RhoA/ROCK1信号通路在BMSCs肝向分化过程中的变化特征
发布时间：2021-01-03 18:31
目的:探讨Rho A/ROCK1信号通路在骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）向肝细胞分化过程中的变化特征,明确BMSCs肝向分化过程中存在的新干预靶点,以期为临床BMSCs移植治疗肝硬化提供更好的理论依据。方法:体外培养BMSCs,应用不同浓度的肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）（0ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、30ng/ml）诱导BMSCs分化,分别于3d、1w、2w、3w应用MTT检测细胞增殖情况,生化试剂盒检测甲胎蛋白（alpha fetal protein,AFP）、白蛋白（Albumin,ALB）的含量,Western blot检测Rho A、ROCK1、p-MLC蛋白的表达。结果:1、细胞增值率变化显示:不同浓度的HGF（0ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、30ng/ml）诱导BMSCs肝向分化,细胞增值率以HGF浓度为20ng/ml时最佳（P<0.05）,且随着时间的延长细胞增值率呈升高趋势,3w时细胞增值率最高（P<0.05）。2...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同时间段不同浓度HGF诱导BMSCs肝向分化形态（显微镜100×）
0ng/ml 组与 10ng/ml 组，10ng/ml 组与 20ng/ml 组，20ng/ml 组与 30，分别相比 p<0.05，差异有统计学意义；3w 时，0ng/ml 组与 10ng/ml 组，10与 20ng/ml 组，20ng/ml 组与 30ng/ml 组，分别相比 p<0.05，差异有统计。在同一 HGF 浓度时，分别将 3d 时的增值率与 1w，1w 时的增值率与 2w 时的增值率与 3w，分别相比 p<0.05，差异有统计学意义。（表 1、图 2）表 1 不同时间段各 HGF 浓度组 BMSCs 肝向分化细胞增值率的变化（%）（x±s，nGF 浓度 3d 1w 2w 3w F 值 Png/ml 76.26±0.249 79.09±0.217*83.80±0.227*92.16±0.242*2643.71 <0ng/ml 80.53±0.264#82.57±0.126*#86.46±0.227*#93.55±0.273*#1721.16 <0ng/ml 87.83±0.237#90.55±0.229*#92.99±0.216*#98.04±0.212*#890.96 <0ng/ml 84.25±0.221#87.36±0.230*#89.22±0.181*#94.45±0.222*#1193.48 < 值 913.16 1829.55 1016.64 332.42 — — 值 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 — —：与 3d 组相比，*p<0.05；与 0ng/ml 组相比，#p<0.05。
图 2 不同时间段各 HGF 浓度组 BMSCs 肝向分化细胞增值率变化曲线图3.3 生化试剂盒在 3d、1w、2w、3w 分别检测不同浓度 HGF 诱导下 BMSCs 肝向分化时 AFP、ALB 的含量变化情况。AFP、ALB 浓度变化情况：20ng/ml 组、30ng/ml 组培养的 BMSCs 在培养的第 3d 无 AFP 的表达，第 1w 开始出现 AFP 的表达，2w 时表达增强，3w 时表达减弱，20ng/ml 组、30ng/ml 组培养 2w 时开始出现 ALB 的表达，3w 时表达增高。10ng/ml 组培养 3w 时 AFP 稍有表达，未见 ALB 的表达，0ng/ml 组在培养过程
【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt信号通路与人类疾病相关性的研究进展[J]. 张遥,任秀智,韩金祥,鲁艳芹. 中国生物制品学杂志. 2018(01)
[2]骨髓间充质干细胞的定向分化潜能[J]. 李乔乔,吴振强,张丽君. 中国组织工程研究. 2017(25)
[3]松果菊苷诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究[J]. 尉大为,葛锌雨,刘奕含,张志成,唐朝,田原. 中药药理与临床. 2017(02)
[4]骨髓间充质干细胞移植可促进移植胰岛周围新生血管形成[J]. 李睿,董红丽,刘汝斌,刘宝林. 器官移植. 2017(02)
[5]骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展[J]. 谢树才,张剑权,蒋锡丽,周帅. 中国组织工程研究. 2016(50)
[6]骨髓间充质干细胞迁移的信号通路的研究进展[J]. 吴志方,罗辉,罗毅文. 医学综述. 2016(22)
[7]经肝固有动脉自体骨髓间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效及安全性[J]. 郑盛,杨涓,刘琼,楼维新. 肝脏. 2016(02)
[8]Wnt/β-catenin信号通路及其对骨髓间充质干细胞多向分化调节研究进展[J]. 李云矗,徐刚,徐成福. 牡丹江医学院学报. 2016(01)
