干扰素治疗慢性丙型肝炎患者T细胞亚群及PD-1、B细胞的表达变化

发布时间：2020-10-22 01:03

　　 目前全球大约有2亿人感染HCV，而丙型肝炎慢性化的比列高达60%-70%，其中5%-20%发展为纤维化，所以慢性丙型肝炎（chronic hepatitis C，CHC）已经成为严重威胁人类健康的公共卫生问题。有研究发现，丙型肝炎慢性化的主要成因包括病毒迅速变异导致对机体的免疫逃避，以及人体内的淋巴细胞出现功能缺失而不能有效清除病毒。人体内淋巴细胞出现功能缺失可能与T细胞凋亡、外周组织耐受和T细胞疲耗等机制有关，也可能与B细胞功能失调有关。B细胞功能失调，国外有学者报道认为HCV感染者B淋巴细胞升高，考虑CHC患者长期丙肝病毒抗原刺激，导致B淋巴细胞不断克隆增殖所致，而在国内尚未见有关B淋巴细胞变化报道。国外许多学者认为T细胞（包括HCV特异性效应CD8+T细胞和辅助性CD4+T细胞）功能失调与PD-1及其配体表达上调有关。 PD-1,被命名为程序性死亡分子，可在CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤性T细胞（NKT）、B细胞和单核细胞等表面诱导表达。功能分析表明，PD-1的胞质功能域包含两个酪氨酸信号传递基序，磷酸化后可与酪氨酸磷酸化酶SHP-2结合，使下游效应分子如酪氨酸激酶（Syk）和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)脱磷酸化，从而调节细胞功能。PD-1和相应配体PD-L结合后，产生一种免疫抑制信号，抑制了CD4+T细胞的免疫调节功能及CD8+T细胞的病毒清除功能，使HCV不能被有效的清除，导致丙肝感染的慢性化。慢性丙型肝炎的治疗主要以抗病毒为主，其公认的国际标准治疗方案是聚乙二醇干扰素(Pegylated interferon,PEG-IFN)联合利巴韦林(ribavirin, RBV),主要通过免疫调节、增加机体抗病毒免疫功能和直接抑制病毒复制的双重作用机制，可使治疗的持续应答率由普通干扰素的40%提高至70%左右,但在现有的治疗条件下,仍有相当一部分患者对治疗无应答或治疗后复发。对于干扰素治疗疗效的预测一直是近年研究的热点，目前认为,病毒因素和宿主因素共同影响着干扰素治疗的结局。此外,治疗过程中不同的病毒学应答模式对治疗效果的预测有着重要价值。对于不同应答模式下T细胞亚群及其表面PD-1的表达、B细胞的变化，目前国内相关报道较少。本研究对采用PEG-IFNα-2a联合利巴韦林治疗的141例慢性丙型肝炎患者中筛选出出现快速病毒学应答20例及无应答患者20例进行了回顾性分析.观察干扰素治疗过程中慢性丙型肝炎患者T细胞亚群及其表面PD-1、B细胞表达水平，探讨CHC患者干扰素治疗过程中出现快速病毒学应答及无应答患者的机体免疫状况及其与PD-1的关系。 研究目的 观察干扰素治疗慢性丙型肝炎患者T细胞亚群(CD4T+、CD8T+)及其表面PD-l、B细胞表达水平变化及其临床意义。 研究方法 受试对象为接受聚乙二醇化干扰素α-2a抗病毒治疗的141例慢性丙型肝炎患者中筛选出快速病毒学应答者(RVR)20例，无应答者(NR)20例。并以20例健康体检者作为正常对照组。采用流式细胞仪分别检测慢丙肝治疗前及治疗12周时外周血T细胞亚群及其表面PD-1的表达、B细胞的表达水平；全自动生化分析仪检测ALT、TBIL水平；采用COBAS AmpliPrep/COBASTaqMan48自动载量仪检测HCV-RNA载量。 研究结果 1.与正常对照组比较，慢性丙型肝炎患者CD4+T细胞增高,CD4+T/CD8+T增高,CD19+B细胞增高,CD8+T细胞降低, T细胞亚群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表达明显升高，结果均有显著统计学意义（P＜0.01）。 2.慢性丙型肝炎患者血清ALT水平、TBIL水平与外周血T细胞亚群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表达之间，其相关性分析的结果呈现负数，但统计学分析其差异无显著性意义（P0．05）。外周血T细胞亚群(CD4T+、CD8T+)表面PD-1的表达与与HCV-RNA载量无相关性（r=-O．105，0．268，P0．05）。 3.聚乙二醇化干扰素治疗慢性丙型肝炎患者12周时，无应答组与快速病毒学应答组患者比较，CD4+T细胞增高，CD4+T/CD8+T增高，CD19+B细胞增高,CD8+T细胞降低，结果均有统计学意义（P＜0.01或＜0.05）。无应答组患者T细胞亚群（CD4T+、CD8T+）上表达的PD-1明显升高，其差异有显著统计学意义（P＜0.01）。 研究结论 1.慢性丙型肝炎患者体内存在T细胞亚群失衡及B淋巴细胞升高，经PEG-IFN治疗后，其免疫功能得到一定恢复。 2.PD-1的高表达与HCV持续感染有关，可能是导致T淋巴细胞应答能力下降的重要原因。 3.PD-1的表达与血清HCV-RNA水平、ALT水平、TBIL水平均无相关性。
【学位单位】：广州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2014
【中图分类】：R512.63
【部分图文】：

表 3.CHC 患者与正常对照组外周血 T、B 细胞比较Table 3.The comparison on the frequency of peripheral blood T cell subsets 、B cells in CHCpatients and control groupGroup Cases CD4+T（%） CD8+T（%） CD4+T/CD8+T CD19+B（%）CHC 40 50.06±3.54 22.89±2.03 2.19±0.16 15.68±2.83Control 20 36.56±3.36 30.59±2.86 1.20±0.07 10.73±2.70t -12.38 9.81 25.80 -5.65P <0.01 <0.01 <0.01 <0.01

图 2.CHC 患者外周血 CD4+T 细胞和 CD8+T 细胞、CD19+B 细胞表达情况Fig 2. the frequency of peripheral blood T cell subsets、B cells in CHC patients3. CHC 患者与正常对照组外周血 CD4+T 细胞和 CD8+T 细胞表面 PD-1 的表达比较 与正常对照组比较，慢性丙型肝炎患者 CD4+T 细胞及 CD8+T 细胞上表达的PD‐1 明显升高，具有显著统计学意义（P＜0.01），见表 4、图 3、图 4。 表 4. CHC 患者与正常对照组外周血 T 细胞亚群表面 PD-1 表达比较Table 4. The comparison on the PD-1 expression of CD4+and CD8+T cells in CHC patients andcontrol group

图3.正常对照组外周血T细胞亚群表面PD-1表达Fig 3. The PD-1 expression of CD4+and CD8+T cells in control group
【参考文献】

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本文编号：2850862