异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的研究

发布时间：2020-10-29 09:52

　　 第一部分:异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的体外实验研究 目的:通过观察异丙景糖酐作用后,HepG2.2.15细胞分泌HBV标志物的变化,探讨异丙景糖酐在体外条件下对乙型肝炎病毒(HBV)的复制是否有直接的抑制作用. 方法:以不同浓度的异丙景糖酐溶液作用于HepG2.2.15细胞72小时(h),以恩替卡韦(10μg/ml)作为阳性对照,以不含任何药物的胎牛血清培养基为阴性对照;分别于药物作用后24h、48h、72h取培养上清,并于72h后提取细胞内HBV-DNA。用ABBOT试剂盒检测培养上清中HBsAg, HBeAg的水平,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测细胞内外HBV-DNA水平,以MTT法检测细胞成活率。 结果:浓度为10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml的异丙景糖酐溶液作用于HepG2.2.15细胞72小时后,细胞成活率分别为93.09%、91.12%、87.03%(P0.05),组间比较无显著差异,与阴性组比较亦无显著差异。各用药组培养上清中的HBsAg、HBeAg及细胞内外HBV-DNA水平较阴性组低,但差异无统计学意义。用药组之间比较,高浓度组上述指标较低浓度组低,但差异无统计学意义;HBsAg、HBeAg及细胞内外HBV-DNA的抑制率随着药物作用时间的延长而增加,高浓度组的抑制率高于低浓度组,药物作用72h,各组(10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml)HBsAg的抑制率分别为3.43%、6.38%、10.57%(P=0.137);HBeAg的抑制率分别为5.6%、13.8%、19.2%(P=0.660);细胞内HBV-DNA的抑制率分别为0.7%、2.4%、3.5%(P=0.679),差异组间比较均无统计学意义。阳性对照(恩替卡韦)作用72h,培养上清HBsAg、HBeAg及细胞内外HBV-DNA水平较阴性组有显著下降。 结论:浓度为10μg/ml、40μg/ml、100μg/ml的异丙景糖酐溶液对HepG2.2.15细胞无毒性作用,对HepG2.2.15细胞表达分泌HBsAg、HBeAg及HBV-DNA无明显的抑制作用。 第二部分:异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的临床研究 目的:研究异丙景糖酐治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效和安全性,并进一步探讨可能的抗HBV机制。 方法:将HBeAg阳性的CHB患者按1:1:1:1随机分配至异丙景糖酐200mg、400mg和800mg组及对照组(甘露醇组)。用药组给予相应剂量的异丙景糖酐,对照组给予800mg甘露醇,疗程12周。观察治疗前后各组病毒学、生化学、血清学指标和安全性指标变化情况,血清细胞因子水平变化情况及不良反应发生情况。 结果:治疗12周后,异丙景糖酐800mg组的病毒应答率为18.75%,400mg组和200mg组的病毒应答率均为12.5%,组间比较差异无统计学意义。800mg组使HBV-DNA水平平均下降(0.96±1.41)log10拷贝/ml,治疗前后有显著性差异(P=0.0006);400mg组、200mg组和对照组HBV-DNA水平分别平均下降(0.28±0.92)log10拷贝/ml、(0.48±1.19)log10拷贝/ml、(0.27±0.84)log10拷贝/ml,组间和组内比较均无显著性差异。HBeAg阴转率、ALT复常率组间比较均无显著性差异。最高剂量异丙景糖酐800mg疗程12周对患者无明显不良影响。研究中报道的不良事件主要表现为慢性乙肝肝功能异常。本项研究有一例严重不良事件发生,但是位于安慰剂组。 800mg组用药后血清IFN-γ、TNF-α、IL-2水平较用药前升高,但IFN-γ水平治疗前后差异无统计学意义(P0.05),而TNF-α、IL-2水平治疗前与治疗后12周相比,差异有统计学意义(P=0.015;0.023)。其余各组治疗后上述细胞因子水平均较治疗前有所升高,但差异无统计学意义(P0.05)。比较各组治疗12周与治疗前各细胞因子水平的差值,800mg组IFN-γ、TNF-α、IL-2治疗前后的差值均明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.031,0.003,0.041)。 结论:异丙景糖酐剂量为800mg时对HBV复制有一定抑制作用,并显示了良好的安全性,抗病毒作用的发挥可能有赖于机体细胞免疫系统的激活。为了得到更多的有效性和安全性的资料,需要进行扩大样本量的临床试验。
【学位单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2008
【中图分类】：R512.62
【文章目录】：
符号说明
中文摘要
英文摘要
论文正文：异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的研究
    前言
    第一部分 异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的体外实验研究
        前言
        1. 材料与方法
        2. 结果
        3. 讨论
        参考文献
    第二部分 异丙景糖酐抗乙型肝炎病毒的临床研究
        前言
        1. 研究对象
        2. 研究设计
        3. 结果
        4. 讨论
        参考文献
文献综述
致谢
攻读硕士研究生期间发表的学术论文

【参考文献】

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1 刘平;袁继丽;倪力强;;重视中药的肝损伤问题[J];中国新药与临床杂志;2007年05期

2 ;中华医学会肝病学分会、传染病与寄生虫病学分会[J];肝脏;2004年01期

本文编号：2860734