[9]肝细胞生长因子的浓度和诱导时间对人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的影响[J]. 潘兴南,魏开鹏. 肝脏. 2013(06)
[10]Hepatogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by insulin like growth factor-Ⅰ[J]. Maryam Ayatollahi,Masoud Soleimani,Seyed Ziaadin Tabei,Maryam Kabir Salmani. World Journal of Stem Cells. 2011(12)
本文编号：2955283
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同时间段不同浓度HGF诱导BMSCs肝向分化形态（显微镜100×）
0ng/ml 组与 10ng/ml 组，10ng/ml 组与 20ng/ml 组，20ng/ml 组与 30，分别相比 p<0.05，差异有统计学意义；3w 时，0ng/ml 组与 10ng/ml 组，10与 20ng/ml 组，20ng/ml 组与 30ng/ml 组，分别相比 p<0.05，差异有统计。在同一 HGF 浓度时，分别将 3d 时的增值率与 1w，1w 时的增值率与 2w 时的增值率与 3w，分别相比 p<0.05，差异有统计学意义。（表 1、图 2）表 1 不同时间段各 HGF 浓度组 BMSCs 肝向分化细胞增值率的变化（%）（x±s，nGF 浓度 3d 1w 2w 3w F 值 Png/ml 76.26±0.249 79.09±0.217*83.80±0.227*92.16±0.242*2643.71 <0ng/ml 80.53±0.264#82.57±0.126*#86.46±0.227*#93.55±0.273*#1721.16 <0ng/ml 87.83±0.237#90.55±0.229*#92.99±0.216*#98.04±0.212*#890.96 <0ng/ml 84.25±0.221#87.36±0.230*#89.22±0.181*#94.45±0.222*#1193.48 < 值 913.16 1829.55 1016.64 332.42 — — 值 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 — —：与 3d 组相比，*p<0.05；与 0ng/ml 组相比，#p<0.05。
图 2 不同时间段各 HGF 浓度组 BMSCs 肝向分化细胞增值率变化曲线图3.3 生化试剂盒在 3d、1w、2w、3w 分别检测不同浓度 HGF 诱导下 BMSCs 肝向分化时 AFP、ALB 的含量变化情况。AFP、ALB 浓度变化情况：20ng/ml 组、30ng/ml 组培养的 BMSCs 在培养的第 3d 无 AFP 的表达，第 1w 开始出现 AFP 的表达，2w 时表达增强，3w 时表达减弱，20ng/ml 组、30ng/ml 组培养 2w 时开始出现 ALB 的表达，3w 时表达增高。10ng/ml 组培养 3w 时 AFP 稍有表达，未见 ALB 的表达，0ng/ml 组在培养过程
【参考文献】：
期刊论文
[1]Wnt信号通路与人类疾病相关性的研究进展[J]. 张遥,任秀智,韩金祥,鲁艳芹. 中国生物制品学杂志. 2018(01)
[2]骨髓间充质干细胞的定向分化潜能[J]. 李乔乔,吴振强,张丽君. 中国组织工程研究. 2017(25)
[3]松果菊苷诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究[J]. 尉大为,葛锌雨,刘奕含,张志成,唐朝,田原. 中药药理与临床. 2017(02)
[4]骨髓间充质干细胞移植可促进移植胰岛周围新生血管形成[J]. 李睿,董红丽,刘汝斌,刘宝林. 器官移植. 2017(02)
[5]骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展[J]. 谢树才,张剑权,蒋锡丽,周帅. 中国组织工程研究. 2016(50)
[6]骨髓间充质干细胞迁移的信号通路的研究进展[J]. 吴志方,罗辉,罗毅文. 医学综述. 2016(22)
[7]经肝固有动脉自体骨髓间充质干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效及安全性[J]. 郑盛,杨涓,刘琼,楼维新. 肝脏. 2016(02)
[8]Wnt/β-catenin信号通路及其对骨髓间充质干细胞多向分化调节研究进展[J]. 李云矗,徐刚,徐成福. 牡丹江医学院学报. 2016(01)
[9]肝细胞生长因子的浓度和诱导时间对人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的影响[J]. 潘兴南,魏开鹏. 肝脏. 2013(06)
[10]Hepatogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by insulin like growth factor-Ⅰ[J]. Maryam Ayatollahi,Masoud Soleimani,Seyed Ziaadin Tabei,Maryam Kabir Salmani. World Journal of Stem Cells. 2011(12)
本文编号：2955283
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