2expressioninIEGofterminalileumofcontrols．图3光学显微镜下观察到IEG由黏液填充(×400)A、B:箭头示IEG处有黏液填充，三角形示IEG处没有黏蛋白填充;C、D:箭头示IEG(无核结构)处有黏液填充。Fig．3IEGwasfilledwithmucusunderlightmicroscopy(×400)A，B:ArrowsindicatedthatIEGwasfilledwithmucus，andtriangleindicatedthatnomucusfilledtheIEG;C，D:ArrowsindicatedIEG(seedlessstructure)wasfilledwithmucus．

黏液,箭头,肠屏障功能,黏蛋白

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