结肠电刺激对犬慢传输型便秘及肠神经系统网络结构的影响研究

发布时间：2020-11-09 14:47

　　 第一部分慢传输型便秘犬模型的建立及评价目的:本研究旨在建立慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)犬模型,并检测其胃肠传输、排便及结肠组织病理学改变情况。方法:观察和记录8只比格犬的基线信息,将犬随机分为对照组和造模组,造模组给予肉制罐头饮食联合口服复方地芬诺酯、盐酸阿洛司琼共计5周,每周测定胃肠传输时间(gastrointestinaltransittime,GITT),每日记录排便次数、大便性状,比较2组间差别。5周后经开腹手术取直乙交界处的全层结肠组织,通过光镜下观察、电镜下观察进行组织学评价,通过免疫组织化学分析来比较2组间神经组织标记物蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5,PGP9.5)、突触素(synaptophysin)、Cajal 间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)标记物 c-kit 的变化。结果:8只比格犬均顺利完成所有实验项目,造模干预后,造模组GITT较对照组显著延长(P=0.00l),造模组大便干硬明显,排便频率、大便性状得分较对照组均显著下降(P=0.043,P=0.002)。电镜下可见造模组肌间神经丛神经元和Cajal间质细胞出现核周间隙增大、线粒体肿胀、内质网扩张等损伤;免疫组化示造模组结肠组织PGP9.5、synaptophysin累计光密度值均较对照组明显降低(P=0.013,P=0.046),c-kit累计光密度值2组间无显著差异。结论:成功建立了符合临床表现及病理学变化特点的STC犬模型,该模型可用于结肠电刺激干预的疗效观察和评价。第二部分结肠电刺激对慢传输型便秘模型犬胃肠传输、排便及肠神经系统网络结构的影响研究目的:探讨结肠电刺激对慢传输型便秘模型犬的胃肠传输功能、排便频率、大便性状的影响并探讨其对ENS-ICC-SMC网络结构的影响。方法:观察和记录8只比格犬的基线信息,随机分为电刺激组和假刺激组,所有犬行开腹手术植入结肠电刺激系统,待恢复后进入干预期。采用肉制罐头饮食联合复方地芬诺酯、盐酸阿洛司琼的方法进行慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)造模,共计5周,第2周开始进行个体化结肠电刺激(首次刺激前进行个体化参数筛选)/假刺激(只模拟动作,不开启电刺激),每周测定胃肠传输时间(gastrointestinal transit time,GITT),每日观察和记录犬排便次数、大便性状,比较2组间差别。所有犬经开腹手术取直乙交界处的全层结肠组织,光镜下观察结肠组织形态,免疫组织化学染色分析2组间PGP9.5、synaptophysin、c-kit变化,Western blot方法检测synaptophysin、c-kit、缝隙连接蛋白connexin43、c-kit天然配体干细胞因子(stem cell growth factor,SCF)在2组间的差异。取出结肠刺激系统,观察结肠电刺激装置植入机体后的组织相容性。结果:8只比格犬均顺利完成所有实验项目,所筛选的刺激参数间存在个体差异。与假刺激组相比,个体化结肠电刺激可以缩短STC模型犬的GITT(P=0.002),增加排便频率(P=0.042)和大便性状得分(P=0.035)。电刺激组PGP9.5、synaptophysin免疫组化染色强度明显升高(P=0.008、P=0.032),c-kit的染色强度两组间无显著差异。结肠电刺激组synaptophysin蛋白表达显著增加(P=0.002),c-kit、connexin43、SCF蛋白表达在2组间无显著差异。肉眼和光镜下观察植入的电刺激装置未引起严重炎症反应,组织相容性较好。结论:个体化结肠电刺激能够改善STC模型犬的排便、促进胃肠传输;其作用机制可能是促进肠神经系统肌间神经丛的再生;动物对植入式结肠电刺激系统有较好的承受性和组织相容性。
【学位单位】：北京协和医学院
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R574.62
【部分图文】：

粗纤维￡４％；富含维生素及微量元素）４００ｇ／天。在验基础上，我们预实验探索了不同饮食组合对犬排便肉制罐头饮食代替标准饲料的效果更加明显。因此最予肉制罐头（由烟台中宠食品股份有限公司提供，原淀粉等；粗蛋白２６％，粗脂肪２４％，粗纤维夕．５％）?４实验期间均不限制饮水。??间的测定??同形状、各２０根的钡条（由天津塑料研究所有限公司时，２４小时置于明胶空心胶囊（购自江苏力凡胶囊有口咽深处，注视其全部吞咽。收集０小时起每次所排条的形状及数目，直到所有钡条排出体外。胃ａｌ?ｔｒａｎｓｉｔ?ｔｉｍｅ，?ＧＩＴＴ）定义为９０％的标记物（１８根）排终值取３种形状钡条ＧＩＴＴ的平均值。??

北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文???服用标准饲料４００ｇ／天，造模组改为肉制罐头４００ｇ／天，并给予３ｍｇ／ｋｇ／ｄ复方地芬??诺酯（常州康普药业有限公司）联合５ｍｇ／ｄ盐酸阿洛司琼（湖北巨胜科技有限公司）??每日清晨口服，其中复方地芬诺酯置于明胶空心胶囊内，用手放置于犬口咽深处，??注视其全部吞咽，盐酸阿洛司琼粉末用蒸馏水配成５ｇ／Ｌ的溶液，每日抽取ｌｍｌ用??注射器注射至犬口咽深处，注视其全部吞咽。对照组给予同等数量的明胶空心胶??囊及蒸馏水，采取同样的给药方法。干预期期间每周测量一次ＧＩＴＴ，并每日记录??犬的排便频率和大便性状，５周后干预停止。所有犬行开腹手术取直乙交界处（距??肛门１５ｃｍ）全层肠壁组织，进一步行形态学观察、免疫组织化学分析。??本研究由中日友好医院伦理委员会批准同意。??

３．排便频率??表１－３给出了对照组及造模组犬在干预期内不同时间点的排便频率情况。结??合表１－３和图１－４可知，两组实验动物排便频率不同，造模组排便频率较对照组??下降，主效应差异有统计学意义（Ｆ＝６．５６８，?Ｐ＝０．０４３）。具体时间点的比较可得??出自第２周开始造模组和对照组间排便频率的差别有统计学意义。???表１－３两组实验动物不同时间点排便频率统计表???分组?对照组（次／天）?造模组（次／天）?Ｐ??基线?２＿９５±０．４８?３．００士０．３４?０．８７０??第?１?周?３．００±０．５０?２．６５±０．３５?０．２９４??第?２?周?３．０８士０．４１?２．４５士０．２６?０．０４３??第?３?周?２．８８±０．１９?２．３３±０．３３?０．０２８??第?４?周?３．０８士０．２４?２．４０士０．２４?０．００７??第?５?周?２．９５±０．３７?２．３８±０．２６?０．０４４??注：数据以均数±标准差表示；粗体Ｐ值：户＜〇．〇５
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 余跃,殷光甫,钱伟,侯晓华;胃起搏对胃窦主要的兴奋性和抑制性神经的影响[J];中华消化杂志;2005年09期

本文编号：2876581