p38在急性肝衰竭小鼠及HBV-ACLF患者肝组织的表达及意义

发布时间：2020-10-29 09:55

　　 目的：研究p38MAPK在D-GalN/LPS诱导的急性肝衰竭小鼠模型以及乙肝病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者肝组织中的表达及其意义。 方法：采用D-GalN/LPS诱导方法构建C57BL/6小鼠急性肝衰竭模型,分别在(0、0.5、1、2、4、6、8小时)设立观测组,每组4只,处死动物取肝组织标本进行HE染色观察肝组织结构的病理变化,运用蛋白免疫印迹技术半定量检测及免疫组织化学染色定位检测肝组织中p-p38MAPK的表达。运用免疫组织化学染色、对照研究p-p38MAPK在HBV-ACLF、乙肝肝硬化、慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中的表达情况。 结果：1、D-GalN/LPS诱导的急性肝衰竭模型中位生存时间8.2±0.9小时,死亡率90%。小鼠的肝组织呈现大块坏死,随存活时间的延长,小鼠肝组织炎症程度逐渐加重。2、蛋白免疫印迹法检测p-p38MAPK在肝衰竭小鼠肝组织匀浆中的表达随时间变化持续增高,与肝损害加重程度一致,半定量分析表达量显著高于正常对照组(p=0.034)。免疫组化染色结果显示：炎症早期主要为窦细胞表达p-p38MAPK,随着肝组织损害加重,肝细胞表达p-p38MAPK渐多,坏死肝组织附近大量p-p38MAPK阳性肝细胞分布。3、正常人肝组织中p-p38MAPK的表达量很低,CHB患者肝组织内可见浸润淋巴细胞及肝细胞表达p-p38MAPK。从慢性肝炎→肝硬化→肝衰竭p-p38MAPK的表达量呈增多趋势,与临床观察病变程度呈逐渐加重相一致。 结论：1、D-GalN/LPS诱导的小鼠急性肝衰竭模型中,p-p38MAPK表达量随肝组织损害加重而增多,表明p38MAPK信号通路在肝衰竭病变过程中占重要地位。2、在HBV-ACLF患者致病过程中,p38MAPK信号通路可能发挥重要作用。
【学位单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R575.3
【部分图文】：

图1p38MAPK信号途径的图示。许多细胞外信号，例如细胞应激和致炎因子能激活p38MAPK途径，从而导致二层MAPK磷酸化级联反应的开始。其中MAPKKKs磷酸化p38MApK特异性MAP以S:MKK3、MKK4或MKK6。它们随后磷酸化p38MAPK的四种亚兀。(a、p、下不.16)不11二种可选择的剪切变异体:MxiZ，Exip、p38p2。AsKI能

织形态学分析模型0.5h及lh组与对照组(oh)无明显差别，肝脏形态正常，被膜红润、质地柔软，镜下看:肝小叶结构完整，无明显肝细胞变性胞浸润现象;模型2h组:肝脏表面见散在的点状出血点，呈暗红，镜下看肝小叶结构尚完整，肝细胞肿胀、气球样变，点状坏死少量炎性细胞浸润;模型4h组:肝脏表面见散在点片状出血点，肝脏明显肿胀，质地偏韧，镜下看:肝小叶结构尚存，部分肝细性，以灶状坏死为主，可见大量中性粒细胞浸润，肝窦充血;模:肝脏表面出血，呈暗红色，镜下看:肝细胞实质呈大块或亚大块肝细胞溶解消失，仅小叶中央部残留少数变性细胞，肝窦扩张并，凋亡小体散在，汇管区间质水肿，血管内皮细胞肿胀，炎症细胞p38在肝脏中表达

6APDH 00.568‘h)图3各纤l，J、鼠肝)])沙啤}‘}」p一p38MAPK表达免疫印迹结果OOdVH、8的d·d时间点(h)1冬14各纠小鼠JJf一夕}{织仁p:38MAI)K表达量相对值比较2.2免疫组化结果正常对照组及模型0.5小}].J一、l小时组小鼠牙「组织结构正常，川一细胞引「列规整，小叶结构完整，仅有较少晕的肝窦状内皮细胞阳性染色，偶.lJ’见jJf:实质细胞阳性染色;模找JZ小}I.J一红}小鼠肝到!‘织结构尚完整，月十细胞肿胀、z之球样变，点状坏死为主，可见少举炎性细胞浸润，p一P38MAPK染色阳性的细胞明显增多，肝窦状内皮细胞较多表达，部分枯否细胞及肝实质细胞也有}JIl性染色;模型4小时到}.，)Jl:小叶结构尚存
【参考文献】

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1 叶一农;高志良;;乙型肝炎肝衰竭发生机制中的三重打击[J];传染病信息;2009年05期

2 朱瑞芳;乐胜;马中富;刘志红;;p38 MAPK抑制剂对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用[J];临床和实验医学杂志;2006年07期

3 ;肝衰竭诊疗指南[J];中华肝脏病杂志;2006年09期

4 韩德五;肝功能衰竭发病机制的研究─—肠源性内毒素血症假说[J];肝脏病杂志;1995年03期

5 孙艳玲,赵景民,周光德,王松山,李文淑,孟二红,张泰和,张玲霞,陈菊梅,朱传琳,皇甫玉珊;重型肝炎发病时相及临床病理特征的研究[J];中华实验和临床病毒学杂志;2003年03期

本文编号：2860737