急性胰腺炎患者外周血淋巴细胞亚群的改变及其发生机制研究

发布时间：2020-09-19 13:18

　　目的:研究急性胰腺炎(Acute Pancreatitis,AP)患者外周血淋巴细胞亚群的改变,初步探讨其发生改变的可能机制。方法:收集2017年01月至2018年12月右江民族医学院附属医院收治的AP患者73例,其中轻症急性胰腺炎(Mild Acute Pancreatitis,MAP)25例,中度重症急性胰腺(Moderately Severe Acute Pancreatitis,MSAP)25例,重症急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis,SAP)23例。并选择同期健康体检者25例作为对照组。应用流式细胞术分析AP患者外周血T淋巴细胞亚群、CD4~+/CD8~+比值、CD19~+B淋巴细胞亚群以及淋巴细胞自噬率、凋亡率;应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定AP患者外周血IL-6、IL-10、自噬基因LC3及凋亡基因Caspase-3水平。结果:(1)SAP组、MSAP组CD3~+T淋巴细胞比率、CD4~+T淋巴细胞比率、CD19~+B淋巴细胞比率均较对照组、MAP组下降(P0.05);SAP组较MSAP组下降(P0.05);MAP组较对照组仅轻度下降(P0.05);AP各组CD4~+/CD8~+比值均较对照组下降(P0.05),SAP组较MSAP、MAP组下降(P0.05),MSAP组较MAP组下降(P0.05)。(2)AP各组IL-6水平均较对照组升高(P0.05),SAP组较MSAP、MAP组升高(P0.05);MSAP组较MAP组升高(P0.05)。(3)AP各组血清IL-10水平均较对照组升高(P0.05),但SAP组较MSAP及MAP组低(P0.05);MSAP组较MAP组低(P0.05)。(4)SAP组血清LC3、Caspase-3水平及淋巴细胞自噬率、凋亡率较对照组、MAP组及MSAP组升高(P0.05),MSAP组较MAP及对照组升高(P0.05),MAP组较对照组仅轻度升高(P0.05)。(5)MSAP、SAP组血清IL-6、IL-10水平与LC3、Caspase-3水平呈正相关(P0.05),随着IL-6、IL-10水平升高,LC3、Caspase-3水平升高。(6)MSAP、SAP组血清LC3、Caspase-3水平分别与自噬率及凋亡率呈正相关(P0.05),LC3、Caspase-3水平与CD4~+T淋巴细胞比率及CD4~+/CD8~+比值及CD19~+B淋巴细胞比率呈负相关(P0.05),随着LC3、Caspase-3水平升高,淋巴细胞自噬率、凋亡率增加,CD4~+T淋巴细胞比率、CD4~+/CD8~+比值及CD19~+B淋巴细胞比率降低。结论:(1)AP尤其是SAP患者外周血CD3~+T淋巴细胞比率、CD4~+T淋巴细胞比率、CD4~+/CD8~+比值及CD19~+B淋巴细胞比率降低,机体免疫功能受损。(2)外周血IL-6、IL-10水平升高,导致LC3、Caspase-3表达水平升高,淋巴细胞自噬、凋亡增加,可能是AP患者淋巴细胞亚群改变的重要原因。
【学位单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R576
【部分图文】：

相关性分析,血清,相关性

2.3 血清 IL-6、IL-10 水平与 APACHE-II 评分的相关性2.3.1 血清 IL-6 水平与 APACHE-II 评分的相关性Pearson 相关性分析结果显示，MSAP、SAP 患者入院 24 h IL-6 水平与 APACH评分呈正相关（MSAP 组：r=0.9468、P=0.000；SAP 组：r=0.9101，P=0.000），随着水平升高，APACHE-II 评分相应升高，见图 2-1。A B

散点图,相关性分析,自噬,外周血淋巴细胞

图2-2 C：MSAP组IL-10水平与APACHE-II评分的相关性分析 D：SAP组IL-10水平与APACHE-II评分的相关性分析Figure 2-2 C: Correlation analysis between IL-10 level and APACHE-II score in MSAP group. D:Correlation analysis between IL-10 level and APACHE-II score in SAP group.2.4 外周血淋巴细胞自噬、凋亡2.4.1 外周血淋巴细胞自噬SAP患者淋巴细胞自噬率（%）较MSAP、MAP组及对照组升高（P＜0.05）；MSA组较MAP组、对照组升高（P＜0.05），MAP组较对照组仅轻度升高（P＞0.05），见表2-3、图2-3。2.4.2外周血淋巴细胞凋亡以二维散点图记录淋巴细胞凋亡情况，横坐标代表Annexin-V FITC，纵坐标代表PI

自噬,淋巴细胞凋亡,流式细胞术,血清

21G H图2-3 流式细胞术检测外周血淋巴细胞凋亡及自噬率 A：正常对照组淋巴细胞凋亡（Q3 1.73%）；B：MAP患者淋巴细胞凋亡（Q3 3.78%）；C：MSAP组淋巴细胞凋亡（Q3 6.44%）；D：SAP组淋巴细胞凋亡（Q3 11.1%）。E：正常对照组淋巴细胞自噬率（7.37%）；F：MAP组淋巴细胞自噬率（12.1%）；G：MSAP组淋巴细胞自噬率（16.3%）；H：SAP组淋巴细胞自噬率（22.9%）。Figure 2-3 Flow cytometry was used to detect the apoptosis and autophagy rates of peripheral bloodlymphocytes. A：apoptosis of lymphocytes in the normal control group (Q3 1.73%); B：apoptosis oflymphocytes in MAP patients (Q3 3.78%); C：apoptosis of lymphocytes in MSAP patients (Q3 6.44%);lymphocyte autophagy rate in the normal control group (7.73%). D：apoptosis of lymphocytes in MSAPpatients (Q3 11.1%); E：lymphocyte autophagy rate in the normal control group(7.37%); F：lymphocyteautophagy rate in MAP patients (12.1%). G：lymphocyte autophagy rate in MSAP patients(16.3%); H:lymphocyte autophagy rate in SAP patients (22.9%).2.5 血清 LC3、Caspase-3 水平2.5.1 血清 LC3 水平SAP 患者入院 24 小时血清 LC3 水平较 MSAP、MAP 组及对照组升高（P＜0.05）；MSAP 组较 MAP 组及对照组升高（P＜0.05）；MAP 组较对照组仅轻度升高（P＞0.05），见表 2-4。2.5.2 血清 Caspase-3 水平SAP 患者入院 24 小时血清 Caspase-3 水平较 MSAP、MAP 及对照组升高（P＜0.05）；MSAP 较 MAP 及对照组升高（P＜0.05）；MAP 组较对照组仅轻度升高（P＞0.05），见表 2-4。

【参考文献】