乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBSP与肝细胞泛转录表达因子的相互作用

发布时间：2021-01-02 15:08

　　乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白（hepatitis B spliced protein，HBSP）是由2447nt-489nt单剪接型2.2Kb HBV剪接变异体编码产生的一种蛋白。已有研究显示，它可诱导肝细胞凋亡，与肝硬化发生呈正相关；HBSP还可诱导特异性CTL活性，导致肝脏损伤。目前该蛋白的具体致病机制仍未阐明，为了更深入了解其致病性，本实验室在前期研究工作中，以酵母双杂交筛选的方法获得了多个与HBSP相互作用的肝细胞蛋白，泛转录表达因子（Ubiquitously expressed transcript，UXT）即是其中之一。本研究首先构建pCMVTNT-UXT重组载体，利用TNT兔网织红细胞裂解物转录/翻译偶联系统体外转录翻译UXT蛋白，诱导表达和纯化GST-HBSP融合蛋白，通过GST pull-down实验，证实了HBSP和UXT在体外具有直接相互作用。进一步通过哺乳动物细胞双杂交，将pBIND-HBSP与pACT-UXT重组质粒和报告基因载体pG5luc共转染肝癌细胞株Huh7细胞，结果证实HBSP和UXT在哺乳动物细胞存在相互作用。另外，本研究成功包装表达HBSP的重组腺... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
前言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
附录一 英文缩略词表
附录二 试剂配方
附录三 主要仪器设备
综述
    参考文献
致谢



本文编号：2953124