体外实验证实利拉鲁肽通过上调Sirt1/PGC1α改善非酒精性脂肪肝
发布时间：2021-01-11 15:54
目的:深入研究GLP-1受体激动剂类似物liraglutide对PA诱导的Kupffer细胞NAFLD模型的治疗性作用。方法:（1）分离提取C57BL/6小鼠的肝脏Kupffer细胞,随机分为三组:空白对照组（对照组）;PA处理组（PA组）;liraglutide+PA组（治疗组）。PA浓度为0.3mmol/l,liraglutide浓度为100nmol/l。（2）RT-PCR检测炎症小体相关分子NLRP3、ASC、caspase-1,炎症因子IL-1b、IL-18、TNF-a及信号通路Sirt1、PGC1α的基因表达水平;Western blot检测炎症小体相关蛋白分子NLRP3、ASC、caspase-1、Sirt1、PGC1α的蛋白水平;ELISA试剂盒检测细胞培养上清的炎症因子IL-1b、IL-18、TNF-a的水平;透射电镜观察各组细胞的线粒体的形态;线粒体膜电位检测试剂盒检测各组细胞的线粒体膜电位。结果:PA引起NLRP3、ASC、caspase-1的蛋白及mRNA表达增加,而liraglutide能够产生显著的抑制作用;较空白组相比,PA组细胞上清液中的IL-1b、IL-...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Liraglutide缓解PA导致的NLRP3、ASC、caspase-1水平的增高Fig2-1LiraglutidealleviatedPA-inducedincreasesinproteinandmRNAlevelofNLRP3,ASCandcaspase-1.PAhadstimulatedinflammasomesbuthadbeenreducedbyliraglutide.A:westernblotresults.B,C,D:relativedensity.E,F,G:mRNAlevel.(*P<0.05,PAvsCON,#P<
图2-2 Liraglutide缓解PA导致的炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α水平的增高Fig2-2 Liraglutide alleviated PA-induced increases in IL-1β、IL-18、TNF-α. PA hadstimulated inflammation in Kupffer cells. But they had been reduced by liraglutide. A, B, C:ELISA results. D, E, F: mRNA level. (*P< 0.05, PA vs CON,#P< 0.05, PA + liraglutide vs PA).线粒体的质子泵存在于其内膜上，质子泵可将线粒体基质内的质子泵入内、外膜间隙中，线粒体进行氧化磷酸化、产生ATP的等代谢活动可是质子泵活动增强，导致膜间隙大量质子积累而带正电荷，线粒体基质则带负电荷，从而在线粒体内膜的两侧形成跨膜电位（ΔΨ），简称线粒体膜电位。是线粒体功能正常所必需的，当线粒体膜电位被破坏，则认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。凋亡过程中一个重要的变化即是线粒体膜电位的崩溃。经过同条件处理的细胞进行线粒体膜电位试剂盒检测后，结果如图所示（图2-3）。由图可以看出，PA处理后细胞的膜电位水平显著降低，GLP-1受体激动剂类似物liraglutide则明显逆转了线
图2-3 Liraglutide改善线粒体的形态和功能Fig2-3 Liraglutide improved the morphology and function of mitochondria.2.4 Liraglutide可上调Sirt1/p-AMPK/PGC1α信号通路我们测定了各组细胞的Sirt1和PGC1α的mRNA水平（图2-4），结果显示，PA处理组Sirt1和PGC1α的水平显著降低，而liraglutide治疗后，Sirt1和PGC1α的基因表达水平显著提高。同时Western Blot检测Sirt1和PGC1α的蛋白表达水平，同样出现相似的结果，与预期结果相符合。3 讨论近年来，人们的生活方式和饮食习惯也发生了巨大变化，带来的后果就是非感染型疾病的增多，如NAFLD。NAFLD是由肝脏脂肪积累占肝脏重量的>5%引起的
【参考文献】：
期刊论文
[1]Bariatric surgery in patients with non-alcoholic fatty liver disease-from pathophysiology to clinical effects[J]. Tea L Laursen,Christoffer A Hagemann,Chunshan Wei,Konstantin Kazankov,Karen L Thomsen,Filip K Knop,Henning Gr?nb?k. World Journal of Hepatology. 2019(02)
[2]Pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease in children and adolescence: From “two hit theory” to “multiple hit model”[J]. Yan-Lan Fang,Hong Chen,Chun-Lin Wang,Li Liang. World Journal of Gastroenterology. 2018(27)
本文编号：2971059
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Liraglutide缓解PA导致的NLRP3、ASC、caspase-1水平的增高Fig2-1LiraglutidealleviatedPA-inducedincreasesinproteinandmRNAlevelofNLRP3,ASCandcaspase-1.PAhadstimulatedinflammasomesbuthadbeenreducedbyliraglutide.A:westernblotresults.B,C,D:relativedensity.E,F,G:mRNAlevel.(*P<0.05,PAvsCON,#P<
图2-2 Liraglutide缓解PA导致的炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α水平的增高Fig2-2 Liraglutide alleviated PA-induced increases in IL-1β、IL-18、TNF-α. PA hadstimulated inflammation in Kupffer cells. But they had been reduced by liraglutide. A, B, C:ELISA results. D, E, F: mRNA level. (*P< 0.05, PA vs CON,#P< 0.05, PA + liraglutide vs PA).线粒体的质子泵存在于其内膜上，质子泵可将线粒体基质内的质子泵入内、外膜间隙中，线粒体进行氧化磷酸化、产生ATP的等代谢活动可是质子泵活动增强，导致膜间隙大量质子积累而带正电荷，线粒体基质则带负电荷，从而在线粒体内膜的两侧形成跨膜电位（ΔΨ），简称线粒体膜电位。是线粒体功能正常所必需的，当线粒体膜电位被破坏，则认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。凋亡过程中一个重要的变化即是线粒体膜电位的崩溃。经过同条件处理的细胞进行线粒体膜电位试剂盒检测后，结果如图所示（图2-3）。由图可以看出，PA处理后细胞的膜电位水平显著降低，GLP-1受体激动剂类似物liraglutide则明显逆转了线
图2-3 Liraglutide改善线粒体的形态和功能Fig2-3 Liraglutide improved the morphology and function of mitochondria.2.4 Liraglutide可上调Sirt1/p-AMPK/PGC1α信号通路我们测定了各组细胞的Sirt1和PGC1α的mRNA水平（图2-4），结果显示，PA处理组Sirt1和PGC1α的水平显著降低，而liraglutide治疗后，Sirt1和PGC1α的基因表达水平显著提高。同时Western Blot检测Sirt1和PGC1α的蛋白表达水平，同样出现相似的结果，与预期结果相符合。3 讨论近年来，人们的生活方式和饮食习惯也发生了巨大变化，带来的后果就是非感染型疾病的增多，如NAFLD。NAFLD是由肝脏脂肪积累占肝脏重量的>5%引起的
【参考文献】：
期刊论文
[1]Bariatric surgery in patients with non-alcoholic fatty liver disease-from pathophysiology to clinical effects[J]. Tea L Laursen,Christoffer A Hagemann,Chunshan Wei,Konstantin Kazankov,Karen L Thomsen,Filip K Knop,Henning Gr?nb?k. World Journal of Hepatology. 2019(02)
[2]Pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease in children and adolescence: From “two hit theory” to “multiple hit model”[J]. Yan-Lan Fang,Hong Chen,Chun-Lin Wang,Li Liang. World Journal of Gastroenterology. 2018(27)
本文编号：2971059
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