胆红素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶1A1与原发性肝内胆管结石关系的研究
发布时间:2021-01-07 16:04
目的:胆红素葡萄糖醛酸基转移酶(BilirubinUDP-glucuronsytran-sferase,B-UGT)是胆红素代谢的关键酶,其编码基因为UGT1A1。既往实验研究提示B-UGT活性降低可能是导致胆汁中单结合胆红素增多,形成致石胆汁的重要原因。本实验观察原发性肝内胆管结石(PrimaryIntrahepaticStones,PIS)患者肝细胞内胆红素葡萄糖醛酸基转移酶基因UGT1A1mRNA及其蛋白(B-UGT)表达情况,在基因水平探索原发性肝内胆管结石的发病机理及调控机制对象与方法:1、以原发性肝内胆管结石病患者肝脏为标本,取33例肝内胆管结石患者肝脏(HS组),其中男性患者19人,女性14人。15例非结石患者肝脏(其中肝囊肿患者8人,肝血管瘤6人,肝癌1人,男性9人,女性6人)为对照组(NS组)。在术中将肝组织切下后,立即切除适当大小装入冻存管,急送泸州医学院附属医院中心实验室液氮速冻,然后转存于-80摄氏度冰箱保存。2、肝脏细胞内UGT1A1基因mRNA表达量测定:以GAPDH为内参照,采用Real-timeQuantitativePCR方法检测UGT1A1基因mRN...
【文章来源】:西南医科大学四川省
【文章页数】:73 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
s形动力学曲线,表明出现特异性扩增Fig1、Nucleicacidamplificationprocesssshapecurve
图1 : s形 动力 学 曲 线 , 表明 出现 特异 性 扩 增 Fi g 1 、N u c l e ic ac i d am p li f i c at io n pr o ce s s s sh a p e cu r ve 图2 : 图中 溶 解曲 线 均为 单 一吸 收 峰 ,无 明 显干 扰 峰出 现 Fi g 2、 T he so lu bi l i t y cu r ve sh o ws si n g le ab so r pt io n p ea k 2. 5. 2 、标 准曲 线 做标 准 曲线 得 出 扩展 荧 光 值与 基 因拷 贝 数 的实 时 变 化关 系 ,从而 根据 样品 的荧 光 值在 扩 增 过程 中 的 变化 , 求 出样 品 的 D N A 拷贝 。以
率 E 值 E= 9 5. 7 % 以及 相 关性 R 值 = 0. 99 7。 说明 扩 增效 率 高 ,相关 性好 (图 3) 。 图3 : 标准 曲 线 Fi g 3: T he s ta nd a rd c u rv e 2. 5 . 3、 Pc r 结 果 分析 根 据 标准 曲 线 和样 本 PC R 反 应 C t值 , 用 Bi o -R a d iQ 5 软 件 分析 ,按 Pf a ff l 法 , 基 因 表 达 = (1 + Et a rg e t)△C t t ar g et (c o nr ro l -e x p t )/( 1 + Ere f e r en ce )△C tre f e r en ce (c o nr r ol - ex p t )。
【参考文献】:
期刊论文
[1]胆色素结石成因的研究进展[J]. 周薇,唐乾利. 医学综述. 2008(09)
[2]肝胆管结石发病机制的研究进展[J]. 段炼,李宜雄. 国外医学.外科学分册. 2005(04)
[3]升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响[J]. 朱培庭,张静喆,章学林,袁作彪,张红英,高炬. 中西医结合学报. 2005(03)
[4]肝内胆管结石外科治疗选择(附407例分析)[J]. 彭民浩,陈希纲,陈滨,黎乐群. 中华肝胆外科杂志. 2003(12)
[5]胆红素和胆汁酸调节葡萄糖醛酸基转移酶的表达[J]. 毛燕燕,李延青,郝洪声,赵斌,于涛,张尚忠,赵宪邨. 山东大学学报(医学版). 2002(02)
[6]应用RNA保护分析法观察原发性肝内胆管结石患者肝细胞内葡萄糖醛酸转移酶基因的表达[J]. 赵青川,樊代明,李开宗,陈宝军,王德盛. 中华实验外科杂志. 2001(02)
[7]肝脏胆红素葡萄糖醛酸化障碍对胆石形成的作用[J]. 杨文奇,祝学光,张红军,程锡魁,赵华. 中华消化杂志. 1999(01)
