溃疡性结肠炎患者血小板中钾通道和NLRP3表达水平改变的临床意义

发布时间：2020-10-22 18:22

　　 研究背景与目的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)是一种病因尚不明确的反复发作慢性非特异性肠道炎症性疾病,近年发病率明显上升,研究表明遗传因素、环境因素、宿主免疫系统和微生物的相互作用在其发病过程中起主要作用。在机体炎症反应的病理生理过程中,血小板是参与炎症和免疫反应的重要炎症细胞,研究发现溃疡性结肠炎患者中的血小板形态改变及血小板功能异常,促进炎症和促血栓形成作用增强,溃疡性结肠炎患者中血小板计数增加,其中明显增多的活化血小板在粘膜损伤修复中发挥重要作用。钾离子通道参与细胞的去极化和维持细胞膜电位,促进细胞增殖、活化和迁移。电压依赖性钾通道1.3(voltage dependent potassium channel 1.3,Kv1.3)和钙激活钾通道3.1(calcium-activated potassium channel 3.1,Kca3.1)是两种在血小板中广泛表达,调节血小板功能的重要电压门控钾通道。钾离子外流是引起炎症小体活化的重要因素之一,研究显示血小板Kv1.3通道与血小板活化有关,Kca3.1可能参与此过程,细胞内低钾是激活NLRP3(NOD-like receptor protein 3)炎症小体的共同特征,阻断钾离子外流抑制NLRP3炎症小体的激活。NLRP3炎性小体具有维持肠道内环境稳定及调节炎症反应的作用,NLRP3基因与溃疡性结肠炎的易感性相关。钾通道可以调节细胞内外钾的浓度,具有激活NLRP3炎性体的重要功能。因此,本实验研究目的是探讨溃疡性结肠炎患者血小板中钾通道和NLRP3表达水平的改变,以及与UC临床特征的关联分析。方法收集安徽医科大学第一附属医院明确诊断的UC患者17例和11例正常对照组临床资料。从患者标本中提取血小板,采用RT-PCR方法检测Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA表达,分析UC患者血小板Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA的表达水平与UC严重程度相关性。采用Western-blot方法检测UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3的蛋白表达水平,分析比较UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表达水平与UC严重程度相关性。同时分析比较UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表达与患者临床指标ESR、CRP及Mayo评分相关性。结果1.与正常对照组相比,UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3 m RNA表达量均明显增加(t=-6.067,-4.991,-18.981;p0.05),与UC严重程度无明显相关(F=0.055,0.103,0.733;P0.05)。2.UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(t=-9.627,-7.39,-7.821;p0.05),与UC严重程度无明显相关(F=0.8,0.194,1.293;P0.05)。3.UC患者血小板中Kca3.1与NLRP3蛋白表达水平明显相关(r=0.877,p0.05),Kv1.3与NLRP3蛋白表达水平有一定的相关性(r=0.478),但无明显差异(p0.05)。4.UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表达与患者临床指标ESR、CRP及Mayo评分均不相关(P0.05)。结论UC患者血小板中NLRP3与钾通道Kca3.1、Kv1.3表达增高,两者具有一定相关;UC患者血小板中Kca3.1、Kv1.3及NLRP3蛋白表达与UC病情严重程度及ESR、CRP及Mayo评分均无明显相关。
【学位单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R574.62
【部分图文】：

图 1 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 和 NLRP3mRNA 的表达水平与正常对照组比较：**P<0.013.2 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 mRNA 表达与疾病严重程度的关联分析轻、中、重度三组 UC 患者，Kca3.1 、Kv1.3、NLRP3mRNA 表达水平均高于正常对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。组间比较时，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表 2表 2 不同严重程度 UC 患者血小板中 Kca3.1，Kv1.3 和 NLRP3 mRNA 的相对表达严重程度 Kca3.1 Kv1.3 NLRP3轻度 1.04±0.24 0.96±0.23 0.84±0.06

3.3 UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 蛋白表达水平的与正常对照组相比，UC 患者血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。（表 3、图 2）表 3 对照组和实验组血小板中 Kca3.1、Kv1.3 及 NLRP3 蛋白表达水平P 值 <0.05 <0.05 <分组 Kca3.1 Kv1.3 NL对照组 0.59±0.15 0.51±0.22 0.6实验组 1.59±0.38 1.60±0.54 1.4P 值 <0.05 <0.05 <

严重程度 UC 患者血小板中 Kca3.1，Kv1.3 和 NLRP3 蛋1 2 3 4 5 6 7 8Kca3.1 Kv1.3 1.51±0.46 1.76±0.64 1.69±0.40 1.58±0.54 1.43±0.30 1.53±0.62 0.800 0.194 >0.05 >0.05
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本文编号：2851949