经脾脏移植BMP-4诱导分化的肝干细胞治疗大鼠急性肝衰竭的实验研究

发布时间：2020-11-10 04:00

　　 目的：经脾脏移植BMP-4诱导分化的肝干细胞,探讨其对四氯化碳所致的SD大鼠急性肝功能衰竭的治疗作用。 方法：建立SD大鼠肝干细胞增殖模型,分离、培养和扩增大鼠肝干细胞,即肝卵圆细胞(hepatic oval cell, HOC);构建携带GFP的大鼠BMP-4腺病毒载体,并转染原代大鼠肝干细胞。以免疫荧光染色检测不同细胞分子标记物的表达,鉴定原代HOC和BMP-4诱导分化后的细胞表型。以腹腔注射四氯化碳建立大鼠急性肝衰竭模型,造模后24h将4×107/ml细胞悬液经大鼠脾脏异体移植。细胞移植术后记录SD大鼠生存率,分别于术后第2d、5d和7d,尾静脉取血送肝功能检测,获取大鼠肝组织标本行HE染色及免疫荧光检测。 结果：分离所得的大鼠原代HOC表达OV6,不表达Alb和CK19；腺病毒转染HOC 24h后,表达荧光蛋白GFP,转染Ad-BMP-4后18d的HOC表达肝细胞标志Alb；实验组大鼠的生存率、肝功能及肝脏损伤修复明显优于对照组(p0.05)。组织免疫荧光染色结果显示,实验组GFP阳性细胞较对照组细胞的增殖明显。 结论：BMP-4可体外诱导大鼠原代HOC向肝细胞定向分化；经脾脏异体移植以BMP4诱导分化的HOC,可明显改善CCl4所致SD大鼠急性肝衰竭。
【学位单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R575.3
【部分图文】：

1BMP一4mRNA在Ad一BMP4一HOC中的过BMP一4mRNA的表达量较空病毒对照组MOz10及MOI为5时BMP一4mRNA的表达量较空病毒对照组RNA的表达量与未转染组无差别。ionlevelofBMp一4mRNAintransfeetedeellswa一raseehainreaetion.lofBMP一4mRNAinAd一BMP一4grouPwithMOIolgrouPs.TheexPressionlevelofBMP一4mRNAinAanad一eontrolgrouPwithMOI5.TherewasnodiffereneeetedgrouP.

移杭术后第2人，取SD大鼠脾脏做冰冻切片，荧光显微镜卜发现，Ad一BMP一4一HOC不日Ad一HOC全目脾均主内均有GFP阳性细胞存在。GFP阳乍仁细胞逐渐向四周迁移。见图5。图5脾脏内GFP阳性细胞观察a，b:分另.J为Ad一HOC组和Ad一BMP一4一HOC组GFP阳性细胞;c，d:分别为Ad一HOC组和Ad一BMP一4一HOC组白光下图片。l了 igure5.GFPPositiveeellswerefoundinsPleens. Panel(a.b):lotsofGFPPosit丫 eeellswerefoundinsPlee一 15ofAd一「{OC乏 IndAd一BMP一4一I一IOCgrouP.Panel(e， d):ThePllasesofaandb. 3.6BMP一4诱导分化的HOC移植组肝损伤修复明显优于对照组!川胜丫叫专切少}HE染色，丁以观察川一组织的形态结构，移杭术后第5人，各组均，JJ见j]l一细胞大川‘状坏死，坏死f}小叶中央静脉开始
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 宋献文;沈培芝;石印玉;;补肾中药密骨片对骨质疏松大鼠骨骼和内分泌的影响[J];中国中西医结合杂志;1998年S1期

2 李东良,郭红哲,杨才生,黄爱琼,陈紫榕;大鼠酒精性肝损伤模型的建立及病理学观察[J];中西医结合肝病杂志;2000年02期

3 温进坤,韩梅,杜玮南,高社军;一种快速建立大鼠动脉粥样硬化模型的实验方法[J];中国老年学杂志;2001年01期

4 曹廷兵,闫振成,沈成义,王利娟,聂海,钟健,祝之明;代谢综合征大鼠模型的建立及其相关基因表达变化的研究[J];解放军医学杂志;2005年08期

5 柴可夫,柴瑞,王亚丽;糖肾汤对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用[J];浙江中西医结合杂志;2005年09期

