Gankyrin在慢性肝炎、肝硬化及肝细胞癌中的表达及临床病理学意义

发布时间：2020-11-03 20:04

　　 目的分析Gankyrin参与肝细胞炎症及恶性转化的机制,探讨其在临床病理学诊断及治疗的意义。 材料和方法共选取2000年1月-2009年12月在我院行手术切除,福尔马林固定、石蜡包埋的肝组织404例,具体分组如下：第一组：选取2000年1月-2005年12月在我院行肝细胞癌手术切除的病例,进行随访,共获得完整随访资料194例,分析Gankyrin的表达与预后的关系；第二组：随机法选取2006年1月-2008年12月在我院行肝细胞癌手术切除的并具有完整临床病理信息的病例118例,两组病例共获得肝细胞癌312例；第三组：复习上述病例的病理切片,找出伴有非典型增生结节(区域)的病例共49例,再从2004年7月至2009年12月在我院行手术切除、病理诊断为非典型结节性增生的病例中,通过随机数字法选取58例,共获得非典型增生病例107例；第四组：随机数字法选取我院2009年行肝海绵状血管瘤的病例33例作为正常肝组织对照。上述4组病例均进行Gankyrin免疫组化染色,分析其表达水平与临床病理学特征的相关性。选取手术切除新鲜肝细胞癌及对应癌旁组织的标本23例,进行Westernblot及RT-PCR分析,检测组织中Gankyrin的蛋白质及mRNA表达水平。通过干涉肝癌细胞系HepG2细胞的Gankyrin表达,进行软琼脂克隆形成实验、平板克隆形成实验、迁移实验及生长曲线的实验研究,观察Gankyrin对肝癌细胞的恶性转化、增殖及迁移能力的影响；在体外细胞培养中,通过干涉及过表达Gankyrin,检测在正常培养或(?)NF-α刺激下,Gankyrin对NF-KB活性的影响。 结果1).404例肝组织中Gankyrin的免疫组化结果以及Westernblot、RT-PCR结果显示：Gankyrin高表达于肝细胞癌及非典型增生结节,分布于细胞质及细胞核；中等表达于癌旁肝组织,仅分布于细胞质；在无慢性炎症的肝海绵状血管瘤旁的肝组织内表达呈阴性。4组病例间,除肝细胞癌与非典型增生组无差异外,均有显著性差异(p=0.000)；2).癌旁肝组织中Gankyrin的表达量依有无慢性肝炎或肝硬化而不同,除慢性肝炎与肝硬化之间无差异(p=0.094)外,各组间差异均有显著性意义(p0.01)。3).在肝细胞癌组中,Gankyrin的细胞核表达水平与肝内转移(p=0.03745)以及癌旁的炎症及硬化情况(p=0.0399)呈正相关,细胞内总的Gankyrin表达量与癌旁肝炎及肝硬化情况(p=0.03489)呈正相关,并与肝细胞癌的Top-Ⅱα的表达(p=0.03091)呈正相关,而Gankyrin的细胞质表达仅与Top-Ⅱα的表达呈正相关(p=0.03091)。 4).在细胞水平试验中,干涉Gankyrin的表达,HepG2细胞的克隆形成能力及增殖能力下降,但迁移能力不受影响；在正常培养或TNF-α刺激情况下,干涉Gankyrin可使NF-kB的活性增高,而过表达Gankyrin则可抑制NF-kB的活性。5).肝癌中Gankyrin的表达水平与预后无相关性。 结论1). Gankyrin具有对肝细胞的恶性转化能力,并能促进肝癌细胞的增殖；2). Gankyrin的促癌作用发生在恶性转化的早期,而对肿瘤的进展作用不显著；3). Gankyrin的表达部位的差异可作为恶性转化的指征,在病理诊断中鉴别增生与非典型增生；4). Gankyrin可能参与炎症过程,且与TNF-α/NF-kB信号通路有关。
【学位单位】：中国人民解放军军医进修学院
【学位级别】：博士
【学位年份】：2010
【中图分类】：R735.7;R575.2
【部分图文】：

位居第三‘2’。全球每年约有6.2只105例新发病例，约6.0又105个患者死于肝细胞癌【，’。Hcc的流行病学特征随地域而不同，在每年的新发病例中，发展中国家约占85%，仅中国就占55%‘”(图1)。在中国，男性发病率约为35.2/105，女性为一3.32105。流行病学研究发现，HCC的独特之处在于它有明确的慢性肝脏损伤的背景，如慢性乙型(HBV感染)、丙型(HCV感染)肝炎，酒精性肝病，非酒精性脂肪肝，以及少见的遗传性血色病，al一抗胰蛋白酶缺乏以及自身免疫性肝病等【”。所有导致肝炎及肝硬化的危险因素都是Hcc的危险因素【3’，70一90%的HCC患者有肝炎或肝硬化的病史【’

及内质网应急 (endoplasmieretieulumstress，ER一stress)状态，激活与凋亡-增殖相关的信号通路，使肝细胞的增殖与凋亡失衡，肝细胞过度增生，并进一步呈非典型增生而最终诱发癌变(图2)。乡丁二二二)\乙二二二)犷一/尸孟二二卜只火\兰矍产一又二塑笙夕—火夔竺夕、一一一一一一一一、尸一一一一一违巫三三)图2:HCC的发生机制(参考文献l)在慢性肝炎肝硬化诱发HCC的进程中，众多的信号通路参与其中，如MAPK/刃呵K、51’ AT-3、PI3K、。一Raf-1尼rkZ及NF一KB通路等，其中最为关键的当属NF一沼通路(图3)。NF一沼通路被公认为炎症相关的标志性信号通路，也是联系炎症及肿瘤的纽带。核转录因子NF一祀在介导先天性免疫与后天性炎症反应的复杂的调控网络中起主导作用。最早发现NF一KB是B细胞K轻链增强子的B位点的特异性核因子，并由此得名。NF一KB是Rel家族成员的异源性二聚体，包括:RelA，RelB，e一Rel

体的实验设计及实验对象的病理生理过程相关。口口尸..封封l画到..图3:近年来，一种新的NF一沼信号通路(参考文献18)HCc密切相关的癌蛋白Gank州n引起广泛关注。
【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 ;Delayed hepatocarcinogenesis through antiangiogenic intervention in the nuclear factor-kappa B activation pathway in rats[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2010年02期

2 韦立新;石怀银;;肝癌前病变与高分化肝癌的病理诊断与鉴别[J];中华病理学杂志;2006年02期

3 ;Overexpression of p28/gankyrin in human hepatocellular carcinoma and its clinical significance[J];World Journal of Gastroenterology;2002年04期

本文编号：2869039