幽门螺杆菌感染与胃黏膜上皮细胞TGF-β1及B7-H1表达的研究
发布时间:2020-09-21 18:24
目的探讨不同菌量幽门螺杆菌(H. pylori)对体外感染胃黏膜上皮细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、B7-H1 mRNA表达的影响及其诱导TGF-β1表达的菌体因素,为支持H. pylori通过诱导胃黏膜上皮细胞表达TGF-β1及B7-H1,抑制宿主免疫功能,参与H. pylori免疫逃逸提供依据。 方法①选用1.0×109 CFU/m(l低浓度),4.0×109 CFU/m(l中浓度),8.0×109 CFU/ml (高浓度)H. pylori国际标准毒力菌株NCTC 11637活菌悬液分别感染体外培养胃黏膜上皮细胞,建立不同共孵育时间(0h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h、8h、12 h)H. pylori体外感染细胞模型,设立未加H. pylori的胃黏膜上皮细胞对照组,以酶链免疫吸附法(ELISA)检测感染及对照细胞各时间点培养上清TGF-β1含量,原位杂交法检测不同浓度感染及对照细胞共培养12 h B7-H1 mRNA的表达;②同时用H. pylori中浓度灭活菌悬液与体外培养胃黏膜细胞共孵育,测定共孵育细胞2h、12h培养细胞上清的TGF-β1含量。③用超声粉碎并经离心获取的H. pylori菌体成分上清、沉淀以及煮沸后上清、沉淀分别作用体外培养胃黏膜细胞,测定2h、12h培养细胞上清TGF-β1含量。 结果①H. pylori活菌悬液三种浓度各时间组胃黏膜上皮细胞培养上清TGF-β1含量均较对照组明显增高(P0.05),各浓度时间组TGF-β1表达量有相似的动态趋势,但尤以中浓度组TGF-β1表达量最高(P0.05);②中浓度H. pylori灭活菌株组与同浓度活菌组细胞培养上清TGF-β1含量差异无统计学意义(P0.05);③H. pylori菌体成分上清组较对照组和沉淀组细胞培养上清TGF-β1表达增高(P0.05);上清煮沸组较未煮沸组明显降低(P0.05);沉淀煮沸组与未煮沸组差异无统计学意义(P0.05)。④高、中、低浓度组感染细胞12h B7-H1 mRNA的表达均较对照组增高(P0.05),以中浓度组表达最高,并与高、中、低浓度组12 h感染细胞上清TGF-β1含量呈正相关(rs=0.628, P0.01)。 结论H. pylori可直接诱导胃黏膜上皮细胞分泌TGF-β1,其诱导因素为可溶性不耐热菌体成分;H. pylori同样可诱导胃黏膜上皮细胞B7-H1mRNA表达增高,且B7-H1mRNA表达与TGF-β1存在正相关。推测H. pylori通过诱导TGF-β1、B7-H1高表达,抑制宿主免疫反应,参与H. pylori免疫逃逸。
【学位单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2009
【中图分类】:R573
【部分图文】:
人胃段腆上皮细胞100x
明性对照原位杂交2加‘
中浓度原位杂交Z加X
本文编号:2823836
【学位单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2009
【中图分类】:R573
【部分图文】:
人胃段腆上皮细胞100x
明性对照原位杂交2加‘
中浓度原位杂交Z加X
【参考文献】
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本文编号:2823836
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