HNF4α在胎肝干细胞定向分化修复肝组织损伤中作用机理的研究

发布时间：2021-01-01 05:36

　　目的肝组织损伤是各型肝脏疾病的共同病理基础,严重的肝组织损伤将引起肝功能衰竭;干细胞治疗修复肝组织损伤是目前国内外医学界研究的一个热点,但由于存在体外富集纯化困难、定向分化机制不明等问题而使其应用受到限制。胎肝细胞中富含的具有定向分化功能的干细胞是干细胞治疗研究中的重要细胞来源。本研究拟探讨建立体外扩增大鼠胚胎肝干细胞并抑制其分化的培养条件及方法,并在此基础上,将胎肝干细胞通过门静脉植入肝损伤大鼠体内,观察肝脏修复情况,检测治疗前后HNF4α表达变化,探讨HNF4α在胎肝干细胞促进肝组织损伤修复中的作用。本研究内容共分为两部分:1.体外琼脂克隆培养对胎肝干细胞分化的影响;2.HNF4α在胎肝干细胞促肝组织损伤修复中的作用。探讨这一重要调节过程中分子机理将为临床应用胎肝干细胞移植治疗肝脏疾病奠定重要的基础。方法1.无菌条件下利用Ⅳ型胶原酶结合机械消化法制备14d胎龄大鼠胎肝干细胞悬液。将原代分离得到的大鼠胎肝干细胞分成两组,其中一组胚胎肝干细胞接种至Ⅰ型胶原包被的培养板中,常规贴壁培养。另一组细胞则接种至无血清软琼脂培养基中进行悬浮培养;悬浮培养基分为上下两层,底层为含HGF的1.2%琼... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

胎肝干细胞悬浮培养与贴壁培养的比较

第四军医大学硕士学位论文P 表达明显下降，ALB 的表达呈明显上升的趋势（P<0.01）。而悬浮培的胎肝干细胞 AFP 和 ALB 的表达在培养前后未见明显变化（P>0.05）图 5、6）

实时定量PCR分析AFPmRNA培养前后的表达变化


本文编号：2951016