骨髓间充质干细胞培养上清对肝星状细胞所致肝纤维化治疗的实验研究

发布时间：2021-01-03 11:34

　　目的肝纤维化是由于各种急慢性炎症刺激肝脏导致损伤修复反应而产生的结果,其中,肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSC）的活化被认为是纤维化发生的中心环节,现研究已证实骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）移植治疗能改善甚至逆转肝纤维化,但其具体机制尚不清楚。本研究通过用人 BMSCs（human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs）培养上清诱导HSC,观察诱导后对HSC增殖周期及表达的基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）、基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及组织抑制基质金属蛋白酶-1（tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）的影响。方法在无菌条件下抽取肝硬化志愿者骨髓5ml,采用密度梯度离心法分离HBMSCs,接种于25cm2塑料培养瓶中培养,收集原代培养7d的HBMSCs培养上清,加入HSC中共培... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图４－１原代培养７ｄ的骨髓间充质干细胞呈梭形，贴壁生长（倒置显微镜，ｘｌ〇）??

兰州大学硕士研究生学位论文??图４－２?ＨＢＭＳＣｓ细胞表面标志??４．?３流式细胞仪分析ＨＢＭＳＣｓ培养上清与ＨＳＣ共培养后ＨＳＣ细胞周期??流式细胞仪检测结果显示，ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培养上清共培养２４ｈ组与ＨＳＣ??培养２４ｈ组相比，ＨＳＣ未见明显的抑制（ｐ?＞?０．０５）。而ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培养上清??培养４８ｈ组与ＨＳＣ培养４８ｈ组相比，Ｇ１期细胞显著增加（／ＫｆｔＷ），Ｓ期细胞减??少（／Ｋ０．Ｗ），见图４－３及表４－１。??２２??

培养上清共培养组分别培养２４ｈ和４８ｈ后，ＭＭＰ－２表达量均下降，低于ＨＳＣ培养??组，差异具有统计学意义（；？＜０．Ｗ）。表明ＨＢＭＳＣｓ可抑制ＨＳＣ表达ＭＭＰ－２，??结果见图４－４及表４－２。??１?２?３?４?５??］：ＨＢＭＳＣｓ阴性对照组；２：?ＨＳＣ培养２４ｈ组；３：?ＨＳＣ培养４８ｈ组；??４：?ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培养上清共培养２４ｈ组；５：?ＨＳＣ和ＨＢＭＳＣｓ培养上清共培养４８ｈ组??图４－４各组中ＭＭＰ－２蛋白的表达???表４－２?各组中ＭＭＰ－２蛋白的表达（ｘ?土?ｓ）?????ｎ?ＭＭＰ－２?（ＩＯＤ）??ＨＢＭＳＣｓ?阴性对照?３?６８１．３８７２±６７．１９８９??ＨＳＣ?培养?２４ｈ?３?６４４．０４８７±６６．７１６］??ＨＳＣ?培养?４８ｈ?３?７７１．０３３４±８６．２７５．８??ＨＳＣ?和?ＨＢＭＳＣｓ?培养上清共培养?２４ｈ?３?３８４．９０２?ｌ±７４．３３９０ａ??ＨＳＣ?和?ＨＢＭＳＣｓ?培养上清共培养?４８ｈ?３?２２９．１７７２±４７．９０８７ｂ??注：＾ＨＳＣ培养２４ｈ组相比较，％ＨＳＣ培养４８ｈ组相比较，??４．５?ＥＬＩＳＡ法检测各实验组细胞上清液中ＭＭＰ－１、ＴＩＭＰ－１蛋白的表达??ＥＬＩＳＡ法结果显示，ＨＢＭＳＣｓ可以促进体外培养的ＨＳＣ?ＭＭＰ－１的表达，??ＨＢＭＳＣｓ诱导ＨＳＣ２４ｈ、４８ｈ，与ＨＳＣ培养２４ｈ、４８ｈ相比较，差异具有统计学意??义（Ｐ＜０．０５），同时结果显示，ＨＢＭＳＣｓ可以抑制体外培养的ＨＳＣＴＩＭＰ－１的表达，??ＨＢＭＳＣｓ培养上清和ＨＳＣ共培养２４ｈ、４８ｈ

【参考文献】：
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本文编号：2954912