微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器的猪逆转录病毒传播风险研究

发布时间：2020-11-10 00:46

【摘要】： 背景：生物人工肝支持系统作为用来改善肝衰竭病人症状和帮助其过渡到肝移植的治疗手段之一,因为主要的细胞源：原代猪肝细胞的应用,不得不面对猪逆转录病毒的传播风险。在本实验室,以微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器已成功运用于肝衰竭实验猪的治疗,本实验通过检测此反应器的核心构件：微囊化猪肝细胞的逆转录病毒传播风险,来评估此反应器的生物安全性。 方法：制备微囊化原代猪肝细胞并培养,收集6小时,12小时,24小时,72小时的细胞培养上清,感染HEK-293细胞并传代,每周收集1次感染细胞,运用RT-PCR检测微囊化细胞培养上清及感染细胞的猪逆转录病毒特异基因,RT-qPCR检测病毒的载量。PK-15细胞作为阳性对照,hepG2细胞作为阴性对照。 结果：在微囊化原代猪肝细胞的培养上清及感染细胞中均可检测到猪逆转录病毒基因,并且在微囊化细胞培养上清中,病毒载量随时间增长而增加。 结论：以微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器有猪逆转录病毒病毒传播风险。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R318;R575.3
【文章目录】：
致谢
中文摘要
Abstract
缩略词
正文
    1.前言
    2.材料与方法
    3.结果
    4.结论
    5.讨论
    6.图例
    参考文献
其他论著
个人简历

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张明森;李素芝;龙仁玲;杨光;江玉兰;;高原猪肝细胞生物反应器的生物学活性[J];解放军预防医学杂志;2011年03期

2 马海滨;侯玲玲;王晓宇;关伟军;马月辉;;诱导性多潜能干细胞(iPS细胞)的研究进展[J];中国生物工程杂志;2011年08期

3 文立;陆爱云;曾凡辉;邹蓓艳;;病毒介导的基因治疗在运动损伤中应用展望[J];体育科学;2002年03期

4 李翠莹;安群星;陈要臻;陈晓鹏;;诱导性多能干细胞的研究进展[J];临床输血与检验;2011年03期

5 王红;潘明;刘菊;李天舒;何树森;;人二倍体细胞(2BS株)生产终末细胞特异性病毒检测[J];预防医学情报杂志;2011年06期

6 刘志昊;张国志;王长友;;蛋白激酶B与急性胰腺炎[J];广东医学;2011年12期

7 高红梅;王文飞;张巧;韩阳;王琪;任桂萍;付云威;李德山;;筛选糖尿病候选药物FGF-21受体激动剂的新型细胞模型的建立[J];药学学报;2011年08期

8 任贺;张磊;;拷问诱导多能性干细胞的应用前景[J];山东医药;2011年32期

9 陈秋雷;陈彤;姜桦;;诱导性多潜能干细胞技术进展[J];生物学杂志;2011年04期

10 赵永强;折占飞;;原发性肝癌基因治疗进展[J];疾病监测与控制;2011年08期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 徐荣臻;人白血病相关逆转录病毒的分子克隆与鉴定[D];浙江大学;2001年

2 袁成福;NFBD1/MDC1在宫颈癌中的表达及其作用研究[D];重庆医科大学;2010年

3 杨胜辉;载有hTERT基因逆转录病毒感染日本血吸虫童虫的研究[D];中南大学;2010年

4 王桂兰;IL-4RA基因转染阻止了哮喘模型的炎症发展[D];吉林大学;2006年

5 邓燕杰;人RI基因在脐血干细胞中的转染表达及对小鼠黑色素瘤基因治疗的研究[D];中国医科大学;2005年

6 符铁波;逆转录病毒的逆转录过程[D];中国协和医科大学;1993年

7 顾春虎;去细胞猪主动脉瓣构建组织工程心脏瓣膜的初步实验研究[D];第四军医大学;2005年

8 张海波;移植感染免疫基础研究：逆转录病毒载体pBabeNeo-HBD-2的构建和HBD-2转基因抗感染的研究[D];哈尔滨医科大学;2002年

9 张锦霞;抗菌肽在动物乳腺中的表达及对乳房炎主要病原菌的抑制效应研究[D];吉林大学;2006年

10 胡薇;逆转录病毒载体介导的胸苷激酶靶向治疗肿瘤的研究[D];吉林大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 刘飞;微囊化猪肝细胞为基础的流化床式生物反应器的猪逆转录病毒传播风险研究[D];浙江大学;2010年

2 李丹;BIG-3基因的克隆、表达及其促成骨活性的研究[D];第四军医大学;2004年

3 胡还章;生物人工肝的构建及其治疗急性肝衰的实验研究[D];第一军医大学;2000年

4 周霖;大规模猪肝细胞低温保存方法的建立及其在生物型人工肝系统中的生存状态[D];中国人民解放军军医进修学院;2003年

5 戴巧定;系统性红斑狼疮患者外周血细胞中新的人内源性逆转录病毒NP9基因的克隆、鉴定与蛋白表达[D];浙江大学;2004年

6 王凤飚;中空纤维固定化猪肝细胞血液灌流治疗肝衰犬实验研究[D];天津医科大学;2003年

7 贾雪梅;逆转录病毒载体介导Fcy::Fur融合基因联合5-FC对人卵巢癌细胞株HO-8910杀伤作用的初步研究[D];南京医科大学;2004年

8 余小菁;逆转录病毒介导的Bystin基因表达及其功能探讨[D];华东师范大学;2004年

9 季成;内皮抑素基因转移联合顺铂对肺腺癌A549的实验研究[D];苏州大学;2004年

10 程永波;慢性重型肝炎病人血浆对培养的HepG2细胞及胎肝细胞、猪肝细胞体外影响初步观察[D];第三军医大学;2004年

本文编号：2877204