姜黄素衍生物抗实验性大鼠肝纤维化的作用及其机制

发布时间：2017-04-09 05:25

  本文关键词：姜黄素衍生物抗实验性大鼠肝纤维化的作用及其机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的观察姜黄素衍生物抗肝纤维化的作用并探讨其可能的作用机制。 方法（1）实验性大鼠肝纤维化模型的建立：雄性SD大鼠共60只，共分四组，每组15只，分别为正常组、模型组、普通姜黄素组、姜黄素衍生物组。除正常组外其余三组分别用四氯化碳混合液（CCL4:橄榄油=2:3）在大鼠四肢内侧皮下注射，首次5ml/kg,后每次2ml/kg,每周2次，诱导大鼠形成肝纤维化模型。 （2）检测姜黄素衍生物的抗肝纤维化的作用及可能的相关机制：从第5周开始，姜黄素衍生物组每日给予姜黄素衍生物100mg/kg尾静脉注射治疗，姜黄素组每日给予普通姜黄素300mg/kg灌胃治疗，正常组和模型组每日给予生理盐水0.2ml每只尾静脉注射，共治疗6周。10周后治疗结束，常规乙醚麻醉后取大鼠心脏采血做肝功能及肝纤维化血清学指标检测，并取肝组织做羟脯氨酸（Hpy）水平检测，剖腹取肝脏左叶同一部位，10%中性甲醛常规固定，做HE及天狼星红染色观察肝脏病理学改变，同时对肝脏纤维化程度进行评估并予以分级；用免疫组化方法观察TGF-β1及α-SMA细胞因子和I型胶原在大鼠肝脏组织中的表达及分布情况；用RT-PCR方法检测肝组织中TGF-β1的mRNA的水平；用WesternBlot方法检测TGF-β1及α-SMA蛋白在大鼠肝脏中的蛋白表达量。结果(1)肝功及肝纤维化指标的比较：与模型组比较，姜黄素及姜黄素衍生 物均能有效地改善肝功能，降低大鼠血清中肝纤维化指标水平，降低肝组织羟脯氨酸（Hpy）含量，姜黄素衍生物组与模型组ALT、AST、HA、LN、PCIII、Hyp检测结果分别为（220.1±148.2）U/L对比（513.2±279.6）U/L、（366.7±157.3）U/L对比（700.5±305.9）U/L、（150.0±26.0）ug/L对比（292.8±105.6）ug/L、（28.2±4.8）ug/L对比（48.8±7.1）ug/L、（30.2±3.8）ug/L对比（46.3±6.4）ug/L、（293.8±54.3）ug/g对比（412.8±53.8）ug/g，二者差异均有统计学意义（P值均0.05）； (2)病理图片与病理分级的比较：与模型组比较，姜黄素衍生物组能明显降低肝脏病理学分级（姜黄素衍生物组病理学分级主要发布于2级，而模型组主要分布于5、6级），姜黄素衍生物组肝小叶结构较正常，有少量纤维组织增生，可见少量炎细胞浸润及脂肪变和空泡变，，未见假小叶形成，纤维组织增生不明显，而模型组肝小叶结构破坏明显，炎细胞浸润及肝脂肪变明显，肝索排列紊乱，汇管区纤维组织明显增生，部分形成假小叶，姜黄素衍生物组较模型组明显抑制纤维增生，改善肝脏病理学组织结构； （3）用免疫组化方法检测，发现经过姜黄素衍生物治疗后的大鼠肝内TGF-β1和α-SMA分子表达较模型组明显减少，且I型胶原在姜黄素衍生物组中沉积明显减少。 （4）RT-PCR法检测结果显示姜黄素衍生物组中TGF-β1的mRNA水平较模型组明显减少；WesternBlot方法检测结果显示TGF-β1和α-SMA蛋白表达量在肝组织中的表达较模型组明显减少降低，二者差异有统计学意义（P值0.05）。 结论本研究表明姜黄素衍生物具有明显的抗肝纤维化作用，而降低TGF-β1及α-SMA细胞因子表达，抑制肝星状细胞活化可能是其抗肝纤维化作用机制之一。
【关键词】：肝纤维化 姜黄素 姜黄素衍生物 转化生长因子β1 平滑肌肌动蛋白α
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R285.5;R575.2
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-14
• 1 材料与方法14-21
• 1.1 实验材料14-17
• 1.1.1 主要药物及试剂14
• 1.1.2 主要仪器14-15
• 1.1.3 实验动物15
• 1.1.4 常用试剂的配置15-17
• 1.2 实验方法17-21
• 1.2.1 动物分组及实验设计17
• 1.2.2 标本采集17
• 1.2.2.1 血清标本采集17
• 1.2.2.2 肝组织标本采集17
• 1.2.3 测定指标及操作方法17-20
• 1.2.4 统计学数据分析20-21
• 2 结果21-28
• 2.1 血清肝功能及肝脏羟脯氨酸含量检测21
• 2.2 血清肝纤维化指标检测结果21-22
• 2.3 肝脏病理学变化22-24
• 2.4 肝脏免疫组化检测结果24-26
• 2.5 RT-PCR检测结果26
• 2.6 Western-Blot检测结果26-28
• 3 讨论28-30
• 全文总结30-31
• 参考文献31-33
• 文献综述33-46
• 参考文献42-46
• 致谢46-47
• 攻读硕士学位期间发表的文章47-48

【参考文献】

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1 徐波;陆茵;吴家明;张丽娟;;姜黄素抗肝纤维化分子机制研究进展[J];中国中医药信息杂志;2008年03期

  本文关键词：姜黄素衍生物抗实验性大鼠肝纤维化的作用及其机制，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：294570