原发性胆汁性肝硬化的免疫发病机制和人脐带间充质干细胞治疗的安全性及有效性的研究

发布时间：2020-11-21 22:46

　　 长期以来，关于原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者自身抗体谱与疾病进展程度的相关性了解不够清楚。此外，患者血液中和肝内浸润的T细胞参与了PBC的病理损伤过程，失衡的T细胞导致自身反应性T细胞大量增殖引起PBC患者的免疫紊乱，但是肝硬化不同阶段PBC患者T细胞与临床指标的相关性研究目前不够深入。熊去氧胆酸（UDCA）是目前唯一公认的治疗PBC的药物。UDCA治疗应答的患者可有效延缓疾病进展，延长生存时间。然而，超过40％的患者对UDCA治疗表现为不完全应答，因此，对这些不完全应答的患者在临床上急需发展有效的治疗方法。 研究目的 1.观察自身抗体谱与PBC患者临床表现及疾病进展的相关性。 2.分析PBC患者与健康人以及PBC患者不同分组间T细胞亚群变化，并进一步分析肝硬化不同阶段PBC患者T细胞亚群与临床指标的相关性。 3.初步研究人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）治疗PBC的临床安全性及有效性。 研究内容和方法 1.通过间接免疫荧光法检测外周血自身抗体(ANA、AMA)，免疫印迹法检测AMA-M2、anti-PML、anti-gp210、anti-Sp100、anti-BPO、anti-52KD，我们对123例PBC患者进行了自身抗体检测，并查阅患者相关临床资料、实验室及B超、影像学检查资料。 2.采用流式细胞染色技术，我们对49例肝硬化不同阶段PBC患者外周血T淋巴细胞亚群进行频率检测。 3.利用人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）外周静脉回输给7例对UDCA不完全应答的PBC患者，观察UC-MSCs治疗PBC的安全性及初步有效性。 研究结果 1.通过比较肝硬化期与非肝硬化期患者血清中ANA、AMA、AMA-M2、anti-PML、anti-SP100、anti-52KD阳性检测率，我们发现差异均无统计学意义。anti-gp210阳性率肝硬化组显著高于非肝硬化组。anti-gp210阳性的PBC患者转氨酶、胆红素及碱性磷酸酶水平显著高于anti-gp210阴性患者，而胆碱酯酶及白蛋白水平较之偏低。 2.与健康人相比，PBC患者外周CD4+T细胞频率升高, CD8+T细胞频率降低，CD4/CD8比例上升，且失代偿期PBC患者比值明显高于代偿期；CD8+T细胞频率与ALB、CHE、PA显著正相关，而与PT和INR显著负相关；CD4/CD8T细胞的比值与PT和INR显著正相关，与ALB、PA和CHE显著负相关。Th1细胞亚群频率和CHE、自身抗体数目呈显著正相关，而与TBA、PT、INR显著负相关。Th17细胞亚群频率和自身抗体数目呈显著正相关，与ALB、ALB/GLO呈显著负相关。 3.UC-MSCs回输治疗PBC后病人没有发生近期及远期不良反应；UC-MSCs输注可显著降低血清ALP水平，且在48周的随访期间的MRS保持稳定，同时可以改善PBC患者的生活质量，减轻疲劳和皮肤瘙痒症状。UC-MSCs回输后某些患者的肝功能和临床症状均改善。 结论 1.本研究发现：与anti-gp210阴性的患者相比，anti-gp210阳性的患者有更严重的胆汁淤积和肝功能损害，anti-gp210对疾病的进展有一定的预测价值。 2.PBC患者外周CD8+T细胞的数量显著减少，特别是失代偿期阶段患者，可能促进了疾病的进展。此外升高的外周CD4+T细胞很可能间接破坏了肝脏的合成功能。Th17细胞可能影响了PBC患者肝脏的蛋白合成功能。 3.对于UDCA治疗不完全应答的PBC患者，通过外周静脉输注UC-MSCs是安全和可行的。
【学位单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：博士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R575.22
【部分图文】：

图 1-2 gp210 阳性患者肝组织荧光切片图图示：gp210 阳性（肝片）：荧光镜下肝细胞核呈均匀荧光，核周增强，呈特征性环状。图 1-3 免疫印迹法检测条带，免疫印迹法测 gp210+++讨 论迄今，PBC的病因不明，目前认为是与多种因素的相互作用有关，主要包

图 1-3 免疫印迹法检测条带，免疫印迹法测 gp210+++讨 论迄今，PBC的病因不明，目前认为是与多种因素的相互作用有关，主要包括环境[29]、免疫、感染[30]及遗传基因[31]等因素。发病机制认为是感染、环境等因素作用于遗传易感人群，使机体自身免疫耐受机制破坏，体内自身反应性T和B淋巴细胞活化或过度活化，免疫耐受打破或免疫调节异常导致。PBC的起病隐匿，自然病程进展个体差异性大，因此早期诊断、预测及治疗显得尤为重要。UDCA是目前FDA认可的治疗PBC有效的药物。按13～15mg-1kg-1day-1的标14

C 患者 Th1、Th17 细胞占 CD4+T 细胞的比例与健康对照比例 ， PBC 患者 CD4/CD8 T 细胞的比值高于代偿期分析了代偿期 PBC 患者和失代偿期 PBC 患者 T 细胞亚图 2-3、图 2-4 所示：代偿期 PBC 患者 CD3+T 细胞、CD胞占淋巴细胞百分比和失代偿期 PBC 患者比较差异无统值得一提的是失代偿期 PBC 患者 CD4/CD8 T 细胞的比高于代偿期(2.50 士 1.43%)(P<0.05)。从分泌细胞因子的患者Th1类细胞和Th17类细胞占CD4+T 细胞比例与代偿 0.05)。
【参考文献】

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1 唐映梅;包维民;夏华向;尤丽英;朱森林;杨晋辉;;原发性胆汁性肝硬化患者肝脏和外周血淋巴细胞活化状态与γ干扰素、白介素2表达的研究[J];昆明医学院学报;2010年07期

2 汪群英;徐芸;李建生;王进;;原发性胆汁性肝硬化患者外周血T细胞表型及细胞因子的变化及意义[J];临床荟萃;2008年07期

3 梁艳;杨再兴;曾贤铭;曹鲁宁;周晔;邓安梅;仲人前;;原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表达水平初探[J];临床检验杂志;2007年01期

4 何文革,孙永涛,邹爱民;原发性胆汁性肝硬化外周血T细胞亚群及细胞因子的检测[J];胃肠病学和肝病学杂志;2004年05期

5 宫颜英;王斯文;房淑华;刘维新;;晚期原发性胆汁性肝硬化患者外周血调节性T细胞表达分析[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年03期

6 刘燕敏,闫惠平,汪俊韬;肝功能异常患者中自身抗体及自身免疫性肝病的检测[J];中华肝脏病杂志;2004年06期

7 周琳,范列英,王皓,杨丹榕,屠小卿,侯晓菁,谭龙益,孔宪涛,仲人前;人B细胞激活因子基因表达水平的荧光定量测定[J];中华检验医学杂志;2004年05期

8 胡安斌,何晓顺,蔡继业,郑启昌;胚胎干细胞向胆管上皮细胞定向分化的体外实验研究[J];中华医学杂志;2005年36期

9 陈燕;周晔;邓安梅;陈波;蒋天舒;仲人前;;中国东部汉族人群原发性胆汁性肝硬化与HLA-DRB1相关性分析[J];中国免疫学杂志;2006年12期

本文编号：2893716