[8]原发性肝内胆管结石患者肝细胞中UDP-GT mRNA原位分子杂交[J]. 赵青川,樊代明,李开宗,付由池,史宪杰,陶开山,范黎. 第四军医大学学报. 1998(02)
[9]OBSERVATION ON SOLUBILITY AND PRO-NUCLEATIVE ACTIVITY OF MONOCONJUGATED BILIRUBIN[J]. 祝学光,涂向群,王人颢,韩健德,刘玉京. Chinese Medical Journal. 1996(07)
[10]单结合与非结合胆红素水溶液的电镜动态对比观察及其与胆石形成的关系[J]. 涂向群,萧荫祺,邹一平,马雅銮,张玉芝. 中华肝胆外科杂志. 2008 (11)
本文编号:2962843
【文章来源】:西南医科大学四川省
【文章页数】:73 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
s形动力学曲线,表明出现特异性扩增Fig1、Nucleicacidamplificationprocesssshapecurve
图1 : s形 动力 学 曲 线 , 表明 出现 特异 性 扩 增 Fi g 1 、N u c l e ic ac i d am p li f i c at io n pr o ce s s s sh a p e cu r ve 图2 : 图中 溶 解曲 线 均为 单 一吸 收 峰 ,无 明 显干 扰 峰出 现 Fi g 2、 T he so lu bi l i t y cu r ve sh o ws si n g le ab so r pt io n p ea k 2. 5. 2 、标 准曲 线 做标 准 曲线 得 出 扩展 荧 光 值与 基 因拷 贝 数 的实 时 变 化关 系 ,从而 根据 样品 的荧 光 值在 扩 增 过程 中 的 变化 , 求 出样 品 的 D N A 拷贝 。以
率 E 值 E= 9 5. 7 % 以及 相 关性 R 值 = 0. 99 7。 说明 扩 增效 率 高 ,相关 性好 (图 3) 。 图3 : 标准 曲 线 Fi g 3: T he s ta nd a rd c u rv e 2. 5 . 3、 Pc r 结 果 分析 根 据 标准 曲 线 和样 本 PC R 反 应 C t值 , 用 Bi o -R a d iQ 5 软 件 分析 ,按 Pf a ff l 法 , 基 因 表 达 = (1 + Et a rg e t)△C t t ar g et (c o nr ro l -e x p t )/( 1 + Ere f e r en ce )△C tre f e r en ce (c o nr r ol - ex p t )。
【参考文献】:
期刊论文
[1]胆色素结石成因的研究进展[J]. 周薇,唐乾利. 医学综述. 2008(09)
[2]肝胆管结石发病机制的研究进展[J]. 段炼,李宜雄. 国外医学.外科学分册. 2005(04)
[3]升清胶囊对豚鼠胆石病相关基因的影响[J]. 朱培庭,张静喆,章学林,袁作彪,张红英,高炬. 中西医结合学报. 2005(03)
[4]肝内胆管结石外科治疗选择(附407例分析)[J]. 彭民浩,陈希纲,陈滨,黎乐群. 中华肝胆外科杂志. 2003(12)
[5]胆红素和胆汁酸调节葡萄糖醛酸基转移酶的表达[J]. 毛燕燕,李延青,郝洪声,赵斌,于涛,张尚忠,赵宪邨. 山东大学学报(医学版). 2002(02)
[6]应用RNA保护分析法观察原发性肝内胆管结石患者肝细胞内葡萄糖醛酸转移酶基因的表达[J]. 赵青川,樊代明,李开宗,陈宝军,王德盛. 中华实验外科杂志. 2001(02)
[7]肝脏胆红素葡萄糖醛酸化障碍对胆石形成的作用[J]. 杨文奇,祝学光,张红军,程锡魁,赵华. 中华消化杂志. 1999(01)
[8]原发性肝内胆管结石患者肝细胞中UDP-GT mRNA原位分子杂交[J]. 赵青川,樊代明,李开宗,付由池,史宪杰,陶开山,范黎. 第四军医大学学报. 1998(02)
[9]OBSERVATION ON SOLUBILITY AND PRO-NUCLEATIVE ACTIVITY OF MONOCONJUGATED BILIRUBIN[J]. 祝学光,涂向群,王人颢,韩健德,刘玉京. Chinese Medical Journal. 1996(07)
[10]单结合与非结合胆红素水溶液的电镜动态对比观察及其与胆石形成的关系[J]. 涂向群,萧荫祺,邹一平,马雅銮,张玉芝. 中华肝胆外科杂志. 2008 (11)
本文编号:2962843
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