6 陈敏,王玮,林海,陈燕惠,陈达光;早期干预与TrkA受体在脑损伤修复中的作用[J];解剖学杂志;2005年05期

7 商秀丽,徐万鹏,刘云会,杨金霞,张化,薛一雪;阿尔茨海默病大鼠模型海马MAPK的表达(英文)[J];神经科学通报;2005年04期

8 樊双义,谌小维,樊宏孝,张春青,吴毅,薛丽,郑健,胡志安;长时连续作业对大鼠觉醒能力的损害作用[J];第三军医大学学报;2005年21期

9 李达兵;唐军;范晓棠;宋敏;徐海伟;周光纪;白云;;PS1/APP双转基因AD模型小鼠与Aβ_(1-40)海马注射AD模型大鼠的组织病理学比较[J];第三军医大学学报;2006年16期

10 王磊;曾水林;朱建宝;李涛;;帕金森病大鼠海马区增殖神经干细胞分化情况的研究[J];临床神经病学杂志;2006年04期

相关博士学位论文 前10条

1 王建枫;锌对大鼠肝脏硬脂酰辅酶A去饱和酶-1（SCD-1）的影响及其调控机理研究[D];浙江大学;2008年

2 周春雷;五肽化合物PLNPK对大鼠抗GBM肾炎的治疗作用及其作用机制的研究[D];天津医科大学;2008年

3 云宇;缺血后处理抗大鼠肾缺血—再灌注损伤的作用机制研究[D];昆明医学院;2010年

4 刘明;梓醇对脑缺血损伤大鼠恢复早期神经功能的影响及其机制研究[D];北京中医药大学;2011年

5 沙莹;粒细胞集落刺激因子对脑缺血再灌注大鼠的治疗及其作用机制的研究[D];吉林大学;2010年

6 李国;白介素-6中和抗体及索拉菲尼对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的作用及其机制[D];中国协和医科大学;2009年

7 莫雪安;同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠模型的实验研究[D];广西医科大学;2011年

8 邹彬;电刺激干预对废用性肌萎缩大鼠线粒体生物合成和呼吸功能的影响[D];北京体育大学;2011年

9 孙凤平;参芪复方对GK大鼠肾脏NF-κB及PPARγ的影响[D];成都中医药大学;2011年

10 陈笛;藁苯内酯对大鼠蛛网膜下腔出血的神经保护作用及其机制的研究[D];重庆医科大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 黄增辉;经脾脏移植BMP-4诱导分化的肝干细胞治疗大鼠急性肝衰竭的实验研究[D];中南大学;2011年

2 于明明;硫酸化壳聚糖衍生物对实验性大鼠脂肪肝的防治作用研究[D];中国海洋大学;2010年

3 王冠栋;大强度间歇游泳运动对膳食诱导肥胖大鼠肥胖及炎症因子的影响[D];河南大学;2010年

4 刘舰杭;创伤性休克对大鼠血脂、TNF-α的影响[D];石河子大学;2009年

5 汪涛;胆碱能抗炎通路对大鼠呼吸机所致肺损伤的影响[D];桂林医学院;2010年

6 宋标;大鼠脑基底动脉EDHF反应及外源性EDHF对脑缺血再灌注损伤的保护作用[D];安徽医科大学;2010年

7 许黎忠;螺内酯对百草枯中毒大鼠肺纤维化的干预作用及其作用机制的实验研究[D];福建医科大学;2010年

8 詹增土;慢性全脑低灌注大鼠侧脑室旁白质改变及MMP-2，3和7的表达[D];福建医科大学;2010年

9 向永红;慢性间断性低氧大鼠氧化应激状态与RAS相关性研究及NAC干预作用[D];中南大学;2010年

10 袁浩;红霉素对慢性阻塞性肺疾病大鼠TGFβ_1、SLPI表达水平的影响[D];中南大学;2010年

本文编号：2877445