脱氧胆酸对C57BL/6小鼠回肠类器官生长的影响

发布时间：2021-01-17 12:02

　　目的建立小鼠小肠类器官培养系统,探讨脱氧胆酸（DCA）对小肠类器官生长的影响。方法取8周龄C57BL/6小鼠末段回肠,EDTA法分离,收集隐窝后Matrigel基质胶包埋,于完整培养基中培养。以无水酒精和正常小肠类器官为对照,予100μmol/L高浓度DCA短期干预2 d,10μmol/L DCA长期干预10 d,并去除DCA后再长期培养10 d,观察类器官的生长和出芽情况。结果高浓度DCA短期干预类器官,肠道类器官球形结构形成率、肠道类器官结构[形成率、类器官演化率和出芽数量均明显减少（P<0.05）,短期去除DCA四项指标仍减少（P<0.05）,长期去除DCA后仅肠道类器官结构形成率和出芽数量减少（P<0.05）。低浓度DCA短期干预肠道类器官结构形成率和出芽数量减小（P<0.05）,长期干预肠道类器官球形结构形成率、肠道类器官结构形成率和出芽数量明显减少（P<0.05）,去除DCA后仅肠道类器官结构形成率和出芽数量低于正常（P<0.05）。结论本研究成功建立小鼠小肠类器官培养技术,DCA损伤小肠类器官并影响其生长,长期去除DCA后可部分恢复其功... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2017,37(01)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

短期较高浓度DCA对小肠类器官生长的影响

4G）。去除DCA培养6d时传代，7d时肠道类器官球形结构形成率（[86.16±7.47）%vs（93.05±0.86）%和（93.52±1.42）%]以及10d时类器官演化率（[76.70±6.41）%vs（83.71±2.13）%和（85.68±5.05）%]基本和无水酒精、正常类器官无差异（P>0.05），10d时肠道类器官结构形成率仍低于无水酒精和正常类器官对照组（[65.78±1.62）%vs（77.89±1.65）%]和（[80.08±3.66）%，P<0.05]，10d后类器官基本恢复到正常状态（图4J），但出芽数量仍少于无水酒精和正常类器官对照组（6.70±1.53vs8.50±1.53和8.40±1.85，P<0.05）（图3）。3讨论Fuller等［11］在2012年提出利用肠道类器官球形结构形成率、肠道类器官结构形成率、类器官演化率和每个类器官出芽个数来评判类器官的生长情况。肠道类器官球形结构形成率和肠道类器官结构形成率可代表类器官的存活情况，从肠道类器官球形结构到肠道类器官结构的演化率可以明确ISCs的分化能力。由于每个出芽都有能力单独生长形成新的肠道类器官结构，出芽个数可以代表类器官的生长能力和分化能力。故而，本研究拟以此建立高脂饮食对肠道类器官损伤的模型，应用肠道类器官球形结构形成率、肠道类器官结构形成率、类器官演化率和出芽数来评估DCA对于小鼠回肠末端类器官的生长的影响。近数十年来随着我国经济的发展，人群饮食结构西方化，肥胖、炎症性肠并糖尿病等在我国发病率越来越高。高脂饮食可诱导肠腔内具有细胞毒性的次级胆汁酸——脱氧胆酸（DCA）和石胆酸的增加［12］。以往研究仅针对100μmol/L以上高浓度的DCA对于肠道上皮细胞和潘氏细胞的损伤作用进行研究，本研究首先采用高浓度100μmol/LDCA2d短期和低浓度10μmol/LDCA10d长期干预小肠类器官，并去除DCA影响长期培养10d后观?

哪诨?境［20］。而短期暴饮暴食对应我们研究中的高浓度DCA短期干预类器官模型，长期高脂饮食对应我们研究中低浓度长期DCA干预模型，我们推测短期大量的高脂饮食对于肠道损伤严重，即使恢复低脂饮食一段时间其损伤也无法恢复，而长期少量的高脂饮食也会导致肠道损伤，需要较长时间的低脂饮食才能部分ABCDEFGHIDCA100μmol/LControl(dehydratedalcohol)Normal2aysdfteraCADemovarl01aysd2aysd100μm100μm100μm100μm100μm100μm100μm100μm100μmJKL100μm100μm100μm01aysdfteraCADemovarl图4长期较低浓度DCA对小肠类器官生长的影响Fig.4Effectoflong-termtreatmentwithlow-concentrationDCAonintestinalorganoidsgrowth(×200).http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2017,37(1):6-12·11·


本文编号：2982846